不孕妇女乙肝病毒感染者的卵巢储各功能研究

1、-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -不孕妇女乙肝病毒感染者的卵巢储备功能研究柳榴 ,刘倩 ,文妍琪 ,杨書(武汉大学人民医院生殖医学中心,武汉 430060)【摘要】(HBV)感染 HBV-DNA 高拷贝数的不孕妇女的卵巢储备目评价乙型肝炎病毒的及功能。方/ 卵胞浆内单精子注射一胚胎(IVF/ICSI-ET) 治疗法回顾性分析来院进行体外受精移植的例不孕患者,根据血清HBsAg 是否阳性及HBV-DNA 摘度将实验对505 象分为3组:血清HBsAg(-)为 A 组 ;血清 HBsAg（十 ),HBV-DNA500为 B 组 ; HBsAg(十 ),HBV-IU/m13 组患者的基本情

2、况,并以DNA 500IU/m1 为 C 组 。评估FSH、 LH 、 E2 水平和 AFC 等血清基础为指标,分析比较 HBV 感染状态与卵巢储备功能的关系。结果(l)HBV-DNA 阳性率 (摘度 5oo IU/m1) 在 HBV 感染的不孕妇女中为48. 60%,平均HBV-DNA拷贝数为 5. 86XIO IU/m1(5Xl02-l. 28Xl0 IU/m1);(2) 与 A 组相比 ,C 组患者中 AFC6的发生率更 (9. 62% vs 2. o6%),差异有统计学(P0 o5); C 组患者在卵巢储备功能低下高意义且(AFC 6)的不孕妇女群(AFC 6)的不孕妇女群体中所占的比

3、例显著高子在卵巢储备功能正常体中所占的比例(45. 4% vsl9. 5 % ,Po. o5 )而, A 组患者在卵巢储备功能低下的不孕妇女群体中所占的比例明显低子在卵巢储备功能正常的不孕妇女群体中所占的比例(27. 3% vs. 59.0%,P 0. 05);(3)多元逻辑显著差异回归分析显示 ,与 A 组相比 ,C 组卵巢储各功能低下的风险更高CIR3. 689,95% Cf(l.043,l3. 048) (P10 U/L 、E2294 pmo1/L 、FSH/LH3 、AFC6 时均意味着卵巢储备功能低下。且,基础窦卵泡与基础性激素、各种刺激试目前认为-WORD 格式 - 专业资料 -可

4、编辑 -验相比更能有效评估卵巢储备功能。HBV 作为一种噬肝性病毒 ,除了存在于肝细胞 ,还存在于生殖性腺 ,如卵巢间质细胞、 卵母细胞、睾丸等肝外组织 , 并可通过生殖细胞垂直传播。 近年来 ,在接受辅助生殖技术 ( ART)治疗的夫妻中发现 HBV 感染的患者越来越多。 已有研究报道 HBV 能够感染精子 ,进而影响精子的-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -质量和功能。然而对于HBV 是否能够影响卵巢的储备功能，目前的研究尚无明确结论。针对这一问题，本研究对进行不孕治疗的女性HBV 阳性患者与隐形患者比较，旨在探讨女性HBV 感染状态与卵巢储备功能的关系。资料与方法一、研究对象回顾

5、性分 201年 4 月201412 月在武汉大学人民医院生殖中IVF/ICSI-ET析至年心进行2治疗的不孕妇女。纳入 / 排除标准：38 岁，无子宫内膜异位症史和卵巢手术史，HCV 、 HIV年龄且排除和梅毒阳性者。二、病毒检测及卵巢储备功能参数检测回顾患者在进行 IVF/ICSI-ET 治疗前 ,均常规筛査术前病毒全套 . 对于血清 HBsAg 阳性的患者再常规进行 HBV-DNA 检测 ,HBV-DNA 滴度 500 IU/m1 为阳性 ;有效期为 12 个月 .进入治疗周期后 ,常规于月经第 2 天或第 3 天采血做性激素全套检测 ,并测量 AFC。检测方法 :来用电化学发光法检测乙肝

6、表面免疫标志物,仪器为ROCHE 全自动化学发光免 疫 分 析 仪 ( 型 号Cobas e601),试 剂 为 ROCHE 仪 器 配 套 试 剂 盒 ;来用荧光定量PCR(fluorescence quantita- tive PCR,FQ-PCR)法检测血清HBV-DNA, 仪器为ROCHE 实时荧光定量 PCR 仪 (型号 LC480) , PCR试剂盒购自上海复兴生物技术有限公司 ,所有操作严格按照试剂盒说明书进行。三、分组及资料收集根据血清 HBV 检査结果分组: ( 1) HBV( - )组:血清 HBsAg 阴性 (A组,n=291) ;(2)HBV(十 )HBV-DNA(-

7、) 组: 血清 HBsAg 阳性 , HBV-DNA 500 IU/m1(B 组 ,n= 110); (3) HBV(十) HBV-DNA( 十 )组 : 血清 HBsAg 阳性 , HBV-DNA 500 IU/m1(C 组 ,n= 104) 。收集的基本资料包括:年龄、体重指数(BMI)、不孕时间、不孕类型(原发 / 继发 )、病毒筛査结果、基础血清 FSH、LH 和 E2 水平及 B 超下 AFC 值。四、统计学分析数据采用 SPSS2L0统计软件进行分析。计量资料用均数土标准差(土 s)表示 ,计数资-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -料用率 (%)表示 ;对资料进行方差分析、

8、t 检验、卡方检验; 在调整了年龄、BMI 、不孕时间、不孕类型等因素后 , 使用多元逻辑回归分析对 HBV 感染状态与卵巢储备功能低下的关系进行了评估 , P0. 05)(表 1)。三、 HBV 感染与卵巢储备功能下降之间的关系1. 不同HBV 感染状况下卵巢储备功能低下的发生率:卵巢储备功能低下的判断标准为AFC10 U/L 、 FSH/LH3 、 E2294 pmo1/L 。研究发现 ,C 组中AFC10(P0 05); 3于高于血。U/L 、 FSH/ LH3 、 E2 294 的发生率均无统计学表pmo1/L差异(P0 05)( 2)2.卵巢储备功能与各观察指标及:我们基于HBV 感

9、AFC水平 (6或 6)染状况的关系的患者年龄显著增高分析了各项指标与卵巢储备功能低下之间的关系, 发现AFC6(P0. 05) (表 3)。学差异,（插图表1 、2、 3）-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -同时 ,我们也分析了HBV 感染状态与卵巢储备功能低下之间的关系,发现C 组的患者在卵巢储备功能低下之间的关系，发现C 组患者在卵巢功能低下(AFC6)的患者中所占的比例大于在卵巢储备功能正常(AFC6 )的患者中的比例(P0. 05);相反 ,A 组的患者在卵巢功能下降(AFC6)的患者中的比例小于在卵巢功能正常(AFC 6)患者中的比例(P0. 05) 而; B 组患者与卵巢

10、储备功能低下无关(P= 0. 52)(表 4)。四、逻辑回归分析以卵巢储备低下作为应变量 ,年龄、 BMI 、不孕时间、不孕类型、 HBV 感染状态作为因变量 ,我们对卵巢储备功能低下与 HBV 感染状态之间的关系进行了多元逻辑回归分析 , 在调整了年龄、 BMI 、不孕时间、不孕类型后 ,与 A 组相比 ,C 组的卵巢储备功能低下的发生凤险显著增大 0R 3.689,95%CI(1.043,13.048)(P0 05( 表 5)。-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -讨论我国是 HBV 感染的高发流,人群中 HBsAg 阳性率为7 2% ,其中处在婚育年龄行区人群的HBV 携带率近 1

11、0%。而近年来 ,在来医院进行 IVF/ICSI-ET治疗的不,血清乙肝表孕女性患者中面抗原 (HBsAg)阳性 HBV-DNA 拷贝阳性的患者比较常HBV 感染的患者中 ,血清或见。在中HBV- DNA 含量是反映病毒活跃程度最最可靠的指标。 本研究主要HBV 感染状直接、是分析态与卵巢储备功能的关系。本研究搜集到感HBV 的不孕患者214 例 , HBV-DNA阳性率为 48.60%。研究发染,HBV(十 ) HBV-DNA( 十 )是卵巢储备功现 ,在HBV 感染的不孕妇(AFC6 )的高危因素 ,使女中能低下卵巢储备功能低下的发生风险增窦卵泡是指阴道超声下卵巢内可见的直2-9mm 的卵

12、大。径泡 ,是成熟卵泡的前体,AFC 能够很好地反应卵泡池中剩余的原,是卵巢储备功能的直接始卵泡数体现。目前认为 ,基础窦卵泡与基础性各种刺激试验相比更能有效评估卵巢储激素、备功能。Hu 等对 HBsAg 阳性而其配偶阴性的女HBV-DNA 和 RNA 的分析 ,发现 HBsAg 存在性进行于卵母细胞的细胞核、细胞质和胚胎。而在卵母细胞或胚胎中HBV-DNA 能够复制 ,并-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -的且在mRNA 和蛋白质水平上表达。有研究表明在通过血睾屏障进入睾丸的HBV-DNA 在复制的同时还会有一定数量整合到精子,影响精子遗传物质的稳定性进而影响精子的,同染色体质量时,

13、-WORD 格式 - 专业资料 -可编辑 -HBV-DNA 表达的部分成分能够导致精子线粒体膜电位的缺失;另外 ,最终降低精子的活力HBV 感染另一潜在的病理致病机制为:在感染的局部组织通过抗原-抗体复合物的沉积引起局部的免疫反应或炎性反应,导致相关功能的破坏。而这些致病机理可能同样适用于整合入卵巢组织和卵母细胞的HBV-DNA, 2013 年李苗发现HBV 感染可以促进卵巢颗粒细胞的凋亡,因此 HBV-DNA 的感染可能会损伤卵巢组织和细胞,引起卵母细胞储备功能如 AFC 的改变 ,而有研究表明 AFC10 U/L 、FSH/LH3 、E,29,1 pmo1/L 的发生率在三组间的差异均不具

14、有统计学意义。:垂体分泌的 FSH、LH 是受下丘脑促性腺激推测可能的原因素释放激素GnRH 及卵巢雌激素的共同协调作用来调控 ,卵巢储备功能若受到,卵泡数目减少 ,从而其分泌的雌孕的影响激素会减少 ,造成对垂体 FSH、 LH 的抑制作用减弱,从而导 FSH、LH 升高 ,但是它们的致血清变化比 AFC 的变化发生的较晚。 同时卵巢或卵母细胞中虽HBV-DNA, 其含量远远低于然存在血清 ,卵巢组织或卵母细胞可能会通过某种机制逃避HBV-DNA 造成的部分免疫伤害。一些其次 ,即使存在 HBV-DNA 整合到染色体 ,造成遗传物质稳定,或者在 HBV 感染局部存在性的改变免疫、炎症反应,但是卵巢或卵母细胞同时也存在一定程度的自我修复功能,能修复部分所造成的损伤。因此HBV 感染患者中高 HBV-DNA滴度对卵巢储 AFC 的影响可能还不备功能或足以引起FSH、 LH 、 E2 等一些指标的明显的改变。本文的不足之处在于临床样本量有限,因此该结论仍然需要更大样本量的研究来证实。