检测猪伪狂犬病抗体的3种ELISA试剂盒的比较分析_图文

1、检测猪伪狂犬病抗体的种试剂盒的比较分析陈伟杰，周彩琴，黄怡君赵灵燕。吴赞蛄，倪柏锋徐辉（浙江省动物疫病预防控制中心。浙江杭州）摘要：为评价用于检测猪伪狂犬病抗体的种商用的试剂盒。择优选取一种作为本中心的检测试剂。用种试剂盒检测份免疫背景清楚的临床及试验血清，比较各试剂盒的检测阳性率敏感性。结果份血清经平试剂盒检测。检测阳性率分别为、和，且种试剂盒相同血清的检测阳性率相互间差异均极显著性（户），但是对于高抗体水平的份母猪血清检测阳性率相互间差异均不显著（尸）。检测数据表明与两者相关系数为，检测定性完全相符率达。结果种试剂盒检测阳性率、敏感性均以为最高，次之，氐；与两者呈现强相关，造成阳性检测率差

2、异显著的主要因素是方法的敏感性、试验结果的判定标准。关键词：猪伪狂犬病；抗体；：试剂盒伪狂犬病（，）是由伪狂犬病毒引起的多种家畜和野生动物感染的一种急性传染病。猪是的惟一自然宿主。能引起猪的亚缶床感染和潜伏感染，未获得免疫保护的猪群第次感染常以暴发式发生，日龄越小其发病率和死亡率就越高，尤其是哺乳仔猪可高达，给猪场带来灾难性的后果，并遭受巨大的经济损失。母猪对的免疫状态不同，哺乳仔猪的临床表现也不同。生产实践证明市场上商用疫苗免疫猪能产生较好的保护力，尤其是成年的公母猪在高抗体的水平下能有效地控制该病的发生。如何客观有效地评价疫苗的免疫效果成了科学有效地防治该病的关键措施之一。抗体监测方法较多

3、，其中酶联免疫吸咐试验（，）为国际贸易中抗体检测指定方法之一，且以其敏感、特异、简便等特点已被广泛应用于各个领域，我们试对个不厂家生产的商用抗体检测试剂盒作了比较分析，以筛选一种试剂盒作为本中心的检测试剂。现报告如下：材料与方法 材料根据比较试验方案要求选取了临床背景情况清楚的份猪血清样品。方法种商用的试剂盒分别为：西班牙公司一试剂盒（简称），批号：，：，适用于猪血清法国公司一：，批号为一一（简称），：，适用于猪血清（个体或者混样）美国公司，批号：一（简称），：。适用于猪血清、血浆和肌肉抽提液。每种试验的操作与结果的判定均严格按照其试剂盒说明书进行，同步检测所有血清样品，且所用试剂均在有效期内

4、检测并试验成立。（注：为间接，、均为阻断）为方便数据图比较分析，将试剂盒检测结果转换成（）。结果与分析种试剂共同检测的份样品结果分类汇总数具体见表与表。由表、表可知：检测阳性样品份、阴性样品份，其检测阳性率为阴性率为检测结果阳性份（检测未出现阴性）、阴性份、可疑份（检测均为阳性），其检测阳性率为，阴性率为检钡结果阳性份、阴性份、可疑份，其表与、检测分类情况表与检测分类情况注：表中份定性不符的样品中阻断率范围为（，）而阻断串范围为（。）。阻断率）。猪业科学年第期检测阳性率为，阴性率为。表头猪份血清检测数据分类统计情况 由表、表数据可见检测阳性率以为最高，次之，最低。其中三者检测阳性率、阴性率差异

5、性比较具体见表。猪伪狂犬抗体检测数据比较情况具体见图。对检测原始数据分析表明：与相比两者相关系数为检测结果定性完全相符比率为，完全不相符比率为。从图可见两者在第号样品之间有部分数值偏差较大且相对较为集中，其余样品偏差相对较小且定性相符；样品阻断百分率就整体而言比略小，也就是说数据点稍位于下方。从头试验猪不同免疫阶段采集的共份血清检测数据来看、均符合抗体消长规律头猪份血清按免疫状况分类统计情况见表。在份样品中的份母猪血清检测结果统计情况见表。蛴拇猪抗垂鼬蝴噼蝌嘞差异均不显著（尸）。表份样品检测分类统计百分率比较 注：同行比较，无相同字母表示差异板显著（）。 图猪伪狂犬抗体检测数据比较讨论从表数据

6、显示，与、相符性较差，尤其是阴性，这与该方法灵敏度有关，数据显示敏感性不高。由表数据及图可见，与检测结果相符性较好，除可疑区范围及附近有少量样品偏差较大外其余样品定性均相符，且两者相关系数达，另外有的样品定性不相符，这可能与方法的敏感性、判定标准及试验误差有关，在份不相符的样品中检测结果阻断率范围为（，），而检测结果阻断率范围为（，）。从表来看，猪伪狂犬病抗体及其抗体检测阳性率相互差异均极显著（），最低，次之，最高，由此可见种检测方法敏感性差异明显。而表中份母猪血清检测阳性率、和分别为张、和，相互间差异均不显著（），说明种方法相差不大，这似乎与前面相矛盾，其实不然，主要是检测结果同样品是否含有

7、高水平抗体有关，母猪高阳性率为其多次免疫苗所致。但为何一份母猪样品结果不一致，这与方法的特异性有关或是个别猪的血清成份差异较大所致，结合临注：同行比较，无相同字母且字母相邻表示差异极显著（），字母不相邻表示差异极显著（）。猪伪狂犬病免疫采用进。基因缺失弱毒疫苗，日龄滴鼻帖头份（勃林格殷格翰动物保健品有限公司），龄肌注头份（梅里亚有限公司法国生产厂）。表份母猪血清检测结果阳性情况注：检测结果阴性的母猪其具体数值为，而璐和检测结果各自阻断率为：和。床综合判定结果可靠性相对要小一些。由表数据可知随着猪群日龄的增长种方法阳性率均呈下降趋势，在伪狂犬二免后只有阳性率有所升高，而其余。种方法均无明显提高；种方法对于不同日龄段检测阳性率有所不同，均以最高，次之，最低，且在日龄段差别显著，这主要与猪高母源抗体水平及检测方法敏感性不同有关，对于龄段猪样品检溺阳性率均较低，种方法总体上差异不明显，同时结合抗体消长规律在一定程度可以说明方法特异性的可靠