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文档简介

1、 HPLC基本组成 色谱柱：是HPLC的核心部分，固定相有不同种类，常见的有正相（硅 胶），反相，离子交换，分子排阻等。 检测器：目前常用的有3种， 1.紫外检测器（UV）：大多数药物在200700nm范围内有吸收，因 此可以选择药物的最大吸收波长进行测定。 二极管阵列检测器（DAD），可对从190-600nm之间的全波段的吸 收度进行快速扫描，得到了一个全波段的紫外吸收光谱，使专一性 大大提高 。 2.荧光检测器：比UV灵敏，专一性也高。但被测物要有荧光，导致其 应用范围较小。 3.电化学检测器（ECD）：其灵敏度比UV和荧光高36个数量级，一 般可达ngpg水平，凡含有硝基、羰基、胺基酚等

2、电化学活性基团 的药物都可测定。但要求流动相含有电解质。 液质联用（HPLC-MS及HPLCMS/MS） HPLC与MS的接口一直是联机技术发展的瓶颈。目前， 比较常用的接口有热喷（Thermospray,TSP） 和电喷雾接 口（Electrospray, ESP）。 HPLC与一级MS联机时，由于MS采用软电离技术，往 往只能提供被测物的分子量信息，而没有裂解碎片离子，而 它对于结构解析更为重要的。因此，目前实际应用中多采用 的是连接两级MS，即HPLCMS/MS，可对前一级MS产生 的分子离子进行二次电离，使其裂解而产生碎片离子。这 样，在对样品进行分离的同时，又得到了每一组分的分子量

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