实验四酵母菌和霉菌的形态观察

1、实验四 酵母菌和霉菌的形态观察一、目的要求1、观察酵母菌、老菌的个全形态以及它们之间的区别。2、学会用水浸法观察酵母菌和霉菌的技术。3、了解酵母菌和霉菌细胞的构造和繁殖方式的特点。二、实验材料1、接种针、接种杯、酒精杯、载玻片、盖玻片、吸管。2、0.1%美蓝液、乳酸 - 石炭酸液（配方见附录） 。3、菌种 啤酒酵母、假丝酵母、黑根霉、毛霉、青霉、木霉、 曲霉。三、方法步骤（一）酵母菌的形态观察酵终菌是单细胞真核核微生物， 细胞核和细胞质有明显分化， 个 体比细菌大得多，有的能形成假菌丝。繁殖方式较复杂，无性繁殖以 出芽生殖为主，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。1、酵母菌的形态与出芽生殖的观察在

2、载片上滴一滴蒸馏水，以无菌操作， 用接种环挑取少许啤酒酵母置于载片上蒸馏水中， 取一 块盖片，小心地将盖玻片一端与菌液接触， 然后缓慢地将盖玻片放下； 这样可避免产生气泡。 先用低倍镜观察， 再用高倍镜观察酵母细胞的 形状、大小、构造、内含物及出芽方式。2、子囊孢子的观察将啤酒酵母接种于麦芽汁液体培养中，于28-30 C培养24小时，连续传代3-4次，最后转接到培养子囊孢子的 培养基上（也可用肉法蛋白胨培养基）。25-28 C培养3天左右，涂片 染色（按芽孢染色法）观察子囊孢子开关和特点，并注意每一个子囊 内的孢子数等。3、假丝酵母观察 用划线法将假丝酵母接种在麦芽汁平板上。 在划线部分加盖玻

3、于25-30 C培养3天先观察菌落边缘，再取下盖玻 片，在显微镜下观察呈树枝状分枝的假菌丝细胞的形状， 或将皿盖打 开，直接将培养皿放在载物台上，在低倍镜下观察。4、酵母菌菌落观察 取啤酒酵母、假丝酵母、园酵母以三点点 植法接种于麦芽汁平板上，于28-30 C坟3天。观察菌落表面、高度、 边缘、质地和颜色等。5、酵母菌死活的检查 在载片上加一滴 0.1%美蓝，把酵母培养 液滴加在美蓝液上，加盖玻片观察，死细胞为兰色，活细胞无色。（二）霉菌形态观察霉菌形态比细菌、 酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体 和分化的繁殖器官。 在观察时要注意细胞的大小， 菌丝构造和繁殖方 式。菌丝体有无隔膜，营养

4、菌丝有无假根，无性孢子是怎样着生在孢 子梗上及有性孢子如何生成。由于霉菌菌丝较粗大， 孢子很容易飞出， 如果放在水中观察时容 易收缩变形，所以在制标本时不用水，而用乳酸 -石炭酸溶液，使细 胞不致变形，并有杀菌作用。1、取培养有青老、木霉、毛霉、曲霉的平皿，挑取一团菌丝， 置于滴有一滴乳酸 -石炭酸液的载片上，加盖玻片，由于霉菌是由菌 丝组成的， 许多菌丝交错在一起形成菌丝体。 在高倍镜下观察菌丝分 隔情况，分成孢子着生情况（要求辨认分生孢子子梗、顶囊、小梗及分生孢子）2、取一培养有根霉的平皿观察假根、匍匐枝、孢子囊柄及孢子 囊。注意假根着生情况。挑取少量菌丝，置于滴有一滴乳酸- 石炭酸液的载玻上， 加盖片。在高倍镜下观察孢子囊柄， 孢子囊及子囊孢子。3、取一培养好的各种老菌菌落的平皿，注意观察菌落形态，表 面质地，颜色及背面的特征。注意霉菌菌落与细菌、酵母菌落有何区 别？4、观察红曲霉的子囊果、子囊及子囊孢子（示范） 。5、观察犁头霉的结合孢子、保护丝（示范） 。6、观察白地霉的裂生