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1、实验四斐林试剂法测定果品时间:2021.03. 12创作:蔬菜中还原糖含量一、实验目的:掌握园艺产品屮糖的测定方法。二、实验原理利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)屮的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定。非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。斐林试剂屮酒石酸钾钠铜是一种氧化剂, 反应的终点可 用 次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。三、试剂与材料1、斐林试剂甲:69. 3g CuSOu 5f0加水溶解并定容至 1000ml ;乙:346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml;2、1%次甲基
2、蓝,lg次甲基蓝加水溶解并定容至100ml,棕色瓶保存;3、0.2%标准葡萄糖, 2glO5°C 烘干到恒重的葡萄糖加水 定 容到 1000ml;4、碱式滴定管;5、电炉, 各种玻璃器皿。四、操作方法1、斐林试剂标定 取甲液 5ml 加入 5ml 乙液中,置于 250ml 三角瓶中,加 入水 10ml, 从滴定管中加入 0.2%的标准葡萄糖若干毫升 (约 23ml) o (量 控制在后滴定时消耗葡萄糖在 0.5 1. 0ml) o电炉上加热至沸, 并保持微沸 2分钟,加 2滴 1%次甲基 蓝 溶液,趁沸以每两秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶 液,用 0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消
3、失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。记录耗用的葡萄糖量为 Vo, 必须在 lmin 内完成。(注意: 还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化, 恢复成 原 来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并 且避 免滴定时间过长。)2、样品滴定预备试验 同上法取斐林试剂,加 10ml 样品液,摇匀于电炉上加 热 至沸,保持微沸 2分钟,加 2滴 1%次甲基蓝,用 0.2%葡 欧阳文 创编萄糖滴定至蓝色消失。记录耗用的葡萄糖量为叽。3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(Vo-Vx)ml水,并从滴定管中预先加入 (VL|)ml 0.2%葡萄 糖,摇匀至电炉上加热至沸,保持 2min微沸,加入2滴1%次 甲基蓝,继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。五、结果计算还原糖含量(以葡萄糖计)(g/ml)-( Vo- V)X0. 002XI/10Xn式中:Vo 斐林试剂标定值,mlV 样品糖液测定值,ml0. 002 标准葡萄糖溶液浓度,g/ml10样品糖液体积,ml六、思考樓丿样品稀释
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