HPLC法测定辛伐他汀及其片剂的含量

1、    HPLC法测定辛伐他汀及其片剂的含量        摘要目的：建立用HPLC法测定辛伐他汀及其片剂含量的方法。方法：采用Alltima ODS柱(250 mm×4.6 mm)，于238 nm下检测，流动相乙腈-0.1%磷酸(6030)。结果：线性范围0.55 g（r=0.9998），最低检测限为0.3 ng，平均回收率为99.1%，RSD为0.82%。结论：方法重现性好，准确度高，适于制剂含量测定及稳定性研究。关键词辛伐他汀；高效液相色谱法中分类号：R917

2、文献标识码：A文章编号：1006-0103(2000)03-0205-02 辛伐他汀(simvastatin)为无活性内酯，经口服吸收后水解为相应的-羟酸结构，对HMG-CoA还原酶有抑制作用，可降低肝脏胆固醇的合成及调节低密度脂蛋白受体、促进低密度脂蛋白清除而降低细胞内胆固醇水平1。临床用于治疗高胆固醇血症，冠心病，可明显降低高脂血症患者血浆中的甘油三酯，提高高密度脂蛋白水平。目前除默沙东的舒降之外，国内尚无制剂生产，亦无含量测定的报道。1实验部分1.1仪器与试药岛津LC-6A型高效液相色谱仪配岛津SPD-6AV型紫外检测器、岛津C-R6A数据处理仪及WDL-95色谱工作站（中国科学院大连化

3、学物理研究所）；美国Orion Research EA-940型离子分析仪；岛津UV-2201型紫外分光光度计。乙腈（色谱纯，浙江黄岩化工试验厂)；磷酸（分析纯，北京化工厂)；冰醋酸，氢氧化钠（分析纯，北京化工厂）；蒸馏水（药用，自制）。辛伐他汀原料（批号970104、970114、970118），片剂（批号970308、970309、970310）(广东彼迪药业有限公司)；辛伐他汀对照品（批号53776-D，美国默沙东公司)；洛伐他汀对照品(批号970114，含量99.86，北京市药品检验所)。1.2色谱条件美国Alltima ODS柱(5m，250 mm×4.6 mm)，检测波长

4、238 nm，AUF 0.02,流动相乙腈-0.1磷酸（6030）用0.45 m微孔滤膜过滤并脱气,流速1.5 mlmin-1。1.3溶液的制备取蒸馏水900 ml，加冰醋酸30 ml，用20氢氧化钠溶液调节pH4.0，加水至足量，搅匀即得醋酸-醋酸钠缓冲液；取800 ml乙腈，加醋酸-醋酸钠缓冲液200 ml，搅匀即得溶解液；精取干燥至恒重的辛伐他汀对照品62.5 mg，在50 ml量瓶中用溶解液稀释至刻度，配成1.25mgml-1的辛伐他汀标准溶液,冷藏备用；精取干燥至恒重的洛伐他汀对照品25.05 mg，在50 ml量瓶中用溶解液稀释至刻度，制成0.501 mgml-1的洛伐他汀标准溶液

5、，冷藏备用。精取样品（片剂20片研细）相当于辛伐他汀40 mg，在50 ml量瓶中加溶解液（片剂超声30分钟）稀释至刻度，精密吸取续滤液5 ml，在25 ml量瓶中加溶解液稀释至刻度，即得样品溶液。1.4线性关系精取辛伐他汀标准溶液0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 ml，分别置25 ml量瓶中，用溶解液定容，进样20 l，取两次均值，以进样量为X，峰面积为Y进行线性回归，得回归方程Y6334.0371798.9X，r0.9998，线性范围0.55g。1.5方法考察ml-1ml-1ml-1和洛伐他汀标准液50 gml-1，进样20 l，记录色谱(1)，计算分离度为R=6.1，拖尾因子T1.

6、24，理论板数为10230。1辛伐他汀与洛伐他汀的色谱Fig 1 Chromatogram of Simvastatin and Lomvastatin mixture1 Blank（溶剂） 2 Simvastatin（辛伐他汀） 3 Lovastatin（洛伐他汀）1.6样品的含量测定将原料及片剂的样品溶液，进样10 l，进样5次取平均值，结果以标示量的百分数表示(表1)。表1原料及片剂样品的含量结果（n=5）Table 1 Samplesassay results（n=5）SampleNo.x/%RSD/Material97010498.840.9797011498.760.5397011

7、899.080.64Tablet97030896.171.4097030997.581.4797031098.190.312讨论 2.1片剂样品和辅料用紫外分光光度计扫描，样品在231、238、247 nm有吸收峰，辅料无吸收，选最大吸收波长238 nm作检测波长，扫描曲线见2。2辛伐他汀片的紫外扫描Fig 2 Ultraviolet spectrum of Simvastatin tablets2.2样品中存在洛伐他汀，参照美国药典2所收载的辛伐他汀含量测定项，本试验采用的流动相较美国药典比例略有调整，由6040变成6030，减少了水的用量，使保留时间缩短，适于快速分析。其理论板数（N）大于

8、2000，与洛伐他汀的分离度大于3，拖尾因子不大于2，符合美国药典的要求。2.3辛伐他汀片剂分别采用溶解液、乙腈、流动液作为溶解介质，超声30分钟提取，含量分别为98.2%±0.94%、95.3%±1.43%、69.7%±5.45%（n=3），以采用乙腈和醋酸-醋酸钠缓冲液（pH4.0）配成的溶解液提取效果最好。作者简介：闫小燕，女，学士，主管药师，从事医院药学工作。闫小燕（卫生部北京医院药剂科，北京100730）曹国颖（卫生部北京医院药剂科，北京100730）何笑蓉（卫生部北京医院药剂科，北京100730）胡欣（济南市千佛山医院，山东 济南250000）谷大建（济南市千佛山医院，山东 济南250000）参考文献1，Scandinavian Simvastatin Survival Study Group. Randomised trial of cholesterol lowering in 4444 patients w