2012年不同浓度6-BA对蝴蝶兰增殖的影响

1、分类号： 学校代码： U D C： 学 号： 内蒙古XX大学职业技术学院 本科生毕业论文题 目：不同浓度6-BA对蝴蝶兰增殖的影响 英文题目: Different 6-BA concentration on the proliferation of Phalaenopsis毕 业 生：XXX专 业：XXXXXX指导教师：XXX职 称：讲师提交时间：二一二年六月目 录摘 要2关键词2引 言21、 试验材料31.1 供试材料31.2 试验地点31.3 试验时间32、试验方法与设计方案32.1试验方法32.1.1母液的配制32.1.2培养基的配置32.1.3接种42.1.4培养42.2 方案设计42

2、.2.1方案设计42.2.2五种培养基配方53、试验分析与讨论53.1个别指标的对比与分析53.1.1不同培养基增殖情况的对比63.1.2不同培养基同分别在30、60天的叶片情况的对比63.1.3不同培养基褐变情况的对比63.2结果与分析7致 谢8参考文献9不同6-BA浓度对蝴蝶兰增殖的影响摘要：本次实验以蝴蝶兰品种“JD01”无菌苗进行培养，比较不同浓度6-BA对蝴蝶兰原球茎增殖效果的影响，用这种方法具有增值率高，速度快，不受季节限制，可周年生产，易去除病毒等优点。为此我们进行此次试验来配制出一种加快蝴蝶兰繁殖的培养基。在此次实验中我们制定了蝴蝶兰“JD01”品种对不同浓度6-BA培养基的适

3、合程度。将JD01品种无菌苗分别转接到这五种不同浓度的培养基中，经过数月试验得出蝴蝶兰JD01品种适合：MS+6-BA 4.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物（香蕉）100g，为蝴蝶兰增殖最合适的培养基。关键词： 蝴蝶兰； 6-BA； 增殖Different 6-BA concentration on the proliferation of PhalaenopsisAbstract: Phalaenopsis rely on seed breeding difficulties, using tissue culture to accelerate its rate of pr

4、opagation, but in the course of training in the use of a medium which the propagation of the fastest or unknown, for us to the test to speed up the preparation to a Butterfly Orchid Propagation of the medium. The experiment in accordance with the moth orchid on hormone 6 - BA concentration of the di

5、fferent requirements for the production of different concentrations of medium to select the most suitable for the moth orchid proliferation of the medium. In this experiment we enacted the five different concentration of media, both 6 - BA in five different concentration, and then the moth orchid ti

6、ssue culture that received no vaccine to five different concentrations of the medium, after Test a few months that : MS +6- BA 4.0 mg / L + agar 12 g + sucrose 30 g + organic appendages (banana) 50 g, as the moth orchid proliferation of the most appropriate medium.Keywords: Phalaenopsis,；6-BA； proli

7、feration引言：兰花是风靡世界的珍贵观赏花卉，属单子叶植物中的兰科。兰科大约有500多个属，2万多个种，为多年生草本植物。除沙漠、极地外，它遍布于世界各地，但大多数种类集中在东南亚、澳大利亚及南美洲、非洲和马达加斯加1。兰花以它奇特的外形，绚丽多变的花色，素雅的芳香，优美的叶形，深受各国人民的喜爱2。蝴蝶兰是兰花的品种之一，它的原生种有70多种，原产于我国台湾、菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西亚等地。蝴蝶兰属热带气生兰，容易栽培，花形似蝴蝶，形态美妙，色彩丰富，花期长，是近年来最受欢迎的兰花之一3，因此我们要将蝴蝶兰引进我国，以供人们的欣赏。但是蝴蝶兰依靠种子繁殖其速度较慢，所以人们经过

8、近几年的研究得出蝴蝶兰利用组织培养能加快其繁殖速度413，但是在培养过程中使用哪一种培养基的繁殖速度最快还是个未知数，为此我们进行此次试验来配制出一种加快蝴蝶兰繁殖的培养基，以加快蝴蝶兰组培生产在我区的发展。1、试验材料1.1 供试材料：蝴蝶兰“JD01”品种的无菌苗。1.2 试验地点：内蒙古农业大学职业技术学院园艺园林系组培繁育实训室。 1.3 试验时间：2011年3月15日至2011年11月28日。2、试验方法与设计方案2.1 试验方法2.1.1 母液的配制5 ：（1）大量元素的配制：KNO3、NH4NO3、MgSO4、KH2Po4、CaCl2；（2）微量元素的配制：KI、NaMoO4、C

9、uSO4·5H2O、CoCL2、ZnSO4、MnSO4、硼酸、EDTA、FeSO4；（3）有机成分的配制：甘氨酸、VB1、盐酸吡哆辛、烟酸；（4）生长调节剂的配制：6-BA（6-苄氨基嘌呤）。（5）铁盐母液的配制：Na2-EDTA、FeSO4·7H2O2.1.2 培养基的配制：MS+6-BA 3.0 mg/L 1LMS+6-BA 4.0 mg/L 1LMS+6-BA 5.0 mg/L 1L +琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物(香蕉)100gMS+6-BA 6.0 mg/L 1LMS+6-BA 7.0 mg/L 1L2.1.3 实验材料的消毒：将蝴蝶兰的外植体先用无菌水冲洗

10、5-6次，然后放入0.1%的HgCl溶液中同时加入2-3滴吐温浸泡7-8min，时间一到，立即将浸泡溶液倒出用清水冲洗5-6次，在用无菌滤纸吸取外植体表面的水分。以待于接种。2.1.4 接种(1) 将配制好的培养基置于无菌室中，用于诱导组培无菌苗的增殖。(2) 将接种用具、酒精灯、烧杯、无菌培养皿、培养基等置于超净工作台的接种台面；打开超净台的电源开关，打开鼓风开关（调节送风量），并打开紫外灯消毒20min，之后关掉紫外灯，继续送风510min，打开日光灯开关，准备接种6。(3) 用水和肥皂洗净双手，穿上灭菌过的专用实验服与鞋子、戴上口罩与帽子，进入无菌操作室。(4) 无菌操作前，将双手用70

11、%乙醇棉球擦拭消毒，并用乙醇棉球擦拭超净工作台的台面及四壁，解剖刀、剪刀、镊子等金属工具在用乙醇棉球擦拭后，浸蘸75%乙醇，用酒精灯外焰灼烧灭菌，后置于支架上冷却备用7。(5) 培养基瓶用乙醇棉球擦拭，码放在左侧。 (6) 无菌纸置于超净工作台，打开包纸，用镊子将无菌滤纸取出，置于操作人员的正前处。(7) 在酒精灯火焰处打开外植体材料瓶，将植物材料用灭过菌剪刀剪下并用镊子取出置于无菌滤纸上。(8) 一手持镊子，一手持解剖刀，将植物材料按照要求切割。切割时，需将变褐的部位、根切下弃去。根据其增殖方式，将小苗切成单株、或小苗丛（分割时不要破坏其原球茎），或小段（每段均有芽）接种于继代培养基中，与初

12、代培养不同的是，继代培养时，每瓶中的接种材料可适当多接，但是材料要均匀分布8 9。 (9) 在标签上写上培养基编号（即6-BA不同浓度），日期、实验者姓名，全部接完后，一起取出，放于培养架等处培养。 (10) 接种结束后，关闭和清理超净工作台，并清洗用过的玻璃器皿等。2.1.4 培养将接好的蝴蝶兰置于培养室中，按不同浓度有规律的摆放在培养架上进行培养，以便于观察记录。每天进行光照时间12小时，暗培养12小时，并且要注意当蝴蝶兰褐变程度严重时及时进行转接，以保证蝴蝶兰的正常生长10 11。2.2 方案设计2.2.1 方案设计本次试验采用单因子试验主要是在MS、蔗糖、琼脂用量不变及培养条件相同的情

13、况下只改变6-BA的浓度来进行的，为此我们选用了五种不同浓度的6-BA来进行实验，这五种浓度分别记作（6-BA3.0mg/L）、（6-BA4.0mg/L）、（6-BA5.0mg/L）、（6-BA6.0mg/L）、（6-BA7.0mg/L）。每个浓度做2L（1L能盛装12个兰花瓶）24瓶。共10L。1个浓度为1个处理，共5个处理。2.2.2 五种培养基配方 : MS+6-BA 3.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物(香蕉)100g: MS+6-BA 4.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物(香蕉)100g: MS+6-BA 5.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机

14、附加物(香蕉)100g: MS+6-BA 6.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物(香蕉)100g: MS+6-BA 7.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物(香蕉)100g3、试验结果与分析 经过长期试验与观察,我们记录下了蝴蝶兰在同一时期内不同培养基中的生长变化,并得到了许多不同数据,根据此数据,我们将比较出最适合蝴蝶兰生长的培养基。我们观察的项目分别有蝴蝶兰的原球经增殖情况、蝴蝶兰的叶片变化、蝴蝶兰的褐变情况123.1 观察方法：将不同浓度6-BA的培养基分别（24瓶一组）摆放在培养架上，每次观察蝴蝶兰JD01品种在不同浓度培养基上的生长都要进行比较，前一个月每天

15、进行两次观察:上午在9:00观察一次，下午在15：00观察一次。中间的两个月每两天进行一次观察，主要观察原球茎的增殖情况和生长情况。后两个月每五天进行一次观察，主要观察叶苗的生长状况。从而得出最后的结论。表1 增殖情况调查表增殖倍数增殖周期增殖方式2倍88天类原球茎4倍68天丛生芽5倍60天类原球茎及丛生芽3倍70天类原球茎及丛生芽3倍80天丛生芽3.2 个别指标的对比与分析3.2.1 不同培养基增殖情况的对比由表1分析：观察增殖情况得出、的增殖倍数是相对较多的，增殖的周期性也是较短的，因此可以看出、对蝴蝶兰的增殖效果的较好的。3.2.2 不同培养基在30天的JD01品种叶片情况的对比表2 叶

16、片情况调查表叶片数量叶片形状叶片颜色叶片大小(长×宽)1-3片叶片生长不均匀黄绿色1.5×0.5cm2-4片大小叶差异小浓绿色1×0.5cm2-3片叶比较正,对称性不好初为浅绿色,后变绿色1.5×0.75cm1-3片叶比较正,大小叶片差异大浓绿色1.5×0.45cm1-3片叶偏少,生长不均匀有些出现红褐色0.75×0.25cm不同培养基在60天的JD01品种叶片情况的对比表3 叶片情况调查表叶片数量叶片形状叶片颜色叶片大小(长×宽)2-6片叶片生长不均匀绿色2.5×1.5cm5片叶片长势均匀浓绿色2×1.

17、5cm4-5片叶比较正,对称性较好叶片绿色发红3×1.5cm3-6片叶比较正,大小叶片差异大浓绿色3×1.0cm3-5片叶片少,生长不均匀颜色绿色1.5×0.5cm由表2、3分析：观察叶片情况可以看出，在叶片数量上、生长的较好；在叶片形状上、生长的较好；在颜色上、生长的较好；在叶片大小上、长的较好，经比较得出、对蝴蝶兰叶片生长的效果较好。3.2.3不同培养基褐变情况的对比由表4分析：观察褐变情况可以看出，在发生褐变的快慢来看发生的较晚些；在发生褐变的程度来看、发生的较轻些；在控制褐变转接的次数来看发生的次数较少些，经比较在控制蝴蝶兰发生褐变上较好些。表4 褐变情况

18、调查表开始发生褐变的快慢发生褐变的程度（褐变斑块大小）/天控制褐变转接的次数13天直径为3cm/3天2次18天直径为0.5cm /3天1次7天直径为2cm/3天3次14天直径为1cm/3天2次6天直径为4cm/3天4次3.3 小结经过试验的结果统计分析标号为、的培养基对蝴蝶兰的增值情况、叶片情况较好， 其中号培养基褐变的发生率最低。由此可以得出 号培养基的基本性状指标较好，相对其它更为理想，号培养基与其它培养基的区别是在6-BA的浓度上，所以可以推出： MS+6-BA 4.0 mg/L+琼脂12g+蔗糖30g+有机附加物（香蕉）100g这种培养基配方比较合适。但是需要指出的是，这种培养基配方并

19、不是最合适的，是在我们做试验的这种条件下，这几种配方的比较中得出的结果，并不是蝴蝶兰生长最理想的培养基配方，由于时间和条件关系本次试验只能做到这种程度。希望以后的试验人员在各种条件相对满足的情况下做得更好。能够做出进一步适合我区蝴蝶兰的发展现状。致 谢在本论文完成之际，对李发虎老师在我实习期间的悉心指导以及在论文写作过程中的指导表示衷心的感谢。同时，在实习和完成此论文时，得到园区老师和实验老师以及许多同学的热情帮助，在此表示感谢。由于水平和时间有限，本次试验难免有不完善的地方，望各位老师多多指正，提出意见和建议。参考文献：1 邹金环 蝴蝶兰组培苗移栽成活率研究 J 安徽农业科学, 2007年 14期  2 李晶,韩