乳与乳制品非常规理化指标检验磷的检测

1、乳与乳制品非常规理化指标检验磷的检测YLNB 5.61. 依据:GB/T5413.22 19972. 原理样品经湿法消化后定容，在硝酸溶液中，磷与钒钼酸铵 生成黄色的络合物(P2Q.V2Q.22MoQ.3H2O),其黄色的深浅 可用比色法比色测定，其测定范围为磷的浓度在2-20ug/ml之间。3. 试剂3.1、硝酸：优级纯。3.2、硫酸：优级纯。3.3、高氯酸：优级纯。3.4、钒钼酸铵试剂：A 液:25g 钼酸铵(NH4)6MoQ4.4H 2O水中,溶于 400ml 水 中。B 液:1.25g 偏钒酸铵(NH4VO)溶于300ml水中，冷却后加 250ml浓硝酸，然后将A液缓缓倾入B液中，不断

2、搅拌，并用水 稀释至1L,贮存在棕色瓶中。3.5、氢氧化钠:6mol/L3.6、二硝基酚指示剂:2g/L.称取0.2g 2,6- 二硝基酚或 2,4二硝基酚C6fOH(NG)2 溶于100mL水中。3.7、磷的标准储备液：50ug/mL称取0.2197g经烘干的磷酸二氢钾（优级纯）,溶于约400ml 水中，加25mLA浓度为12mol/L的硫酸，定容至1L,可长久贮 存.3.8、氢氧化钠：0.1mol/L（作调节颜色用）3.9、硝酸：0.1mol/L（作调节颜色用）4. 仪器4.1分光光度计4.2电热板或可调电炉（带石棉网）5. 方法5.1样品处理，精密称取0.5000g固体样品或2.5g （

3、或mL）液体乳（可 根据磷的含量确定称样量）样品于100mL或150mL三角瓶中， 加入几粒玻璃珠，加10mL浓硝酸（4.1）,然后放在电热板上加 热反应.待剧烈反映结束后取下，冷却，再加入5mL硝酸，5mL 硫酸（4.2 ）和5mL高氯酸（4.3），重新放置在电炉上加热 反应，此时应把温度调低些，若消化液变黑，需取下在加5mL硝酸后继续加热，直到消化液变成无色或淡黄色，在消化液 剩下3-5mL时取下，冷却，定量地移入50mL容量瓶中，冷却后用水定容至刻度，为待测液，同时作空白实验。5.2样品测定；精确吸取样液10 mL （含磷0.2-0.75mg ）加少量水，加 2滴二硝基酚指示剂（7）,用

4、氢氧化钠（6）调至微黄色，再 分别加入lO.OOmL钒钼酸铵试剂（混合后的 B液），冷却， 加水待冷却后用水定容。在 25-30 C下显色15min。5. 3标准曲线的绘制：5.3.1 精确吸取磷的标准储备液 0, 2.5 , 7.5 , 10, 15, 20 ml分别放入50ml容量瓶中，磷的浓度分别为0,2.5, 7.5 ,10, 15, 20ug/ml（也可以将磷的浓度在曲线内设的点适当增加，如 1, 1.5 , 2, 3, 4, 12.5 , 20, 25ug/ml）5.3.2 分别加少量水后，加2滴二硝基酚指示剂，用6mol/l氢氧化钠调至微黄色，再分别加入10.00ml钒钼酸铵试剂

5、，定容。在25 30° C下显色15分钟。5.3.3 用1cm比色皿，波长440nm,在分光光度计上测定吸 光值，以吸光值为纵坐标，磷含量为横坐标绘制标准曲线或计算回归方程。6. 结果计算磷的含量（mg/100g）= C V A卩。m“000c:从标准曲线上查的比色液的浓度，ug/ml;A:样液的稀释倍数；V:样液定容体积；50 mLm:样品的质量，g允许差：同一样品两次测定值之差不超过两次测定平均值的5%7. 注意事项7.1样品处理必须采用湿法处理，可采用HNO H 2SO4-HCLO4和HNO-HCLO4,两种方法，但都必须在通风橱中进 行.7.2实验时要注意安全。硝酸和高氯酸加入的量不能太多，测定液体样品时要在水上蒸干