慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达

1、慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达     01。 Note:Comparedwithnormalcontrolgroup，P<0.01;P<0.001。2.2 CAHB患者T细胞上CD69表达 患者外周血CD3 + T细胞CD69的表达水平与正常人对照组比较差异有显著性（P<0.01），其中CD4 + T细胞CD69的表达水平与正常人对照组比较差异无显著性（P>0.05），CD8 + T细胞CD69的表达水平明显高于对照组（P<0.01）;相关分析发现，CD8 + CD69 + T细胞的表达水平与病毒DNA

2、载量之间正相关（r=0.413，P<0.05），CD4 + CD69 + T细胞的表达水平与病毒DNA载量之间无相关性（r=0.095，P>0.05）。结果见表2、图1。表2 CAHB患者外周血T细胞上CD69表达（略）Tab2 Expression of CD69 + on peripheral blood lymphocytes in patients注:与对照组相比，*P<0.01。Note:Compared with normal control group，*P<0.01。图1 CD8 + CD69 + T细胞表达与病毒DNA载量相关性分析（略）Fig1 An

3、alysis of correlations between the viral load an ,慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达(3) d CD8 + CD69 + cells2.3 CAHB患者T细胞上HLA-DR + 表达 CD3 + T细胞中HLA-DR + 细胞与正常人对照组之间差异有显著性（P<0.001），其中CD4 + T细胞HLA-DR + 的表达与正常人对照组之间差异有显著性（P<0.01），CD8 + T细胞中HLA-DR + 细胞比对照组显著增高（P<0.001）;相关分析发现CD8 + HLA-DR + 细胞的数量与病毒DNA载量

4、之间正相关（r=0.536，P<0.01）CD4 + HLA-DR + 细胞的数量与病毒DNA载量之间无相关性（r=0.084，P>0.05）。结果见表3、图2。表3 CAHB患者外周血T细胞上HLA-DR + 的表达（略）Tab3 Expression of HLA-DR + on peripheral blood lymphocytes in patients注:与对照组相比，P<0.01;P<0.001。Note:Compared with normal control group，P<0.01;P<0.001。图2 CD8 + HLA-DR + T细

5、胞表达与病毒DNA载量相关性分析（略）Fig2 Analysis of correlations between the viral load and CD8 + HLA-DR + T cells3 讨论人类正常的免疫过程有赖于免疫细胞，在各类病毒性肝炎中，T细胞在乙型肝炎病变过程中的作用最为明显，T细胞功能具有双重性，在清除病毒和控制病毒扩散的同时，也与病情的加重有关。Sing 1 研究表明，各种乙型肝炎患者均存在不同程度的细胞免疫功能紊乱，其中T细胞亚群变化明显的是慢性活动性乙肝，表现为外周血CD4 + T细胞数量降低，CD8 + T数量增高，与本文检测的检测结果一致，说明慢性肝炎活动期随

6、着肝脏病变加重，细胞免疫损伤严重，成熟T细胞遭到破坏，造成CD4 + T细胞数量减少，而CD8 + T细胞作为主要的免疫效应细胞数量的增加与病毒的清除有关，CD8 + T细胞在清除病毒的同时也造成肝细胞大量破坏，引起临床上血清ALT持续升高，患者症状加重。CD69抗原又称早期激活抗原（EA-1），活化诱导分子（AIM），是表达于丝裂原或抗原刺激的各种激活T、B、NK细胞的最早期标志之一。在正常情况下外周血循环中极少有表达CD69的T细胞，但在特异性抗原或促有丝分裂原刺激下12h细胞表面CD69的表达即可测出并迅速达到高峰，表达可持续72h。CD69的功能是上调白介素2受体的p55链，产生Th1

7、样细胞因子，引发淋巴细胞增殖，起信号传递功能 4 。Goncalves 5 通过对HBV疫苗的研究发现T细胞CD69表达与HBV感染关系密切，认为T细胞CD69表达的降低是机体对HBV无反应的结果。以流式细胞仪分析30例CAHB患者外周血T淋巴细胞CD69抗原的表达，结果显示机体受到HBV感染后，特异性抗原的刺激使患者免疫系统发生反应                      

8、        性改变，T细 胞CD69表达增高。通过对患者T细胞亚群的研究发现，患者的CD8 + 杀伤性T细胞对HBV病毒的反应一直处于高水平激活状态，CD4 + 辅助性T细胞早期活化抗原处于低水平激活状态，机体通过活化及产生的特异性抗病毒的细胞毒性T细胞（CTL），从而达到清除病原体的目的。人类主要组织相容性复合物（MHC）是人体细胞重要的表面抗原，而HLA-DR是MHC-类分子的主要抗原之一。正常情况下，它仅分布于B细胞、活化的T细胞、巨噬细胞、树突状细胞和精子等，是免疫反应中重要的参与者，HLA-DR在免疫应答中的主要作用是与

9、T细胞表面的CD4 + 分子和/或抗原结合，促进抗原传递，在抗原提呈中起着第一信号作用 6 ，HLA-DR在静息的T细胞上表达很弱，T细胞激活时，其表达显著升高。与CD69抗原不同，HLA-DR激活标志在T细胞激活晚期表达且表达时间最长。实验发现患者组CD3 + 细胞HLA-DR表达增高，与蔡莉静结果一致 7 ，进一步研究发现HLA-DR在CD4 + 、CD8 + T细胞中均显著增高，提示机体的免疫系统对病毒感染一直处于较高的应答状态，通过HLA-DR表达的增高，一方面调节机体免疫失调的状况，另一方面可能与乙肝的自身免疫反应有关 8 。相关分析发现CD8 + CD69 + T、CD8 + HL

10、A-DR + T细胞的数量与病毒DNA载量呈正相关，可能是由于大量病毒抗原刺激机体免疫系统，机体试图通过异常激活CTL，使CTL活性增强发挥其杀伤功能，从提 （，。）而有助于病毒的清除。观察T淋巴细胞表面分子及其不同亚群活化抗原的表达能较全面直观地了解机体的免疫状态。本文应用荧光三色流式细胞术通过对CAHB患者外周血T细胞及其活化抗原表达的检测，发现患者存在细胞免疫功能异常现象，尤其是CD8 + T细胞及其活化抗原的表达的增高表明它们在抗病毒感染过程中起重要作用，有关CD8 + T细胞活化抗原的表达能否反映病情及指导治疗有待临床进一步研究。参考文献:1Sing g，Butter-Worth L

11、，Chen X.Composition of peripheral blood lympho-cyte populations during different stages of chronic infection with hepatitis B virusJ.J Viral Hepat，1998，5:8386.2Rehermann B，Ferrari C，Pasquinelli C，et al.The hepatitis B virus persists for decades after patients，recovery from acute viral hepatitis desp

12、ite active maintenance of a cytotoxic T-lymphocyte responseJ.Nat Med，1996，2:11041108.3病毒性肝炎防治方案J.中华传染病杂志，2001，19:5662.4Rutella S，Rumi C，Lucia MB，et al.Induction of CD69antigen on normal CD4 + and CD8 + lymphocyte subsets and its relationship with the phenotype of responding T-cellsJ.Cytometry，1999，3

13、8:95101.5 Goncalves L，Albarran B，Salmen S，et al.The nonresponse to hepatitis B vaccination is associated with impaired lymphocyte activationJ.J Viro ,慢性活动性乙型肝炎外周血T细胞亚群上活化抗原的表达(5) l，2004，326:2028.6Park J H，Lee Y J，Kim K L，et al.Selective isolation and identification of HLA-DR-associated naturally processed and presented epitope peptides J.Immunol Invest，2003，32:155169.7蔡莉静，曹兴国，姜长林，等.乙型肝炎外周血淋巴细胞CD3 + 、CD3 + HLA-DR + 的表达J.上海免疫学杂志，2003，23:180转154.8Ahn S H，Han K H，Park J Y，et al.Association between hepatitis B