决明子中蒽醌类成分的含量测定(1)

1、决明子中蒽醌类成分的含量测定(1)        作者：张小梅， 杨荣平， 励娜， 王宾豪， 梁旭明【关键词】 紫外分光光度法；,决明子；,蒽醌摘要：目的建立决明子中蒽醌类成分的含量测定方法。方法采用聚酰胺吸附纯化样品，醋酸镁显色，紫外分光光度法测定。结果在4.618.4 g/ml浓度范围内对照品1，8-二羟基蒽醌的吸收度与浓度线性关系良好，相关系数r0.999 8。平均回收率为101.0，RSD2.48（n9）。结论该法快速，灵敏，重现性好，能准确测定决明子中蒽醌类成分的含量。关键词：紫外分光光度法； 决明子；

2、蒽醌Determination of the Content of Anthraquinones in Semen Cassiae by Ultraviolet SpectrophotometryAbstract：ObjectiveTo estabish a method for the determination of the content of anthraquinones in Semen Cassiae.MethodsSample was purified by polyamide,colored with magnesium acetate and it's content

3、 was determined by ultraviolet spectrophotometry.ResultsThe absorbency and concentration of 1，8-dihydroxy anthraquinone have good linearity in the range of 4.618.4 g/ml(r0.999 8). The average recovery was 101.0%.ConclusionThe method is sensitive,reliable,reproducible and can be applied to determine

4、anthraquinones in Semen Cassiae accurately.Key words：UV spectrophotometry; Semen Cassiae; Anthraquinones    决明子为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.或小决明Cassia tora L.的干燥成熟种子。具有清肝明目、润肠通便之功效，为临床常用中药。其主要化学成分为蒽醌类化合物。本实验采用紫外分光光度法，首次采用聚酰胺树脂对其进行纯化，以醋酸镁乙醇溶液为显色剂，对决明子中结合蒽醌、总蒽醌类化合物进行了含量测定。现将结果报道如下。1

5、 仪器与材料UV-1601紫外-可见分光光度计（日本岛津公司），AEG-45SM电子天平（十万分之一，日本岛津公司），决明子（由本院生药室提供并鉴定），1，8-二羟基蒽醌(中国药品生物制品检定所，批号：0829 9702)，聚酰胺（无锡光明化工有限公司），所用试剂均为分析纯重庆川东化工（集团）有限公司化学试剂厂。2 方法与结果2.1 对照品溶液的制备取1,8-二羟基蒽醌对照品适量，精密称定，加乙醇制成每毫升中含0.23 mg的溶液，即得。 2.2 供试品溶液的制备2.2.1 总蒽醌供试品溶液的制备取本品粉末（过4号筛）约1 g，精密称定。置索氏提取器中，加乙醇100 ml回流提取至无色。提取液

6、经减压回收后，残渣加浓度为1 mol/L盐酸溶液40 ml回流水解3 h，然后用120 ml氯仿分4次回流萃取，30 ml/次。合并氯仿萃取液并加适量蒸馏水洗至中性，回收氯仿。残渣加氯仿溶解并转移至25 ml量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，即得。2.2.2 结合蒽醌供试品溶液的制备取本品粉末（过4号筛）约1g，精密称定。置索氏提取器中，加乙醇100 ml回流提取至无色，提取液经减压回收后残渣加120 ml氯仿分4次回流提取至无色，按上述总蒽醌供试品溶液的制备方法，自“残渣加浓度为1 mol/L盐酸溶液40 ml回流水解3 h”起同法制备，即得。2.3 最大吸收波长的测定精密吸取总蒽醌供试品溶液适量

7、，加1 g聚酰胺拌匀，蒸干，通过聚酰胺树脂柱（内径1.5 cm，长30 cm），以水30 ml洗脱，弃去水液，再用95%乙醇200 ml洗脱，收集洗脱液，蒸干。另取对照品溶液适量，水浴蒸干，残渣加0.5MgAC-乙醇溶液1溶解并转移至25 ml量瓶中，加0.5MgAC-乙醇溶液至刻度，摇匀，以相应试剂作空白，照紫外-可见分光光度法2在400800 nm范围进行光谱扫描，考察其最大吸收波长。结果显示供试品溶液、对照品溶液在510 nm均有最大吸收，故确定510 nm为测定波长。光谱扫描图见图12。图1 对照品光谱扫描图（略）    图2 供试品光谱扫描图（

8、略）2.4 标准曲线的制备精密吸取对照品溶液0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8ml，分别置10 ml量瓶中，水浴蒸干，残渣加0.5MgAC-乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，以相应试剂作空白，照紫外-可见分光光度法，在510 nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A0.048 8C 0.049 6（r0.999 8，n7）。结果表明，1，8-二羟基蒽醌浓度在4.618.4 g/ml范围内的线性关系良好。2.5 精密度实验取同一对照品溶液，重复测定吸收度6次，计算，得RSD=0.46（n=6）。结果表明，精密度良好。2.6 稳定性实验

9、取供试品溶液及对照品溶液适量，按2.3项下方法同法操作，室温放置，显色后分别于0，30，60，90，120 min测定吸收度。结果表明,对照品溶液及供试品溶液在显色操作完成后120 min内稳定，其RSD分别为1.07和0.81。2.7 重复性实验精密称取同一样品（重庆）6份，照2.2项下制备供试液，精密吸取供试品溶液适量，按2.3项下方法操作，测定吸收度，计算得平均含量为0.37, RSD=1.85%（n=6）。结果表明，供试品重复性良好。2.8 加样回收率实验精密称取已知总蒽醌含量的决明子药材（重庆）0.6 g 9份，分别按样品中总蒽醌含量的80%，100%和120%精密加入对照品，每个梯度3份。按照2.2.1项下制备供试液，按2.3项下方法操作，测定，计算回收率。结果见表1。表1 回收率实验（略）2.9 样品含量测定精密量取供试品溶液各2 ml，按2.3项下方法同法操作，计算 ，即得。样品的含量测定结果见表2。3 讨论3.1 从线性、稳定性、精密度、重复性及加样回收率等实验结果可以看出用紫外分光光度法测定决明子中蒽醌类成分的含量准确性高，重现性好，方法