钩吻药用价值的研究与利用

1、钩吻药用价值的研究与利用 链接-钩吻粉与钩吻育猪散来源：绿叶公司 作者：袁慧，等2009-03-04 编辑：Dongy 南宁兽药科技网专稿2010-5-18 拒绝转载摘 要选择马钱科植物钩吻进行了以下研究：提取活性成份生物碱；研究对动物的毒性和无毒性剂量；研究对动物的毒性机理和病理；对动物免疫功能和对血液学影响的研究；促生长作用及其机理；残留及临床增重试验研究。随着养殖业的发展，饲料生产量年年攀升，全国每年生产全价饲料达到6000万吨，饲料添加剂例如高砷、高铜、高硒等矿物质元素添加剂，“瘦肉精”等激素添加剂，喹乙醇、抗菌素等能造成环境污染。有可通过饲料肉食品等食物链引起人的过敏，应激，心脏病和

2、繁殖障碍，带来诸多危害。  我们从1999年开始寻找既具有促生长作用，又无残留毒性的绿色饲料添加剂。选择了钩吻这一在南方诸省生长量较多的植物为材料进行了研究。 1 钩吻及其生物碱的资料调查1.1 钩吻的生态分布：钩吻，别名：断肠草、毒根、胡蔓藤、野葛，属马钱科植物，缠绕常  绿藤本，主产于亚洲和北美。在中国主要分布在广西、云南、贵州、湖南、福建、  江西及浙江等地。在湖南，我们经民间调查和地考察，钩吻主要分布在郴州、永州、湘西等地。  1.2 钩吻的民间应用情况：本草纲目曾载，“断肠草”人误食其叶者致死，而羊食其则大肥。猪羊食其叶不但无毒，而且还令其毛泽

3、光润，增肥和防瘟之效。广西中药志记载： “当猪胃纳不良时，用钩吻饲喂，能增加食欲”。  广东中兽医常用草药记载，“钩吻可治牛羊肠炎”，该省养殖户定期给牛羊服用本植物，且有健胃、杀虫、快肥之效。据调查，民间有人采用60g钩吻/d给猪饲喂，仅喂3-5d后见猪食欲猛增，食饱即睡的效果。总之，江西、福建、广东、广西民间均有用钩吻喂猪的记载。 2 钩吻生物碱的提取、分离、鉴定及毒性剂量研究    2.1 钩吻生物碱的提取、分离和鉴定  采用95%乙醇提取（100水浴回流）和氯仿（65回流）提取方法对钩吻生物碱进行了提取。采用薄层层析、柱层折分离

4、，紫外扫描图谱比较的鉴定方法进行了鉴定。研究结果表明，醇提取方法较好，能实际应用。从广西玉林市郊采集的钩吻，经鉴定主要含有两种单体，一种为毒性最重的钩吻素子（koumine），另一种为植物中含量最多的钩吻素甲（Gelsemine）。2.2 钩吻碱对动物的毒性及毒性、与无毒性剂量研究将钩吻总碱提取物配成10 mg/ml的溶液后进行小白鼠的LD50测定和亚慢性毒性试验，并观察其毒性剂量反应。 结果表明，钩吻总碱的ip小白鼠，其LD50为7.38mg/kg体重，LD50的95%可信限范围为6.76mg/kg-7.94mg/kg。亚慢性毒性试验结果表明；1/50LD50，1/25LD50和1/15LD

5、50三个剂量组与空白组之间在30d试验期内，血液学组织病理学均无明显影响，且无统计学意义。进而说明，1/50LD50的剂量（0.492mg/kg）对小白鼠无明显毒性作用。   3 钩吻的毒性机理研究 3.1 钩吻碱对呼吸、心率、血压的影响 取钩吻碱，分别按0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、4.0mg/kg和8.0mg/kg体重，给家兔作静脉注射，采用MS302系统相连，记录其变化。结果表明，4.0mg/kg能抑制家兔的呼吸运动，后期呼吸不规则或间歇呼吸。4.0mg/kg的钩吻碱能使家兔心率减慢，心收缩力下降，导致心输出量减少，血压下降。这说明毒素直接作用于心脏和抑

6、制延脑呼吸中枢，引起心率变化和呼吸中枢麻痹。 3.2 钩吻碱对胃肠运动和子宫平滑肌的影响 采用静脉注射，按0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、4.0mg/kg、8.0mg/kg体重和直接滴加（按0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%浓度）钩吻碱的方法，观察了家兔在体肠运动和兔离体肠、子宫的收缩运动。观察结果表明，0.8%浓度的钩吻碱能轻微抑制家兔的肠蠕动和子宫的收缩，对平滑肌有直接抑制作用，但抑制效果比肾上腺素弱。   4 钩吻碱对动物的毒性病理学研究   4.1 钩吻碱对动物的毒性病理 按每公斤干钩吻粉提取的钩吻碱0.519mg的量计算，并按0

7、.8%能引起家兔毒性作用的剂量，折合成钩吻干粉，选择1%、2%、4%的钩吻干粉添加在肉仔鸡的日粮中，饲喂40d，当饲喂到20d后，2%添加量对肉鸡具有明显促生长作用；当添加量达到4%以上时，肉鸡出现体重减轻、流涎、垂头、嗜睡等毒性临床症状，并表现出全身毛血管扩张，所有内脏充血、间质性肺气肿、心力衰竭、肾出血的毒性病理变化。 4.2 钩吻碱对动物的毒性剂量与无毒性剂量的确定 综上实验结果表明，钩吻总碱按0.5mg/kg体重供给，对动物不产生任何毒副作用；1.0mg/kg体重供给，对动物仅产生呼吸频率与幅度稍微改变的毒性，且维持时间10min，并无明显的生理和病理学改变；4.0mg/kg以上钩吻碱

8、能引起动物中毒。按提取的钩吻碱量折算，钩吻干粉2%添加量在日粮中对肉鸡具有促进生长的作用。   5 钩吻的开发与利用研究   5.1 钩吻对动物的复壮增重试验研究 取一日龄健康仔鸡60只，按单因素3处理、2重复随机试验设计（第1组为对照组，第2、3组为试验组），各组基本日粮相同，试验组加1%和2%钩吻干粉，饲喂40d，每天8时，15时定时饲喂，统计每天饲料消耗量，分别在5日龄、18日龄、30日龄和40日龄各组逐渐称重，试验结束时，经数据处理和统计分析表明，第2、3组平均未重较第1组（对照组）分别提高5.46%、10.75%，料肉比为：对照组，1:2.79，第2组1:2.66

9、，第3组1:2.57 。从而证明2%添加量为优。 5.2 钩吻碱对动物的血液学及免疫功能的影响 钩吻碱对小鼠血液学的影响 取体重18-25g小鼠40只，随机分为4组，每组10只，雌雄各半，第1组为空白组，第2 ,3,4组为试验组，每天各灌喂钩吻碱药液（10mg/ml）一次，按0.15mg/kg体重，0.30mg/kg和1.5mg/kg分别在灌药的第5d，第10d，断尾取血进行RBC数和Hb量测定。  测定结果表明，0.15mg/kg组在第5d和10d和0.3mg/kg组均能提高RBC总数，Hb含量，与对照组比较差异极显著（P<0.01），而1.5mg/kg组能降低RB

10、C数和Hb量，与对照组比较，在第10d，降低极明显（P<0.01）。 6 钩吻碱促进动物生长机理研究 6.1 钩吻碱对动物的镇静作用 取健康小白鼠预饲一周后随机分为5组，进行阈下剂量水合氯醛催眠作用；大白鼠激怒反应和小白鼠能量代谢影响的研究。研究结果表明，按0.5mg/kg体重组，使小白鼠的入睡率比对照组提高了一倍，1.5mg/kg组提高了6倍，而2.5mg/kg组则提高了8倍；由此说明，钩吻总碱三个剂量组均能协同阈下剂量的水合氯醛对小白鼠的睡眠作用。钩吻碱对大白鼠激怒反应实验表明，钩吻碱对大白鼠由止血钳所引起的激怒反应有很好的抑制作用，表现出镇静的效果。 钩吻碱对小白鼠的能量代谢影响实

11、验表明，钩吻碱能减少机体的能量代谢损失，在非中毒剂量内且随剂量的增加，能量损失越少。 6.2 钩吻碱对动物胃肠道运动的影响 取健康小白鼠40只，体重20±2g，随机分为4组，每组10只，按生理盐水10ml/kg体重和0.5mg、1.5mg、2.5mg/kg体重钩吻碱组，连续灌胃给药3d，未次给药前禁食24h，自由饮水，未次给药后给药后30min，各鼠均以10%活性碳混悬液20ml/kg灌胃，30min后将小鼠脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上至幽门、下至回盲部的肠管，计算每只小鼠活性碳的移动距离与小肠全长的百分率。 实验研究表明，生理盐水组与钩吻碱3个不同剂量组对推进率呈现轻微抑

12、制作用（P>0.05），且剂量的增大，其推进率下降，钩吻碱0.5mg/kg体重组、1.5mg/kg组、2.5mg/kg组较生理盐水组推进率分别减少0.68%、1.03%、4.03%。 6.3 钩吻碱对消化道内菌群数量的影响，对回肠重量、消化酶活性、内容物的PH值的影响 取1d龄健康雏鸡60只，按单因素3处理2重复随机试验设计，第1组为对照组，第2、3组为试验组（分别添加1%,2%钩吻干粉），各组基础日粮相同，笼养，每天在8h与15h定时定量饲喂。试验的最后1d，喂饲2h后作颈静脉放血扑杀，打开腹腔，立即取出十二指肠、肌胃、肠道和胃内容物，分别测定其PH值，大肠杆菌数，乳酸杆菌数，消化酶的

13、活性。 测定结果表明，回肠中的大肠杆菌，第2组比对照组低6.81%，而第3组含量显著低于对照组（P<0.05），其值降低10.42%。 回肠中的乳酸杆菌数，第2、3组与第1组之间差异不明显（P>0.05），但第2组和第3组较第1组的菌落数略有增多，其值分别增多2%和3.8%。 回肠鲜重，各组之间差异不明显（P>0.05）。但肌胃胃蛋白酶活性、十二指肠淀粉酶活性较第1组（对照组）明显提高，其值分别提高11.6%和26.0%。肌胃内容物的PH值，第2组较第1组仅降 低0.18个单位，而第3组较第1组降低0.36个单位，差异明显（P<0.05），而十二指肠内容物的p

14、H值；第2和第3组较第1组差异不明显（P>0.05）。 实验结果表明，钩吻碱能降低回肠中的大肠杆菌数量，提高乳酸杆菌浓度，增强胃蛋白酶和肠淀粉酶的活性，有利于消化吸收。   7 钩吻在肌肉和肝脏中的残留研究   采用薄层层析法，气相色谱法对日粮中添加2%钩吻干粉，饲喂30d，60d的肉鸡进行肌肉与肝脏钩吻碱残留量的检测。 检测结果显示，在程序升温条件下，钩吻素子标准品的保留时间为4.0min，在肌肉和肝中的标准品能检出，但在日粮中添加了2%钩吻干粉饲喂30d和60d的肉鸡的肌肉与肝脏、检测结果为阴性。从而说明钩吻碱在体内几乎不残留。Research and Utili

15、zation of Gelsemium elegans benth Yuan hui    Wen lixing    Jiang zhenyun (Animal science and technology college of Hunau Agricultural University, changsha, 410128) Abstract：To develop an apinoid feed additive which is pollution free、avirulent、and side effect free, the

16、gelsemium elegans benth, a vegetation of loganiacease, is chosen to perform several studies thereinafter；extract active ingredientalkaloid；study its venenous and avirulent dosage；study its venenos mechanism and pathology；analyze its effect on immunologic function and haematology；investigate its grow

17、th-promotion and machanism；do research on residue and weight increment in clinic. Keys：Gelsemium elegans benth；ative ingredient；toxicity；growth-promotion    additives参考文献： 1陈竟峰, 袁慧等. 钩吻总碱的提取, 分离、鉴定及一般毒性研究. 湖南农业大学学报(自然科学版)J, 2003,29(5).2易金娥, 袁慧等. 钩吻碱毒理机理研究. 湖南农业大学学报 (自然科学版) J, 2003,29(

18、3). 3易金娥, 袁慧等. 钩吻毒素的研究进展, 湖南环境生物职业技术学院学报J, 2003,(1). 4袁慧, 文利新. 钩吻毒素及其对畜禽复壮作用的研究进展. 广东饲料J, 2002,(2). 5袁慧, 文利新. 钩吻干粉对肉鸡增重的试验研究. 湖南农业大学学报(自然科学版)J, 2003,29(专刊). 6袁慧, 文利新等. 钩吻对肉鸡血液学影响, 湖南农业大学学报(自然科学版) J, 2003,29(专刊). 7张冬英, 袁慧. 钩吻碱对动物血液学及免疫功能影响.硕士研究生论文，2003. 8刘晓燕, 袁慧. 钩吻碱促生长作用机理及残留研究. 硕士研究生论文，2003. 9陈竟峰，袁

19、慧. 钩吻总碱的提取、分离、鉴定及其一般毒性的研究，硕士研究生论文，2002. 10易金娥, 袁慧. 钩吻的毒性机理与毒性病理学研究. 硕士研究生论文，2002.链接1-钩吻的研究进展来源：新浪博客2009-11-5 钩吻是马钱科植物葫蔓藤（Gelsemium elegans Benth.）的全草。药用钩吻分为两种,一种是北美钩吻（G. sempervirens Ait）,产于美洲；另一种是中国钩吻（Gelsemium elegans Benth.）,产于亚洲,主要分布在我国浙江、福建、广东、广西、湖南、贵州、云南等地1。    中国钩吻又名断肠草、野葛、毒根、大

20、茶药等,味苦、微辛,性热,有大毒。由于钩吻有剧毒,民间一直以外用为主,忌内服,多为捣碎或研磨后调敷患处,也可以煎水洗或烟熏,具有祛风散寮、消肿止痛、攻毒杀虫的功能。近年来,我国对钩吻的应用有了进一步发展,已从过去的仅供外用发展为酊剂、浸膏、合剂、注射剂等多种剂型,临床上用于恶性肿瘤、神经痛等治疗；局部滴眼给药用于扩瞳；此外,还用于促进畜禽生长。    中国钩吻的主要有效化学成分为吲哚类生物碱,包括钩吻素子、甲、寅、卯、辰、丙、丁、戊、己、庚以及胡蔓藤碱甲、乙、丙、丁等40多种单体,其毒性大小不同,钩吻总生物碱或粗提物具有抗肿瘤、镇痛、抗银屑病等作用。近年对其研发日

21、趋活跃,开始瞄准生物碱单体,如钩吻素子抗肿瘤、抗银屑病的研发。现对其化学成分以及药理毒理作用研究进展综述如下。1  钩吻的化学成分   赵承嘏等曾从国产钩吻中分离得到钩吻素子、钩吻素甲、钩吻素寅、钩吻素卯、钩吻素辰、钩吻素丙、钩吻素丁和钩吻素戊等八个生物碱24,其中钩吻素子含量最高,钩吻素寅具剧毒。杨峻山等从广西钩吻中分离得到7个生物碱,其中有4个新的氧化吲哚生物碱,分别是胡蔓藤甲、胡蔓藤乙、胡蔓藤丙、胡蔓藤丁5。不同产地的钩吻中生物碱含量略有差异,如福建产钩吻根中含钩吻素甲、子、卯、丁、戊,广东产钩吻根中含钩吻素子、卯、丁、戊,各生物碱的含量还随着采集

22、时间、采集地点的不同而有很大差异。国外钩吻与国产钩吻所含成分存在差异,如北美钩吻以钩吻素甲为主要成分,含量最高,北美钩吻分离到的成分还有14羟基钩吻素乙、21羟基钩吻素绿碱、NMethoxyanhydrovobasinediol、Gelsegine、11Methoxy19Rhydroxygelselegine、19R羟基二氢钩吻绿碱、19R乙酰二氢钩吻绿碱、19R羟基二氢钩吻素甲、20Hydroxydihydrorankinidine、N脱甲氢基胡蔓藤碱乙、15羟基胡蔓藤碱乙等6。   几种主要钩吻毒素的化学结构研究进展：（1）钩吻素甲（Gelsemine）：Wormley

23、在1870年全面研究了美洲钩吻的活性成分,得到了无定形的钩吻素甲。1883年Gerrad得到了钩吻素甲的结晶。1959年Lovell等人通过X衍射、Conroy等人利用核磁共振谱才最后确定了它的复杂结构为氧化吲哚型生物碱1,分子式为C20H22O2N2。陈忠良等用丙酮重结晶得到钩吻素甲白色针状结晶,测得熔点为1787。（2）钩吻素子（Koumine）：钩吻素子是中国钩吻中含量最高的成分,其分子式确定为C20H22ON2,为一种假吲哚型生物碱,用丙酮重结晶得到白色柱状结晶,测得熔点为168170 79。（3）钩吻素丙（Sempervirine）：钩吻素丙是在1915年由Stevenson和Say

24、re首次从美洲钩吻中分离得到,我国由赵承嘏亦从植物中分离得到,1959年Janot等人又从中国钩吻中得到,统称为Sempervirine,有两种互变异构体1。分子式为C19H16N2,熔点为258260 1011。（4）钩吻素丁（Koumicine）：刘铸晋等从广东钩吻的根和福建钩吻的叶中提取获得钩吻素丁4；金浩仑等确定其结构,其晶体为无色片晶,分子式为C21H24O3N2,熔点为248249 12, 后杜秀宝等修正为252254 （分解）13。（5）钩吻素戊（Koumidine）：晶体为无色片状结晶,分子式为C19H22ON2,熔点为202204 12。（6）钩吻素己（Gelsenicine

25、）：丙酮重结晶得白色块状结晶,熔点171173 9,分子式为C19H22ON13,毒性为已知国产钩吻生物碱中最强。（7）钩吻素乙（Golsemicine）：由Thompson最早提取出来14,最后确定其分子式为C20H26O4N,熔点为171 ,毒性在已知北美钩吻生物碱中最强1。（8）钩吻素寅（Kouminicine）：为一种不纯的无定形产物,是钩吻中活性较强的有毒成分,毒性仅次于钩吻素乙1。（9）钩吻素庚（Gelsenidine）：由杜秀宝等从广西钩吻中提取获得,分子式为C21H26O3N,熔点为143145 13。(10)钩吻素丑（Kouminine）：钩吻素丑为不纯的钩吻素甲4。(11)

26、钩吻素卯（Kouminidine）：纪育澧等将钩吻素卯的分子式定为C19H25O4N,刘铸晋等改为C20H26O4N,熔点为299 （分解）,可溶于水4。（12）钩吻定（Gelsedine）：最初由Schwarz等从美洲钩吻中提取获得,后金浩仑等从广西钩吻中分离得到,熔点172174 ,分子式为C19H24O3N12。（13）葫蔓藤碱甲（Humantenmine）：杨峻山等从广西葫蔓藤根中分离得到葫蔓藤碱甲,丙酮重结晶得到的是无色块状结晶体,分子式为C19H22O3N,熔点166168 ；其盐酸盐丙酮结晶为无色粗针晶,熔点182184 ；其氢溴酸盐在丙酮中结晶为无色粗针晶,熔点208210 5

27、。（14）葫蔓藤碱乙（Humantenine）：丙酮中重结晶为无色透明树胶状物,性质不稳定,分子式为C21H20O3N15。（15）葫蔓藤碱丙（Humantenidine）：为无色透明的树胶状物,分子式为C19H22O4N。催化加氢后丙酮结晶得到块状结晶,熔点216219 16。（16）葫蔓藤碱丁（Humantenirine）：为无色块状结晶体,分子式为C21H26O4N,熔点为168169 17。    人们仍试图从钩吻中发现新的生物碱单体,2006年岳建民课题组从云南产的钩吻中分离出3种新生物碱：Gelsebanine,14hydroxyelegansamin

28、e,14hydroxygelsemydine。Gelsebanine是一种白色无定形粉末,分子式为C30H36O5N2；14hydroxyelegansamine分子式为C29H36O7N2；14hydroxygelsemydine为无色针状结晶,分子式为C29H36N2O7,与14hydroxyelegansamine是同分异构体18。2  钩吻的药理作用2.1  抗肿瘤作用  有关钩吻抗肿瘤作用及其临床应用已有大量报道。早在上世纪70年代,广西肿瘤研究所采用了钩吻治疗原发性肝癌,总有效率达到60,平均生存期延长4月,肿块缩小1/2,腹水明显减轻；其毒副反应远较

29、临床常用的化疗药物低,对造血系统不仅没有损害,反而促进红细胞、血红蛋白升高19。福建省同安县人民医院、海军416医院曾先后用钩吻总碱注射液治疗肝、肺、食管癌等，取得一定疗效,不仅缓解癌症症状,还有很好的镇痛效果2021。90年代陆建敏等报道,钩吻总碱注射液对肿瘤细胞具有一定的抑制作用,并能提高肿瘤细胞对60Co 射线的敏感性,提示钩吻可作为放射增敏剂与放疗合用于肿瘤的治疗22。近来王寅等报道,钩吻总碱对HepG2细胞生长具有明显的抑制作用,可能与其诱发细胞凋亡有关23。丁建农等研究了钩吻总碱对Hela细胞生长增殖和细胞周期的影响,发现钩吻能明显抑制Hela细胞增殖并可诱导其凋亡,存在着明显的剂

30、量和时间-效应关系24；细胞周期发生明显变化,钩吻主要阻止细胞由G1期向S期转化,并在此阶段诱发调亡。因此,诱导肿瘤细胞凋亡可能是钩吻抗肿瘤作用机制之一。近年来人们开始关注钩吻生物碱单体的抗肿瘤作用及其机制,如迟德彪等发现钩吻素子对人大肠癌细胞具有明显的杀伤作用,并可以阻止细胞由G1期向S期转化,诱导其凋亡25；2007年又报道了钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学机制可能与钩吻素子可降低LoVo细胞跨膜电位、线粒体跨膜电位, 能降低细胞内游离钙浓度、加入EDTA可使游离钙升高, 能增高LoVo细胞的活性氧及细胞间通讯有关26。吴达荣等则证实钩吻素子在体内外均对肿瘤有明显的抑

31、制作用27。2.2  镇痛镇静作用  我国民间一直用钩吻原植物治疗各类疼痛,尤其慢性神经性疼痛与癌性疼痛。20世纪60年代,海军422医院和416医院用钩吻总碱配制成“止痛灵”注射液院内用药,发现其对多种疼痛均有良好疗效。1970年代有学者报道了吗啡、汉防己、延胡索等6种生物碱镇痛作用强度的对比研究,发现钩吻总碱提高痛阈的作用强度仅弱于吗啡,而强于其他生物碱。谭建权等的研究发现,钩吻总碱不仅可提高动物痛阈,而且能增强戊巴比妥钠与水合氯醛的催眠作用,其镇痛作用不产生耐受性,也无明显解热作用,提示钩吻的镇痛作用机制可能既不同于阿片类镇痛药物,也不同于阿司匹林类解热镇痛抗炎药28

32、。钩吻总碱除有肯定的镇痛作用外,较之常用药物吗啡、度冷丁有更多的优势,具体表现在：（1）无成瘾性及耐药性（2）镇痛有效剂量小；（3）钩吻总碱口服或注射均无抑制消化功能的副作用,而且可增进食欲21；（4）钩吻无吗啡及度冷丁的便秘、尿潴留等副作用；（5）钩吻碱在治疗剂量时,对瞳孔无影响29。因此,钩吻可能作为镇痛药具有广阔的开发应用前景。 2.3  对免疫功能的影响  在整体动物实验中,周利元等研究显示,钩吻乙醇粗提物可显著提高环磷酰胺免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能,对环磷酰胺免疫抑制小鼠产生抗山羊红细胞抗体的功能具有显著促进作用,对环磷酰胺免疫抑制小鼠体内淋巴细胞转化率也

33、可显著提高,提示钩吻乙醇粗提物可能具有对抗环磷酰胺对小鼠免疫抑制作用30；但钩吻总碱除可显著促进正常小鼠巨噬细胞吞噬功能外,对正常小鼠其他免疫功能无明显影响。在体外实验中,雷林生等观察到钩吻粗提物对小鼠脾细胞增殖反应有着不同程度的抑制作用31。孙莉莎等研究则提示钩吻总碱中的主要免疫抑制成分可能是钩吻素子32。王志睿等研究表明,钩吻素子能显著抑制小鼠CD4T淋巴细胞增殖反应,此抑制作用可能与钩吻素子抑制小鼠CD4T细胞IL2的分泌相关33。这种整体实验和体外实验结果不一致的现象可能提示,钩吻对免疫功能可能具有双向调节作用,或者钩吻整体给药情况下对免疫功能的影响可能是间接作用,如可能是通过保护骨髓

34、造血功能而发挥作用。 2.4  促进造血功能作用  王友顺等研究表明,钩吻总碱对受到放射性损伤的大鼠具有造血保护作用34。黄兰青等发现钩吻提取物对环磷酰胺化疗小鼠的造血功能有显著的保护作用35。王坤等的实验中,钩吻提取物对受到射线照射的小鼠30天存活率和死亡动物平均存活天数、内源性脾结节的形成和骨髓有核细胞含量的影响均显著高于对照组,说明钩吻对急性辐射损伤有保护作用,对机体造血干祖细胞有刺激增殖作用36。 2.5  心血管作用  罗开国等研究发现,钩吻总碱能对抗氯仿诱发的小鼠室颤和氯化钡引起的家兔室性心律失常,其抗心律失常作用可能与降低蒲氏纤维四期除极速

35、度有关37。黄仲林等报道,钩吻总碱对狗血压具有显着降压效应,其特点是降压效应快,维持时间长,其降压机理可能与兴奋心血管中枢的胆碱能神经以及兴奋外周M受体有关38。 2.6  扩瞳作用  钩吻在大剂量时可引起散瞳这一特性早在50年代黄幕哲等在用钩吻浸出液进行家兔扩瞳试验时就观察到。王友顺等用1盐酸钩吻总碱眼药水对69例志愿者126只眼进行了散瞳和调节麻痹作用的临床观察,结果表明盐酸钩吻眼药水对人眼具有显著的散瞳作用,其特点是散瞳起效快、作用强,而且恢复快,在给药后6 h内瞳孔直径、远视力、近视力等几乎全部恢复到给药前水平29。就其散瞳后瞳孔调节的恢复时间而论,明显优于现行使用

36、的后马托品,甚至优于托品酰胺,提示钩吻制成眼药水可为临床提供一种新的扩瞳剂。2.7  对皮肤病的作用  Calarasu等用北美钩吻的水提取物制成口服液及注射剂治疗神经性皮炎和银屑病,尤其是注射剂对神经性皮炎疗效显著39。钩吻的传统功用是“ 攻毒拔毒,杀虫止痒；用治湿疹、体癣、麻风,并可杀蛆虫,灭孑孓”。我国民间一直应用钩吻生物碱治疗皮肤病。近期的基础研究和临床观察提示,钩吻生物碱治疗银屑病作用显著,可能具有重要的开发应用价值40。 2.8  畜禽复壮作用  钩吻作为一种兽药在我国民间应用已久。唐本草云“人或畜食其叶皆死,羊食则大肥,猪食之能治热性病”。

37、广西中药志记载“当猪胃纳不良时,用以饲喂,能增进食欲”。广东中兽医常用草药中有“钩吻,常定期对猪羊服本药,有杀虫、健胃、肥之效”。香港植物园前园长格林氏(H.Green)曾将钩吻叶少许,加于猪的饲料中,非独食之不曾中毒,且猪的皮毛反增加光泽而呈现一种滋补作用。3  钩吻的毒性作用    钩吻总碱小鼠急性毒性试验表明,小鼠的中毒症状多在几分钟内出现,主要是兴奋,阵发性惊厥、呼吸困难,最后呼吸衰竭而死亡。半数致死量(LD50)雄大鼠(265±44 g)腹腔给药为1.2（0.81.7） mg/kg；雌小鼠(22±2 g)肌肉注射为1.5(1

38、.41.6) mg/kg；小鼠雌雄各半(20±3 g)静脉注射为1.56(1.41.69) mg/kg28；小鼠尾静脉注射为3.07 mg/kg,肌肉注射LD50为360 mg/kg41。有文献报道钩吻总碱大鼠长期毒性研究,每天静脉给药1次,连续给药90 d后处死,取心、肝、肺、肾、脾及胃肠组织观察,发现钩吻总碱高剂量组(0.8 mg/kg·d)大鼠均不同程度出现步态不稳、身体拉长、眼球突出、阵发性痉挛等症状,肝、肾有颗粒变性以及脂肪变性等形态学改变,而中剂量组(0.4 mg/kg·d)、低剂量组(0.2 mg/kg·d)大鼠在给药期间均未见异常反应,肝

39、肾等脏器也无明显病理变化42。   钩吻的毒性主要来源于吲哚类生物碱,已知的国产钩吻有毒成分有17种,其中以钩吻素己毒性最强43,小鼠腹腔注射LD50为0.185 mg/kg13,北美钩吻则以钩吻素乙毒性最强,皮下或腹腔注射LD50为0.10.3 mg/kg43。    钩吻全株有剧毒,根、嫩叶尤毒,根部生物碱含量最高,其中又以根皮为最高。钩吻对神经系统的作用很强,钩吻中毒时神经系统主要症状有眩晕、言语含糊、肌肉松弛无力、吞咽困难、呼吸肌麻痹、共济失调、昏迷,还可见复视、散瞳、眼睑下垂等,甚至出现沉睡；消化系统症状有口腔、咽喉灼痛,恶

40、心、呕吐、腹痛、腹泻或便秘、腹胀等；循环和呼吸系统症状为中毒早期心跳缓慢、呼吸快而深,继之心搏加快、呼吸慢而浅、不规则,渐至呼吸困难和麻痹,体温及血压下降、四肢冰冷、面色苍白、虚脱,最终呼吸麻痹而死亡1。钩吻碱对迷走神经中枢的抑制作用可适量应用阿托品对抗；对抑制运动神经元而引起的肌麻痹,可用新斯的明予解除；血液灌流及血液透析可清除水溶性药物,特别是游离或解离的小分子毒物。我国民间采用新鲜羊血趁热灌服解毒疗法,疗效甚佳,但羊血中是否含对抗或中和钩吻毒的化学物质尚需进一步研究。    总之,钩吻是剧毒植物,钩吻生物碱毒性强,总碱的中毒剂量与有效治疗剂量相接近,被认为是

41、已发现的生物碱中毒性最大的,导致其应用受到限制。但由于其临床疗效显著,希望在此基础上避害就利,发挥资源优势,开发出疗效好、毒副作用小的钩吻生物碱新药。参考文献1 陈翼胜. 中国有毒植物M. 北京：科学出版社,1990, 371376.2 Chou T Q. The alkaloids of Chinese Gelsemium KouWen Gelsemium elegans Bth. J. Chinese J Physical, 1931, 5:345352.3 Chou T Q. The alkaloids of Chinese Gelsemium TaChaYen J. Chinese J

42、 Physical, 1936, 10:7984.4 刘铸晋, 陆仁荣, 朱子清, 等. 钩吻生物碱.国产钩吻生物碱再研究和钩吻素子的构造J. 化学学报, 1961, 27(1):4758.5 杨峻山,陈玉武. 葫蔓藤生物碱的化学研究.生物碱的分离与葫蔓藤碱甲的结构J. 药学学报,1983, 18(2):104112.6 Schun Yeh,Cordell Geoyrey，Mark Garland. 21Oxogelsevirine, a New Alkaloid from Gelsemium rankiniiJ.J Not Prod, 1986, 49(3):483487.7 陈忠良. 钩吻

43、生物碱的提取与分离J. 中药通报,1987, 12(5):41.8 张兰兰,王志睿,黄昌全,等. 钩吻总生物碱中钩吻素子的提取与分离J. 第一军医大学学报,2004, 24(9):10061008.9 王志睿,张兰兰,黄昌全,等. 粤东产钩吻生物碱提取物的红外光谱与核磁共振谱分析J. 第一军医大学学报,2005, 25(1):5456.10 Saxton J E. The AlkaloidsM. New York:Academic press,1973(8):83119.11 Manon L. The AlkaloidsM. New York:Academic press,1952(2):43

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