有机化工-色谱柱的填充-最后一组

1、四川化院分析专业色谱柱的填充有机最后一组邓春容 黄晓钰 王田 李东旭 CONTENTS色谱柱性质1填充方法2注意事项3总结回顾4目录1PART色谱柱性质相色谱柱在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。“” 01 色谱柱性质气由载气带入，通过对欲检测混合物中组分有不同保留性能的色谱柱，使各组分分离，依次导入检测器，以得到各组分的检测信号。按照导入检测器的先后次序，经过对比，可以区别出是什么组分，根据峰高度或峰面积可以计算出各组分

2、含量。通常采用的检测器有：热导检测器，火焰离子化检测器，氦离子化检测器，超声波检测器，光离子化检测器，电子捕获检测器，火焰光度检测器，电化学检测器，质谱检测器等。简介 01 色谱柱性质 01 色谱柱性质特点（1）大屏幕液晶中文显示，同时显示各路控温参数及载气流量或检测器参数，各种数据一目了然。（2）数字流量显示，采用电子质量流量计，从屏幕精确显示载气流量。（3）TCD断气自动保护，仪器断气或漏气时，微机系统自动断开桥电流，保护钨丝不被损坏。（4）先进的气路流程，仪器采用一次进样，三检测器技术，分离效果更好，灵敏度更高。（5）自动功能：开机后，仪器自动检测运行状态，如有问题自动显示故障部位及故障

3、类型，并对仪器自我保护。（6）专用色谱工作站和色谱数据处理器2PART填充方法AB真空泵、分液漏斗、圆底烧瓶、量筒、烧杯、不真空泵、分液漏斗、圆底烧瓶、量筒、烧杯、不锈钢柱锈钢柱2mx3mm、玻璃棉、纱布、玻璃棉、纱布仪器聚乙二醇2000 无水乙醇 载体试剂 02 填充方法长2m，内径3mm的不锈钢管。柱管配比：固定液：载体=10:100填充物 02 填充方法称取0.5g聚乙二醇2000置于250ml烧杯中，加约15ml无水乙醇，溶解，然后加入5.25g载体，使载体全部沁润，稍加搅拌。于红外灯下烘干或自然烘干。涂渍固定液的方法A将色谱柱的出口端（接检测器端，塞上玻璃棉，接真空泵，另一端接漏斗，

4、开启真空泵，在轻轻振动下装入固定相。填充均匀紧密，填充量约3克，再用玻璃棉塞好。填充方法B微量玻璃注射器：容量10L，最小分刻度0.2L进样器将填充好的色谱柱安装在色谱仪柱箱中，出口端与连接器断开，于160度下老化8h以上，直至基线稳定。色谱柱的老化DC 02 填充方法操作步骤1、匀浆的配比、匀浆的配比3、泄压过程和、泄压过程和方法方法2、装柱压力、装柱压力4、色谱填料的色谱填料的性质性质 02 填充方法 注意事项3PART注意事项 03 注意事项避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内

5、的填充状况；柱压的突然升高或降低也会色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样阀进样时阀的转动不时阀的转动不能过缓能过缓使用注意事项使用注意事项应逐渐改变溶剂的组成，特别是应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱反相色谱中，不应直接从中，不应直接从有机溶剂有机溶剂改变改变为全部是水，反之亦然。为全部是水，反之亦然。 03 注意事项 一般说来一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲

6、会迅速降低柱效。以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。使用注意事项使用注意事项 选择选择使用适宜的使用适宜的流动相流动相（尤其是（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一进样器前面连接一预柱预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶入分析柱之前预先被硅胶“饱和饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。 03 注意事项使用注意事项使用注意事项避免将基质复杂的避免将基质复杂的样品样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进尤其

7、是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱保护柱。保护柱一般是填有相。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要倍左右，即常规分析需要5075ml。 03 注

8、意事项保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将燥。绝对禁止将缓冲溶液缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。留在柱内静置过夜或更长时间。使用注意事项使用注意事项色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。果柱效降低或色

9、谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。4PART总结回顾载体又称担体，是一种化学惰性的物质,大部分为多孔性的固体颗粒。它的作用是使固定液和流动相间有尽可能大的接触面积。一般对载体有以下要求:即有较大的表面积；孔径分布均匀；化学惰性好，即不与固定液或样品组分起化学反应；热稳定性好；有一定的机械强度；表面没有吸附性或吸附性能力很弱。在实际工作中要找出完全满足上述要求的载体比较困难，只能根据具体分析对象选出性能比较优良的载体。载体 04 总结回顾 载体固定液是气液色谱柱的关键组成部分。它的种类繁多,应用极其广泛。与气固色谱柱中的吸附剂相比，固定液的优点主要是在通常的操作条件下,组分在两相间的分配

10、等温线多是线性的，因此比较容易获得对称峰。固定液 04 总结回顾 固定液在操作温度下呈液态，粘度越低越好。组分在粘度高的固定液中传质速度慢，柱效下降。这决定了固定液的最低使用温度。蒸气压低，热稳定性好。这样可以减少固定液的流失，延长色谱柱的使用寿命。这两者决定了固定液的最高使用温度。化学惰性高，润湿性好。化学惰性高是指固定液不与组分、载体、载气发生不可逆化学反应。润湿性好则可以使固定液均匀涂布在载体表面或毛细管柱内壁，形成结构稳定的薄层。有良好的选择性。选择性好的固定液对沸点相同或相近而类型不同的物质具有分离能力，即保留一种类型化合物的能力大于另一种类型。 04 总结回顾 固定液作品展示更换图

11、片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题更换图片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题更换图片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题作品展示更换图片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体

12、、字号等进行修改。点击此处添加标题更换图片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题更换图片方法：点击图片后右键，选择“更改图片”即可。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题总结回顾AB标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。点击此处添加标题总结回顾标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和重新输入进行更改，顶部“开始”面板中可以对字体、字号等进行修改。标题数字等都可以通过点击和