β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG)测定试剂盒(酶联免疫方法)

1、-绒毛膜促性腺激素（-HCG）测定试剂盒（酶联免疫方法）使用说明书【产品名称】 产品名称：-绒毛膜促性腺激素（-HCG）测定试剂盒（酶联免疫方法） 英文名称：BETA SUBUNIT OF HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN ENZYME IMMUNOASSAY TEST KIT【包装规格】 48人份/盒、96人份/盒【预期用途】 本品系用纯化抗-绒毛膜促性腺激素（-HCG）包被的微孔板、酶标记抗- -HCG和-HCG标准品及其他必要辅助试剂制成。以双抗体夹心法原理定量检测血清或血浆中-绒毛膜促性腺激素（-HCG）含量，为唐氏综合征和神经管缺陷产前筛查分析软件配套试剂。【

2、检测原理】本试剂盒采用ELISA双抗体夹心法，包被抗体和酶标记抗体均为抗-HCG单克隆抗体，待测样品中的-HCG与微孔板中的包被抗体形成抗原抗体复合物，洗板后加入酶标记抗体形成三明治样的抗原抗体复合物，洗板后加显色液，其显色深浅与样品中的-HCG浓度成正比。【主要组成成份】本公司试剂盒的显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液为通用试剂，可混用，不同批次试剂盒的其它组份不得混用。试剂盒组成及主要组成成份如下：试验成分96人份48人份-HCG包被板：包被抗-HCG单克隆抗体96孔48孔标准品（0，5，20，50，150，300mIU/ml）（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、

3、抗乙肝病毒（HBV）表面抗原和抗丙肝病毒（HCV）抗体均为阴性；防腐剂：0.1%叠氮化钠1ml60.5ml6质控品（30，120mIU/ml）（立即可用）人血清溶于含蛋白的磷酸盐缓冲液；抗HIV抗体、抗乙肝病毒（HBV）防腐剂：0.1%叠氮化钠1ml20.5ml2酶标记物（立即可用）辣根过氧化酶标记的抗-HCG单克隆抗体，以蛋白稳化溶液加以稳定化；防腐剂：0.2%硫柳汞12ml16ml1浓缩洗液（10倍）氯化钠，含土温20和30mM Tris 防腐剂：0.1% 叠氮化钠50ml50 ml浓缩样品稀释液（50倍）磷酸盐缓冲液；防腐剂：0.1% 叠氮化钠10ml110ml1显色液A：柠檬酸、过氧化

4、氢等6.5 ml13.5 ml1显色液B：柠檬酸、四甲基联苯胺等6.5 ml13.5 ml1终止液：2mol/L H2SO46.5 ml13.5 ml1密封袋11封板膜11说明书11【储存条件及有效期】 于28避光保存，自成品检定合格之日起有效期为6个月。 打开包装的试剂盒剩余板条放入密封袋中28保存，一个月内用完。【适用仪器】 具有450nm波长的酶标仪 微孔板清洗器 10-100l、1ml 移液器 37恒温箱 微孔振荡器【样本要求】本试验用血清或血浆进行检测。血清或血浆勿使用染菌、脂血或溶血样品。按照标准方法收集血清，室温保存样品不要超过8小时，若实验在8小时以后进行，需将样品保存在210

5、，如保存超过1周则保存在20。【检验方法】1、试剂盒在室温平衡2030分钟，浓缩样品稀释液用生理盐水稀释50倍，浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释10倍，标准品、质控品分辨用1ml蒸馏水复溶，将板条固定于板架上，剩余的板条用封板膜密封并放入密封袋中保存。2、待检标本用稀释后的稀释液1：1000倍稀释，建议按以下方法进行：（1）先将样品做1:100稀释：即将稀释后的样品稀释液990l加入一洁净小管内，然后加待检样品10l，充分混匀；（2）再将1:100稀释后的样品进行1:10稀释：即将稀释后的样品稀释液900l加入一洁净小管内，然后加1:100稀释后的样品100ml，充分混匀，使样品的最终稀释倍数

6、为1:1000；3、将稀释后的待检样品、标准品2孔、质控品2孔，各100ml分别加入相应微孔中，充分混匀；另留一孔不加任何液体为空白对照。4、加封板膜置37温育30分钟。5、甩净孔中液体，洗板3次，每次停留60秒后甩净，在吸水纸或纸巾上拍干。6、除空白对照外每孔加酶标记物100ml，加封板膜置37温育30分钟。7、甩净孔中液体，洗板3次，每次停留60秒后甩净拍干。8、拍干后各孔滴加显色液A、B各1滴，置37避光10分钟，每孔立即加入终止液1滴，混匀后立即用酶标仪在450nm处读出光密度值。【参考范围】标准曲线性值范围：在0300 mIU/ml内、相关系数r应不低于0.96。参考范围：10220

7、 mIU/ml191265 mIU/ml。【结果判定】以各个标准品的平均OD值作为纵坐标，浓度（mIU/ml）作为横坐标绘制标准曲线。根据每个样品的OD值在标准曲线上找出相应的-HCG浓度值，将结果乘以稀释倍数1000，即为该样品实际-HCG含量。将样品的-HCG浓度值输入唐氏综合征和神经管缺陷产前筛查分析软件浓度栏中，点击确定键即可。【检验结果的解释】对于高出300 mIU/ml的标本用稀释液进行适当稀释后再次测定，计算的结果乘以稀释倍数。【检验方法的局限性】1 在对试剂盒内组分充分理解及严格遵循说明书进行操作的条件下，可以得到可信度及重复性高的结果。2 医生应将通过本试剂盒所得到的结果同其

8、它诊断方法得到的结果相结合，才可以作出最终的诊断。【产品性能指标】1.阴性参考品符合率：20份非孕参考品检测结果不得出现1份大于30mIU/ml。2.特异性试验：本试剂盒与hLH、hFSH、hTSH等激素不存在明显可测的交叉反应。3.最低检出量：应不高于5mIU/ml。4.剂量反应曲线的线性：线形值范围0300mIU/ml内，相关系数r应不低于0.96。5.精密性：本试剂盒批内精密性CV（%）15%（n=10），批间精密性25%（n=30）。6.稳定性：在（28）条件下保存，试剂盒有效期应为6个月。7.生物安全性：质控品及标准品要求HbsAg、HIV-Ab、HCV-Ab及梅毒抗体检测为阴性。【

9、注意事项】 本试剂盒应作为具有潜在的传染性试剂处理。本试剂盒在制备过程中用作原料（标准品）的血清或血浆已经HBsAg、HCV抗体和HIV抗体检测无反应，试剂盒内其它各种组分均无生物传染性。由于不能保证检测原料所有的传染性因素，因此所有接触试剂盒的人员应按良好的实验室规范要求进行操作。凡是染菌、溶血或高血脂的待检血清可能引起错误结果，应重新采样复试。任何临床样本都应作为具有传染实验中会诱发其它反应。显色液中含TMB，在实验室试验中会诱发其它反应。【生产企业】企业名称：珠海艾博罗生物技术有限公司注册地址：珠海市大学路99号广东珠海高科技成果产业化示范基地C区一期厂房二号楼五层 委托郑州博赛生物技术股份有限公司生产 委托生产地址： 郑州经济技术开发