日粮添加酵母价1 , 311 , 6 一葡聚糖对哺乳仔猪生长性能和免疫

1、日粮添加酵母价1 , 311 , 6 一葡聚糖对哺乳仔猪生长性能和免疫功能的影响王忠1，禺于明1，牛桂琴2，袁建敏1，杨鹰1( 1 中国农业大学动物科技学院，北京100094 ; 2 河北唐山大北农种猪有限公司，河北唐山064104 )摘要：试验选用相近胎次（4一6 胎）和分娩日龄（相差3d 左右）的长x 大二元母猪20 头，随机分成4 个处理组，各处理组哺乳仔猪均从5 日龄开始补料，哺乳仔猪日粮中分别添加0、50 、100 和200 mg / kg 的酵母一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖，研究酵母一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖对哺乳仔猪生长性能和免疫机能的影响。结果表明：哺乳仔

2、猪日粮中添加酵母一1 , 3 / 1 , 6 - 葡聚糖，对生产性能无显著影响，有降低仔猪腹泻率和死亡率的趋势；可显著提高外周血淋巴细胞转化率，血清IgA 、IgG 和IgM 浓度（p < 0.05 ) ，有提高血清溶菌酶活性的趋势。综合全期生长性能和免疫调节效果来看，哺乳仔猪日粮中一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖适宜的添加剂量为50mg / kg 。关键词：畜牧学；一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖；生长性能；免疫反应；哺乳仔猪中图分类号58285 文献标识码：A 文章编号：0258 一7033 ( 2 006 ) 21 一0019 一04 在养猪生产中，最主要的问题之一就是

3、高的死亡率，特别是在新生仔猪和断奶仔猪。仔猪免疫功能低下是造成其对病原微生物易感性升高，体增重速度下降、生长发育迟缓、发病率和死亡率升高的主要原因之一l o 目前用于控制病原微生物感染的主要措施是疫苗免疫接种和抗菌药物预防。弱毒疫苗存在散毒现象，而抗生素作为动物性饲料添加剂，在减少和控制动物细菌病的发生，促进动物生长的同时，也带来了诸多问题如耐药性、兽药残留、畜产品安全、环境污染等。为了减少这些问题的发生，确保动物健康，一些措施被考虑如加强生物安全体系建设、为动物提供相对卫生干净、适宜的饲养环境，同时确保动物福利等。近几年的研究也表明，应用动物、植物或微生物提取的生物性免疫调节剂、对动物免疫机

4、能进行调节被认为是一种很有效的方法，通过这种方法可以增强动物的非特异性抵抗力和抗应激的能力，降低动物对疾病的易感性：免疫调节剂-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖是一种结构复杂的葡萄糖多聚复合物，它普遍存在于细菌、真菌、海藻、酵母和植物细胞壁中，可利用酸碱法从中提取具有免疫调节活性的一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖：已有大量的研究表明一1 , 3 / l , 6 一葡聚糖具有免疫调节作用1,4 、免疫佐剂作用5目前，一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖在猪方面研究不多：本试验主要目的是研究一1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖对哺乳仔猪生长性能和免疫机能的影响，探讨其在哺乳仔猪饲料中

5、应用的效果和可行性1 材料和方法1 . 1 试验材料酵母-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖由中国农业大学动物营养实验室提取，分子量为80ku 1 . 2 试验动物与分组试验在河北唐山大北农种猪场内进行。试验选择胎次为4 一6 胎，分娩期相差3 天左右的长x 大二母猪20 头，分成4 个处理组，每个处理组5 个重复，每个重复1 头母猪，各处理组哺乳母猪饲喂相同的日粮，各处理组试验仔猪以窝为单位，每窝为一个重复小组，从5 日龄起人工诱食补料，7 日龄试验正式开始，试验至28 日龄断奶结束，各处理组哺乳仔猪日粮中分别连续添加O 、50 、100 、200 mg/kg 的-1 . 3 / l ,

6、6 一葡聚糖。1 . 3 试验饲粮 试验仔猪的基础日粮按照NRC ( 1998 ) 配制，具体配方见表1 ，各试验组日粮在基础日粮中分别添加0、50 、100 和200mg/kg 的-1 . 3 / 1 , 6 一葡聚糖,粉状饲料。1 . 4 饲养管理 试验在开放式的产房内进行，母猪和试验仔猪均高床饲养，1 个母猪1 个产栏，各重复小组的母猪和相应的试验仔猪均饲养于同一个产栏内新生仔猪在分娩后的24h 内打耳号、剪牙、断尾、断脐、然后称重、淘汰弱仔和将体重不足800 g 的仔猪，寄养给非试验母猪小公猪在7 日龄去势产房温度和保育箱温度严格按饲养管理要求进行试验仔猪统一从5 日龄开始用湿拌料人工

7、诱食，28 日龄断奶，试验结束试验仔猪采用自由采食和乳头式自动饮水器饮水试验仔猪在试验期间若有腹泻，应给于治疗按猪场常规管理程序和免疫程序进行管理、免疫和驱虫。表1 哺乳猪试验基础日粮配方及营养水平（风干基础）日粮组成/% 含量营养水平含量玉米 48.3消化能/(MJ.kg-1)13.60豆粕12粗蛋白/%19.50膨化大豆15钙/%0.88进口鱼粉6总磷/%0.73乳清粉10赖氨酸/%1.53酸化剂0.5蛋氨酸/%0.35赖氨酸0.2脂肪粉44%预混料4合计100注：4%预混料为每千克含：维生素A 300KIU ，维生素D356KIU ，维生素E 800 lu ，维生素K365g 维生素B1

8、 71mg维生素B2331mg维生素B681mg维生素B121mg烟酸1175mg. 泛酸900mg 叶酸32mg生物素l . 3mg氯化胆碱6g 铁5g 铜6.3g锌5.5g锰1 . 9g,20mg硒15mg钻25mg 钙135-225g磷57g 。预混料中还含有植酸酶10 的氨基苯砷酸2500mg 10 的硫酸粘杆菌素预混剂5000mg , 5 的喹乙醇25000mg ； 粗蛋白、钙和磷均为计算值1 . 5 样品采集、测定项目与方法1 . 5 . 1 生产性能的统计 各重复小组试验仔猪称出生重和28 日龄断奶个体重，计算平均日增重，统计产后5 日龄至28 日龄期间的腹泻发生率和死亡率。1

9、. 5.2 样本的收集在试验仔猪28 日龄早空腹前，每个重复小组随机选择1 头，前腔静脉无菌采血8 mL ，分成两份，一份制成肝素抗凝血，采用MTT法测定外周血淋巴细胞转化率；剩余的血液注入灭菌的10 mL 离心管，离心收集血清分装，一20 冻存。采用光学法测定血清溶菌酶含量，采用猪免疫球蛋白双抗体夹心ELIsA 试剂盒测定血清中的免疫球蛋白IgG 、IgA 、IgM 的含量。1 . 6 数据统计分析试验数据采用SPSS10 . 0 的GLM分析。然后采用one 一Way ANOVA 进行统计，对-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖的处理效应进行回归分析.2 结果与分析2 . 1 生产性能由

10、表2 可知，随着哺乳仔猪日粮中酵母-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖添加量的增加，28 日龄断奶体重，断奶前日增重，O 一28 日龄期间的腹泻频率和死亡率，经回归分析，均无显著差异（P0 . 05 ) ，但添加-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖的各剂量组日增重在数值上均有提高的趋势、腹泻率和死亡率在数值上均有降低的趋势。其中50mg/kg 剂量组，相对于对照组，日增重提高9 % ，腹泻率降低53 % ，死亡率降低50 。另外也发现，日粮中-1 , 3 / l , 6 一葡聚糖添加太高，会导致腹泻率升高。因此，综合哺乳仔猪生产性能考虑，在本试验条件下一1 , 3 / l , 6 一葡聚糖

11、以50mg/kg 添加量效果最好。2 . 2 免疫功能由表3 可知，外周血淋巴细胞转化率，血清IgA 、IgM和IgM浓度与-l , 3 / 1 , 6 一葡聚糖的添加量之间存在剂量一效应关系。随着-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖添加量的增加，外周血淋巴细胞在ConA 和LPs 刺激下的转化率，血清IgA、IgG 和IgM 浓度均呈线性提高（P0 . 05 ）。其中200mg/kg 剂量组外周血淋巴细胞对conA 和LPS 的刺激指数、血清IgG 和IgA浓度均极显著高于其他剂量组和对照组（P < 0 . 01 ）。另一方面，研究也发现100mg/kg 剂量组血清溶菌酶浓度显著高于

12、对照组（P0 . 05 ) ，但与其他剂量组无显著差异（P0 . 05 ）。就免疫调节效果而言，日粮中添加200mg/kg1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖较好.表2 日粮添加不同水平一1 3/1 , 6 一葡聚糖对哺乳仔猪日增重、腹泻率和死亡率的影响项目一1 3/1 , 6 一葡聚糖添加剂量/(mg.kg-1)SEMP值050100200线性二次出生仔猪平均体重/g1411139913461338370.8840.83828日龄的平均体重/g6653711166996770960.3370.4980-28日龄平均日增重g. d-118720419119440.4780.504腹泻发生率/%

13、10.444.828.487.760.090.1280.222死亡率/%9.004.567.266.020.080.3080.428表3 日粮添加不同水平价1 刃l ，企葡聚糖对哺乳外周血淋巴细胞转化率、血清溶菌酶和IgA 、IgG 、IgM 的影响项目一1 3/1 , 6 一葡聚糖添加剂量/(mg.kg-1)SEMP值050100200线性二次28日龄刺激指数ConA LPS1.17a1.21a1.26B1.48A0.0370.0050.3431.05a1.13a1.18B1.44A0.0450.0060.502溶菌酶含量3.98b4.85ab5.15a5.07ab0.1970.1250.1

14、15血清IgG/(mg.mL-1)5.54C6.89B6.45B9.72A0.3690.0000.000血清IgA/(mg.mL-1)0.25B0.28B0.29B0.39A0.0150.0000.162血清IgM/(mg.mL-1)3.89b4.53a4.38a4.72a0.0990.0100.233注：同行肩标不同小写字母表示差异显著P0.05 ) ，不同大写字母表示差异极显著P0.01 ）。上表同3 讨论3.1 对生长性能的影响许多资料表明，来自酵母细胞壁的-l , 3 / 1 , 6 一葡聚糖能刺激特异性与非特异性免疫应答，提高猪的生长性能，减少断奶仔猪的腹泻和死亡率。本研究发现，哺乳

15、仔猪日粮中添加庄1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖有提高28 日龄断奶体重、断奶前日增重的趋势，但差异不显著（P > 0 . 05 ) ，这与Hiss等6研究结果基本一致。Shoenherr 等报道，饲喂含有-1 , 3 一葡聚糖饲料的断奶仔猪生长速度加快。Dritz 等报道，口服-1 , 3 一葡聚糖可提高猪的生长速度。究其原因可能与试验所用-1 , 3 / l , 6 一葡聚糖的结构、分子量及其添加剂量不同有关。另一方面，本试验也发现，添加-1,3,/1,66 一葡聚糖有降低腹泻率和死亡率的趋势，但添加剂量太高，易造成腹泻率上升，日增重下降，与前人研究结果基本一到。3 . 2 对非

16、特异性免疫机能的影响机体溶菌酶含量是衡量机体非特异性防御功能的一个指标。本试验发现，哺乳仔猪日粮中添加-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖，有提高其血清溶菌酶的趋势，这与Bagni Krakowski 等的研究结果基本一致。同时也发现100mg/kg剂量组血清溶菌酶浓度显著高于对照组（P0 . 05 ) ，但与其他剂量组无显著差异（P0 . 05 ) ，这说明哺乳仔猪日粮中添加一1 , 3 / 1 , 6 - 葡聚糖，有提高其非特异性免疫反应的趋势。3 . 3 对特异性免疫机能的影响3 . 3 . 1 对淋巴细胞免疫功能的影响淋巴细胞转化试验是体外检测T 、B 淋巴细胞功能的一种方法，是机体

17、细胞免疫功能的重要指标。本试验发现，饲料中添加-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖可显著提高哺乳仔猪外周血淋巴细胞对ConA 和LPS 的刺激指数，同时也发现外周血淋巴细胞对ConA 和LPS 的刺激指数随剂量的增加而提高，其中200mg/kg 剂量组的外周血淋巴细胞对ConA 和L PS的刺激指数，极显著高于其他剂量组和对照组（P0 . 01 ) ，这可能与各处理组哺乳仔猪通过采食获得的l , 3 / 1 , 6 一葡聚糖量不同有关。本试验结果与刘影等 , Kim 等的研究结果基本一致，但与HisS 等的研究结果不一致。HisS 等应用酵母细胞壁成分-1 , 3 / l , 6 一葡聚糖研

18、究了其对断奶仔猪免疫机能的影响，结果表明对淋巴细胞转化指数无显著影响。其中原因可能与试验猪日龄，试验用-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖的结构、分子量与添加剂量不同有关。3 . 3.2 对体液免疫的影响研究免疫调节剂对动物机体血清中各类免疫球蛋白的影响，可直观了解其对动物体液免疫的调节机制。本试验发现，哺乳仔猪日粮中添加-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖，可显著提高血清IgG 浓度，这与Krakowski 等阴的结果基本一致；可显著提高血清IgM 浓度（P < 0 . 05 ) ，与黄洪敏等的结果基本一致；有提高血清I 护浓度的趋势，与抚hne 等11 狱为可显著提高人唾液中I 护浓度的结果基本一致。本试验也发现，200 mg/kg剂量组的血清IgG 和IgA 浓度极显著高于其他剂量组和对照组（P < 0 . 01 ) ，就体液免疫效果而言，200 mg/kg剂量组较好。这说明饲料中添加-1 , 3 / 1 , 6 一葡聚糖可以提高哺乳仔猪的体液免疫水平。在断奶前，仔猪血清