胆碱能传出性前庭神经元的分布

1、    胆碱能传出性前庭神经元的分布        摘要目的：观察胆碱能传出性前庭神经元的分布。方法：采用辣根过氧化酶逆行追踪和免疫组化技术观察大鼠碱乙酰转移酶的表达，了解传出性前庭神经元的分布。结果：大鼠胆碱乙酰转移酶阳性传出性前庭神经元分布在面神经膝内侧E群、背外侧E群及脑桥尾侧网状核，以内侧E群为主。结论：乙酰胆碱分布于各群传出性前庭神经元，并作为神经递质而具有重要的功能。关键词前庭神经传出神经元胆碱乙酰转移酶免疫组织化学 Distribution of choline

2、rgic efferent vestibular neuronsCHI Fang-luWANG Zheng-minWU Li-wen（Hearing Laboratory of Ministry of Public Health,Eye Ear Nose & ThroatHospital of Shanghai Medical University,Shanghai 200031）LI Kuan-yan（State Key Laboratory of Neurobiology,Shanghai Medical University）AbstractObjective:To invest

3、igate the effect and distribution of cohlinergic efferent vestibular neurons in normal wistar rat.Method:HPR retrograde tracer and Immunocytochemical techniques were used.Result:Results show that AchT immunoreactive neurons locate in dorsolateral and dorsomedial to genu of the facial.Few neurons sca

4、tter in the parvocellular nucleus.Conclusion:As a neural transmitter,acetylcholine distribute in efferent vestibular neurons and play an important role.Key wordsVestibular nerveEfferent neuronsCholine acetyltransferaseImmunohistochemistry目前对传出性前庭神经系统的研究较少，一个主要原因是传出性前庭神经元由几组不多的神经细胞组成，不是固定的神经核团，其发出的神经

5、纤维在前庭神经中只占很小比例，定位比较困难。本研究通过观察传出性前庭神经系统主要抑制性神经递质乙酰胆碱(Ach)的合成酶胆碱乙酰转移酶(AchT)的表达，了解传出性前庭神经元的分布。1材料与方法1.1辣根过氧化酶(HRP)逆行追踪DAB法显色体重120 g的雄性大鼠3只，用微量注射器经耳蜗底回钻孔，取向前庭方向注射25% HRP 5 l，24 h后心内灌注固定，作经耳蜗核横断面连续35 m厚的冰冻切片，用DAB法显色，阳性细胞呈棕黄色，胞浆内有同色深颗粒，胞核明亮无颗粒。1.22结果2.1HRP阳性传出性前庭神经元的定位如1所示，HRP阳性反应细胞位于第四脑室的面神经膝内侧及背外侧，称内侧E群

6、及背外侧E群神经元，面神经升支两侧的脑桥尾侧网状核(CPR)。内E群神经元为小梭形神经元沿面神经膝内侧呈弧形分布，背外侧E群为类圆形细胞，呈簇状分布于面神经膝外上方，另有部分在第四脑室外侧缘处。1传出性前庭神经元分布示意Group E：E组神经元(内侧及背外侧群)，CPR：桥脑网状核，g7：面神经膝，MVe：前庭内侧核，4V：第四脑室，LVe：前庭外侧核，7：面神经核，Sp5、sp5：三叉神经核，VCo：耳蜗核，EVN：传出性前庭神经，ECN：传出性耳蜗神经，SCA：上半规管，HCA：水平半规管2.2AchT阳性传出性前庭神经元的分布正常AchT阳性细胞主要出现在桥脑面神经膝内E群神经元，为小

7、梭形神经元沿面神经膝内侧呈弧形分布，面神经膝内侧E群AchT阳性细胞的出现率为75%(12/16)，左侧(8.33±4.23)只，右侧(8.33±4.89)只(P0.05)，见2。面神经膝背外侧E群神经元的AchT阳性神经元出现率为43.75%(7/16)，有两种类型：一种位于第四脑室底外侧部，为类圆形细胞簇状分布紧贴于面神经膝外侧缘；另一种为多角形细胞散在于前庭外侧核及其外上方(3)。CPR阳性神经元较少，位于面神经根两侧为梭形细胞，在三叉神经运动核平面为多角形阳性大细胞(4)，两侧阳性神经元数基本相等。3讨论传出性前庭神经系统由几组神经元组成，发出的神经纤维经前庭神经达

8、外周前庭器官的前庭感受器上皮，其主要神经递质是Ach前庭神经系统的一种抑制性递质1。传出性前庭神经系统与传入性前庭神经形成了一个反馈通路，其功能是调节前庭传入信息。AchT是Ach的合成酶，其活性反映了Ach的活性。由于传出性前庭神经元的AchT表达量少，用秋水仙素侧脑室注射可阻断其经轴突向外周末梢传递，以便在神经元聚集相对浓度。2AchT阳性内侧E群神经元4V：第四脑室，g7：面神经膝，箭头指处为AchT阳性内侧E群神经元3AchT阳性背外侧E群神经元g7：面神经膝，箭头指处为AchT阳性背外侧E群神经元4脑桥尾侧网状核区AchT阳性细胞箭头指处为CPR区多角形AchT阳性神经元传出性前庭神

9、经元位于脑桥，其末梢分布于前庭终器，故经外周前庭吸收的HPR可逆行传送至传出性前庭神经元；而传入性前庭神经元位于内听道的Scarpa神经节，故前庭核的第二级传入神经元无HPR阳性反应。因此HPR逆行追踪可用于传出性前庭神经元的定位。本研究采用Wistar大鼠的脑干标本，观察到AchT阳性细胞多数位于面神经膝内外侧E群神经元，以内侧E群为主。外侧E群神经元有两种类型，一种位于第四脑室底外侧部，另一类紧贴于面神经膝外上方。各组AchT阳性神经元的分布两侧相等。胆碱能免疫活性神经末梢广泛分布于5个前庭终器(球囊、椭圆囊、3个半规管)。有两种胆碱能的前庭末梢，一种较大，另一种为中小型。半规管和椭圆囊传

10、出性前庭神经末梢的胆碱能活性较强，球囊则较弱。即使在半规管壶腹嵴，传出性前庭神经末梢胆碱能活性分布也不一致，在壶腹嵴的周边部活性较强，在中心区较弱2。用逆行追踪和AchT mRNA原位杂交的方法，观察到90%的外侧E群神经元AchT有阳性表达，100%内侧E群神经元有AchT mRNA的阳性表达，60%的CPR区神经元AchT mRNA阳性表达3。Ach可以迅速增加前庭毛细胞内Ca2+浓度，通过对前庭毛细胞内Ca2+的调节，起到抑制性作用，这些作用受传出性前庭神经系统的控制4。(编辑 陈蓓)迟放鲁（上海医科大学眼耳鼻喉科医院卫生部听觉医学重点实验室上海，200031）王正敏（上海医科大学眼耳鼻

11、喉科医院卫生部听觉医学重点实验室上海，200031）李宽（上海医科大学神经生物国家重点实验室）吴?雯（上海医科大学眼耳鼻喉科医院卫生部听觉医学重点实验室上海，200031）参考文献1，Schwarz D W F,Satoh K,Schwarz I E,et al.Cholinergic innervation of the rats labyrinth.Exp Brain,1986,64:19262，Wackym P A,Popper P,Ward P H,et al.Cell and molecular anatomy of nicotinic acetylcholine receptor subunits and calcitonin gene-related peptide in the rat vestibular system.Otolaryngol Head Neck Surg,1991,105:4935103，Bridgeman D,Hoffman L,Wackym P A,et al.Distribution of choline acetytransferase mRNA in the efferent vestibular neurons of the chinchilla.J Vestib Res,