紫外分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐-

1、第21卷,第6期光谱实验室Vol.21,No.6 2004年11月Chinese J ournal of Sp ectroscop y L abor atory November,2004紫外分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐刘红艳 宋秀环朱慧(吉林大学测试科学实验中心长春市西民主大街6号130026摘要在酸性条件下,亚硝酸盐与间苯二酚及锆氧离子反应生成有色螯合物,建立了一种简易快速的测定食品中微量亚硝酸盐的方法。优化了波长、酸度、显色剂用量、显色时间等实验条件,并由正交实验进一步验证。对猪肉、午餐肉、腊肠、香肠几种样品中的亚硝酸根离子进行测定,回收率达90%以上。关键词亚硝酸盐,肉制品,紫外分光

2、光度法,正交实验。中图分类号:O657.32文献标识码:B文章编号:1004-8138(200406-1119-031前言肉制品在加工和贮存过程中,加入适量的亚硝酸钠作为防腐剂,它能与血红蛋白作用产生血红色素,使肉制品保持色泽鲜艳。但如果摄入过量,会对人和动物产生急性或慢性危害甚至致癌1。所以对肉制品中的亚硝酸盐的分析和检测是十分必要的。检测亚硝酸盐常用的方法有光度法和离子色谱法。已报道的光度法主要有偶氮显色法、催化光度法、流动注射法以及荧光光度法25。本文是基于酸性条件下,亚硝酸盐能与间苯二酚及锆氧离子反应生成有色螯合物这一特性,建立了一种简易快速,可用于测定肉制品中微量亚硝酸盐含量的方法。

3、该分析方法操作简便、快速、干扰少,有良好的选择性,显色反应产物的稳定性高,是一种较为理想的测定肉制品中亚硝酸盐的方法。2实验部分2.1仪器与主要试剂Cary50紫外分光光度计(美国瓦里安公司;pHS-3C型数字酸度计(上海雷磁仪器厂。饱和硼砂溶液;22g/L的ZnSO4溶液;10g/L的亚铁氰化钾溶液。显色剂溶液:将1.0g间苯二酚和1.1g ZrOCl2·8H2O溶于25mL3.7mol/L的HCl溶液中,然后转移至500mL棕色容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度。硫酸钠和醋酸钠混合溶液:将1.0g Na2SO4和1.5g NaC2H3O2·3H2O溶于少量蒸馏水中,然后转移至

4、500mL棕色容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度。NO-2标准溶液的配制(500 g/mL:准确称取0.3749g已用浓H2SO4干燥过的亚硝酸钠,将其溶于少量蒸馏水,然后转移至500mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度。使用时稀释至所需浓度。2.2试验方法2.2.1样品制备先用食品加工机研碎样品,再准确称取20.0g试样,用约150m L蒸馏水分数次将试样洗于烧杯中,搅拌,浸泡。依次加入10mL饱和硼砂溶液、4.0mL22g/L ZnSO4溶液和2.0mL10g/L的亚联系人,电话:(04318502528;E-mail:liuhongyan作者简介:刘红艳(1967,女,长春市人,硕士,工程师,现主

5、要从事测试技术的研究与应用。收稿日期:2004-04-27铁氰化钾溶液,摇匀,静置,使蛋白质沉淀,再将其过滤至250mL 容量瓶中,并用少许蒸馏水分数次冲洗沉淀物,定容后待用。所选样品:猪肉、午餐肉、腊肠、火腿肠。2.2.2样品的测定取一定量的样品溶液于25mL 容量瓶中,依次加入3.5mL 显色剂溶液和3.5mL 硫酸钠和醋酸钠混合溶液,用蒸馏水定容并摇匀。放置10m in 后,用1cm 比色皿,以试剂空白作参比,在紫外分光光度计上于波长342nm 处测定吸光度。3结果与讨论3.1波长的选择图1表明,波长为342nm 时, 吸光度值最大。图1波长选择 图2酸度的影响3.2酸度的选择从图2可以

6、看出,pH 在1.32.0之间,吸光度影响不大,因此可以在此范围内选择酸度。3.3显色剂用量的选择取1.0mL 浓度为25.0 g /mL 的NO -2标准溶液于25m L 容量瓶中,先加入3.5m L 硫酸钠和醋酸钠混合溶液,再向其中加入不同体积的显色剂溶液,按试验方法,测定不同显色剂用量时体系的吸光度值,结果如图3 。图3显色剂用量的选择 图4显色时间的选择3.4显色时间的选择在室温25条件下,按照试验方法,测定不同时间显色体系的吸光度,结果如图4。10min 即显色完全。1120光谱实验室第21卷3.5正交实验综合分析以上正交实验结果(见表1,波长因素中以第组影响值最大,故选择最佳波长为

7、342nm ;同理酸度因素中第、第组影响值相差不大,这与条件试验中酸度的选择相吻合,故选择酸度为1.32.0。显色剂用量中第、组影响值相差不多,为节约试剂选择第组即3.5mL 。显色时间中4组值接近,即时间影响不大,选择10m in 即可。3.6样品测定结果及回收率从回收率来看(表2,本方法可以满足食品,尤其是肉类食品中亚硝酸盐的检测要求。表1正交试验数据及结果分布实验号波长(nm pH 显色剂用量(mL 显色时间(m in 吸光度(A 1335 1.2 3.0100.40222335 1.4 3.5200.52063335 1.6 4.0300.48774335 2.1 4.5400.474

8、15342 1.2 3.5300.52616342 1.4 3.0400.54147342 1.6 4.5100.58718342 2.1 4.0200.55909345 1.2 4.0400.549610345 1.4 4.5300.566711345 1.6 3.0200.566412345 2.1 3.5100.504913350 1.2 4.5200.420214350 1.4 4.0100.501815350 1.6 3.5400.487116350 2.1 3.0300.4492j 1.8846 1.8781 1.9592 1.9996j 2.2136 2.1305 2.0387

9、2.0462j 2.1876 2.1283 2.0981 2.0297j1.83831.98722.02812.0522表2样品测定及标准加入回收实验样品名称测得值( g加标NO -2量( g 加标测得量( g回收率(%猪肉18.7410.0027.9592.10午餐肉20.1510.0029.7896.30腊肠32.5010.0041.9894.80火腿肠 5.3210.0015.0897.60参考文献1王春林,于炎湖,齐德生.饲料与食品中亚硝酸盐的危险和预防J .饲料研究,2000,(10:2225.2S hanthi K ,Balasnbramanian N .T he S pectro

10、fluorom etri c M ethod for Determ i n i n g Trace S elenium in Fodder J .J .AOAC Int .,1994,77(6:1639.3高艳阳,徐春彦.催化分光光度法测定痕量亚硝酸根J .华北工学院学报,1997,18(2:133.4Ahmed M J,S talkas C D,Can non H L.Rapid Diagnostic M ethod for Goats Nitrite Intoxicati on the Detection of Urine or S allivausing A Cotton Probe w

11、 ith Nitride ReagentJ.T alanta ,1996,43(7:1009.5杨景和,邹华彬,任学贞等.荧光光度法测定天然水中痕量NO -2和NO -3J.理化检验(化学分册,1993,29(5:278.6王洪艳.计算机与化学化工实验数据处理M .长春:吉林大学出版社,2002.148.Determination of Nitrite in Foods of Meat by UV S pectrophotometryL IU Hong -Yan S ONG Xiu -Huan Z HU Hui(The Center of T esting Science ,Jilin Uni

12、ver sity ,Changchun 130026,P .R .China AbstractA sim ple and fast method for the determination of trace nitrite w as developed based on the reaction of nitrite w ith the resorcinol and the zirconium oxyg en ion to create a colored chelate under the acidic condition.The influence of wavelength,acidity,concentration of color reagents and coloration time on the absorbence w ere studied and the experimental conditions w ere optim ized,w hich is confirmed by normal experim ental design