参鳖养心口服液的薄层色谱鉴别和人参总皂苷的测定

1、    参鳖养心口服液的薄层色谱鉴别和人参总皂苷的测定        提要用薄层色谱鉴别了参鳖养心口服液中人参、丹参；同时用氧化铝-大孔树脂-比色法对其主要成分人参总皂苷进行了含量测定，加样回收率为98.8%，RSD为1.03%。 关键词参鳖养心口服液薄层色谱人参总皂苷参鳖养心口服液是由人参、丹参、麦冬等药材与中华鳖提取物配伍加工精制而成。具有补气、滋阴、养血、安神等功能，对于气阴两虚、心血亏耗、心气不足、心神失养而引起的头痛、头晕、失眠、心悸、气短、乏力等症有很好的疗效。用

2、TLC对人参和丹参进行了鉴别，并对人参总皂苷进行了含量测定。1实验部分1.1仪器、试剂与药品UV2100分光光度计(日本岛津)。D101大孔吸附树脂(天津骨胶厂)；硅胶G(青岛海洋化工厂)，其它试剂均为分析纯。人参皂苷Re、人参二醇、人参三醇、丹参酮A对照品(中国药品生物制品检定所)；参鳖养心口服液(自制)，人参、丹参对照药材(本所鉴定)。1.2鉴别试验人参的薄层色谱鉴别取10ml置分液漏斗中，加乙醚10ml，充分振摇，离心分层，弃去乙醚液，同法处理三次，加正丁醇20ml萃取，回收正丁醇。残渣加7%硫酸与乙醇(45%)溶液15ml。回流1h，挥去乙醇，加氯仿10ml提取，取氯仿液加无水硫酸钠脱

3、水滤过，回收氯仿至1ml，做为供试品溶液，取人参二醇和人参三醇对照品，用无水乙醇制成每ml各含1mg的混合液，作为对照品溶液，另取人参药材提取液，不含人参的空白样品，同供试品同法处理，制成对照溶液。照薄层色谱法1，吸取上述溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮(21)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110加热10min，供试品溶液在与人参药材提取液和对照品溶液相应位置上，显相同颜色的斑点(1)。1人参TLC谱1 人参二醇和人参三醇对照液 2 人参对照药材溶液 3，4 参鳖养心口服液 5 空白对照液1.2.2丹参的薄层色谱鉴别取20ml，水浴上浓缩至5ml，

4、用乙醚提取(3×5ml)。合并提取液，将乙醚挥干，残渣加乙醇溶解至5ml量瓶中，加乙醇至刻度，作为供试品溶液。另取丹参对照药材提取液、不含丹参的空白样品同法制成对照溶液。丹参酮A用乙醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(955)为展开剂，展开，取出晾干，日光下检视，供试品色谱中在与对照品溶液及对照药材溶液相应位置上，显相同颜色的斑点(2)。2丹参TLC1 丹参酮A对照液 2 丹参对照药材溶液 3，4 参鳖养心口服液样品 5 空白对照液1.3含量测定1.3.1对照溶液和供试液的制备精密称取人参皂苷Re对照

5、品25mg，置5ml容量瓶中，用甲醇溶解，并稀释至刻度为对照溶液。精密吸取供试品5ml，置10ml具塞离心管中，加乙醚5ml，充分振摇，离心分层，弃去乙醚液，同法处理三次，水层置水浴中挥至无醚味，冷至室温。加以水饱和的正丁醇萃取(5ml×5)。合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣用5ml乙醇溶液，加入胆甾醇饱和乙醇溶液2ml，充分振摇，滤出沉淀，并用乙醇洗涤沉淀三次，每次2ml，合并滤液与洗液，在水浴上蒸干，用2ml水溶解，加到已处理好的氧化铝-大孔吸附树脂(内径1cm的层析柱，将D101大孔树指至5cm高，上端加0.5g的氯化铝)上，依次用水，10%乙醇液各15ml，70%乙醇溶液20ml

6、洗脱。收集70%乙醇洗脱液，置水溶上蒸干，残留物加甲醇适量溶解，转入5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，为供试品溶液。1.3.2标准曲线精密量取对照溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，于10ml刻度试管中，挥散溶剂，各加入8%香草醛乙醇溶液0.5ml，77%硫酸溶液(W/W)0.5ml，置60恒温水浴中加热显色10min，取出置冰水浴中冷却15min。同时取甲醇2.5ml，平行作空白溶液，照分光光度法试验，在560nm下测定吸光度。得回归方程为：A=0.07936+2.987×10-3cr=0.9998。1.3.3加样回收率取参鳖养心口服液，按“1.3.1”项下制备供试液，

7、再加入一定量人参总皂甙对照液，分别精量50l，按“1.3.2”项下测定吸光度，结果见表1。表1加样回收率结果No.样品中含总皂甙量(mg/10ml)对照品加入量(mg)测得总量(mg/10ml)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)110.502.512.9698.5210.502.512.9699.0310.502.512.9698.7410.502.513.01100.498.841.03510.502.512.9497.61.3.4供试品的含量测定取不同批号的参鳖养心口服液供试品，按“1.3.1”项下制备供试液。分别精密量取50l，按“1.3.2”项下，测定吸光度，结果见表2。 表2样

8、品测定结果批号含量测得值(mg/10ml)RSD(%)94020110.50±0.221.759402029.70±0.212.0394020310.40±0.111.0594030110.50±0.151.4294030210.20±0.171.662讨论 2.1人参皂苷可溶于热水、甲醇或乙醇中，难溶于乙醚，而丹参所含丹参酮醌类化合物，亲脂性较强，可溶于乙醚中。故用乙醚分离后二者可分别进行薄层色谱鉴别，可以消除干扰。2.2因麦冬药材含有甾体皂苷，对人参总皂苷的含量测定有影响，为了消除其干扰，根据甾体皂苷可与胆甾醇生成难溶于水与乙醇的分子复合物的性质，在供试品正丁醇提取液蒸干后，加乙醇溶解提取物，再加入胆甾醇饱和乙醇溶液，使其产生沉淀，滤出后，再