药物分析第3章-药物的杂质检查ppt课件

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查根本要求根本要求 一、掌握普通杂质检查的原理、方法和计一、掌握普通杂质检查的原理、方法和计算。算。 二、熟习特殊杂质检查的方法和原理。二、熟习特殊杂质检查的方法和原理。 三、了解热分析在药物分析中的运用。三、了解热分析在药物分析中的运用。一、药物的纯度要求一、药物的纯度要求1 1药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯真程度。真程度。2. 2. 药物纯度的要求是不断提高：药物纯度的要求是不断提高： 例如：度冷丁例如：度冷丁19481948年收入年收入BPBP，19701970年经年经GCGC分分别鉴定出两种别鉴定出两

2、种 无效异构体无效异构体和和，有时高，有时高达达20%20%30%30%。 再如：再如：ASAASA中除了中除了SASA外，还存在乙酰水酸酐、外，还存在乙酰水酸酐、乙酰水杨酰水乙酰水杨酰水 杨酸等杨酸等SASA的衍生物，具有致敏作用。的衍生物，具有致敏作用。 第一节第一节 概述概述 3 3药物纯度的评价：药物纯度的评价： 应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等 作为一个有联络的整体来评价药物的纯度。作为一个有联络的整体来评价药物的纯度。二、杂质的来源与种类二、杂质的来源与种类 了解药物中的杂质的来源和种类，可制定出检查的工了解药物中的杂质的

3、来源和种类，可制定出检查的工程和方法程和方法杂质的概念杂质的概念 药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳 定性，甚至对人体安康有害的物质，称为药物的杂质。定性，甚至对人体安康有害的物质，称为药物的杂质。 一杂质的来源一杂质的来源 有两个方面：一是在消费过程中引入；二是在贮藏过程有两个方面：一是在消费过程中引入；二是在贮藏过程中引入。中引入。 1. 1. 消费过程中引入的杂质消费过程中引入的杂质 主要指药物在合成过程中，未反响的原料、中间体和副产物主要指药物在合成过程中，未反响的原料、中间体和副产物例如：药用例如：药用NaClNaCl的的Br-Br-

4、、I-I-、SO42-SO42-、K+K+、Ca2+Ca2+、Mg2+Mg2+、Fe3+Fe3+ ASA ASA中的中的SASA；地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱；地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱再如制剂中生成的杂质：再如制剂中生成的杂质：ASAASA片、栓剂中片、栓剂中SASA的检查；盐酸普鲁的检查；盐酸普鲁 卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨 基乙醇的检查。基乙醇的检查。 消费过程中残留有机溶剂、酸性或碱性杂质的检查。消费过程中残留有机溶剂、酸性或碱性杂质的检查。 药物中无效、低效异构体或晶型的检查药物中无效、低效异构体或晶型的检查 例如：无味氯霉素存在例

5、如：无味氯霉素存在A A、B B晶型，其中晶型，其中B B为有效，为有效，A A为低效。为低效。 苯甲咪唑有苯甲咪唑有A A，B B，C C三种晶型；三种晶型；20%20%；40%40%60%60%；90% 90% 2. 2.贮藏过程引入的杂质贮藏过程引入的杂质 主要指外界条件的变化或微生物的作用能够发生的水解、氧化、主要指外界条件的变化或微生物的作用能够发生的水解、氧化、 异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生的有关杂质。异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生的有关杂质。 如：如：ASAASA水解生成水解生成SASA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸；和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸； 麻

6、醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。二杂质的种类与分类二杂质的种类与分类 按杂质的来源分为普通杂质和特殊杂质；按性质按杂质的来源分为普通杂质和特殊杂质；按性质可分为信可分为信 号杂质和有害杂质。普通杂质是指在自然界中分布较号杂质和有害杂质。普通杂质是指在自然界中分布较广泛，在广泛，在 多种药物的消费和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊多种药物的消费和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质是指杂质是指 在个别药物的消费和贮藏过程中容易引入的杂质。信在个别药物的消费和贮藏过程中容易引入的杂质。信号杂质一号杂质一 般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度程度，般无害，但其含量

7、的多少可以反映出药物的纯度程度，氯化物、氯化物、 硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质，如重金属、砷硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质，如重金属、砷盐、氰化盐、氰化 物等，对人体有害，在药品规范中必需严厉控制。物等，对人体有害，在药品规范中必需严厉控制。 三、杂质的限量检查三、杂质的限量检查 1 1杂质限量的概念杂质限量的概念 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常 用百分之几或百万分之几用百分之几或百万分之几ppmppm来表示。来表示。 2 2杂质限量的计算杂质限量的计算 杂质限量的计算公式：杂质限量的计算公式： 杂质限量杂质限量 = = 杂质

8、的最大允许量杂质的最大允许量供试品的量供试品的量100%100% = = 规范液浓度规范液浓度体积体积供试品的量供试品的量100%100% L L% % = C = CV/SV/S100%100% 例例1 1对乙酰基酚中的氯化物的检查：对乙酰基酚中的氯化物的检查： 知：知：S = 2.0gS = 2.0g25/10025/100；C = 10g/mlC = 10g/ml；V = 5.0mlV = 5.0ml 求：求： L = L = ？ 解：解： L = C L = CV/SV/S100%100% = 10 = 105.0/2.05.0/2.010610625/10025/100100% =

9、0.01% 100% = 0.01% 例例2 2葡萄糖中重金属的检查：葡萄糖中重金属的检查： 知：知：S = 4.0gS = 4.0g；C = 10g/mlC = 10g/ml；L = 5L = 510-610-6 求：求： V = V = ？ 解：解：V = LV = LS / C = 5S / C = 510-610-64.0/104.0/1010-6 = 2.0(ml)10-6 = 2.0(ml) 例例3 3葡萄糖中砷盐的检查：葡萄糖中砷盐的检查： 知：知：V = 2.0mlV = 2.0ml；C = 1g/mlC = 1g/ml；L = 0.0004%L = 0.0004% 求：求：

10、S = S = ？ 解：解： S = C S = CV / L = 1V / L = 110-610-62.0/42.0/410-6 = 0.5( g )10-6 = 0.5( g ) 例例4 4磷酸可待因中吗啡的检查：磷酸可待因中吗啡的检查： 知：知：V = 5.0mlV = 5.0ml；C = 0.02 mg/mlC = 0.02 mg/ml；S = 0.1gS = 0.1g 求：求： L = L = ？ 解：解： L = C L = CV / S = 5.0V / S = 5.00.02/0.10.02/0.11000 1000 100%100% = 0.1% = 0.1% 留意点留意点

11、 单位一致单位一致 稀释倍数稀释倍数 表示方法表示方法% %，mmpmmp第二节第二节 普通杂质的检查方法普通杂质的检查方法 一、氯化物的检查一、氯化物的检查 1 1原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，银试液作用， 生成氯化银的白色浑浊液，与一定量生成氯化银的白色浑浊液，与一定量规范氯化钠溶规范氯化钠溶 液在一样条件下生成的氯化银混浊液液在一样条件下生成的氯化银混浊液比较，以判别比较，以判别 供试品中氯化物能否超越限量。供试品中氯化物能否超越限量。 Cl- + Ag+ AgCl Cl- + Ag+ AgCl 2 2条件：条件： Cl- 0.0

12、5mg Cl- 0.05mg0.08mg/50ml, 0.08mg/50ml, 即相即相当于规范当于规范 氯化钠溶液氯化钠溶液5ml5ml8ml8ml。 酸度酸度 稀硝酸稀硝酸10ml/50ml10ml/50ml。 温度温度 30 304040 3 3干扰的排除干扰的排除 1 1供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中氯化物供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中氯化物 后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。 2 2供试品有色：供试品有色： 可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处置。可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处置。供试品供试品+ AgNO

13、3放置放置10min10min廓清溶液廓清溶液+ +规范规范NaClNaCl+ +水水对照溶液对照溶液供试品供试品+ AgNO3+ +水水供试品溶液供试品溶液暗处放置暗处放置5min5min后比后比较较。二、硫酸盐检查法。二、硫酸盐检查法 1 1原理原理 是利用是利用SO42-SO42-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用， 生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量规范硫酸钾溶液生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量规范硫酸钾溶液 在一样条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判别供试在一样条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判别供试 品中硫酸盐能否超越限量。品中硫酸盐能否超越限量。 2

14、2条件：条件： SO42- 0.1mg SO42- 0.1mg0.5mg/50ml, 0.5mg/50ml, 即相当于规范即相当于规范 硫酸钾溶液硫酸钾溶液1 15ml5ml。 酸酸 度度 稀盐酸稀盐酸2ml/50ml2ml/50ml。 3 3干扰的排除干扰的排除 供试品有色：可采用内消色法。供试品有色：可采用内消色法。 三、铁盐检查法三、铁盐检查法 一硫氰酸盐法一硫氰酸盐法 1 1原理原理 Fe3+ + 6SCN- Fe(SCN)6-3- Fe3+ + 6SCN- Fe(SCN)6-3- 红色红色 2 2条件：条件：Fe3+ 0.01mgFe3+ 0.01mg0.05mg/50ml, 0.0

15、5mg/50ml, 即相当于规范铁即相当于规范铁 溶液溶液1 15ml5ml。 酸酸 度度 稀盐酸稀盐酸4ml/50ml4ml/50ml。 HCl 3 3干扰的排除干扰的排除 1 1 当有当有Fe2+Fe2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+Fe2+成成Fe3+Fe3+。 2 2当供试液管与对照溶液管颜色不一致，或所呈硫氰酸铁的当供试液管与对照溶液管颜色不一致，或所呈硫氰酸铁的 颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇 或异戊醇提取，分别取提取液比色。或异戊醇提取，分别取提取液比色。 (二巯基醋酸法二巯基

16、醋酸法 1. 原理原理 巯基醋酸复原巯基醋酸复原Fe3+为为Fe2+，在氨碱性试液中，在氨碱性试液中与与Fe 2 + 作用生成红色配位离子。作用生成红色配位离子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + H+ Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2- + 2H2O 2OH- 2. 2. 阐明阐明 在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与铁离铁离 构成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化构成配位离子，以

17、免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉铁沉 淀。此法灵敏度比较高，但试剂较贵淀。此法灵敏度比较高，但试剂较贵四、重金属检查法四、重金属检查法 重金属是指在实验室条件下与重金属是指在实验室条件下与S2-S2-作用显色的金属杂作用显色的金属杂 质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品 消费过程中遇到铅的时机比较多，铅在体内友易积存中消费过程中遇到铅的时机比较多，铅在体内友易积存中 毒，故检查时以铅作为代表。毒，故检查时以铅作为代表。 中国药典中国药典20002000年版重金属的检查法一共收载了年版重金属的检查法一共收载了四种方法四种方法 第一法为硫代

18、乙酰胺法；第二法是将供试品在第一法为硫代乙酰胺法；第二法是将供试品在500600500600在在500500炽灼破坏后，再按第一法检查；第三法是检查能溶入碱溶液，而不炽灼破坏后，再按第一法检查；第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用硫化钠作显色剂；第四法为微溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用硫化钠作显色剂；第四法为微孔滤膜法，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判别供试种类孔滤膜法，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判别供试种类的重金属能否超越限量。重点讨论第一法。的重金属能否超越限量。重点讨论第一法。 1 1原理原理 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 +

19、 H2S CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S 合格合格 H2S + Pb2+ PbS + 2H+ H2S + Pb2+ PbS + 2H+ 2 2条件：条件： Pb2+ Pb2+10g10g20g/27ml,20g/27ml,相当于规范铅溶液相当于规范铅溶液1 12ml2ml。 酸酸 度度 pH 3.0 pH 3.03.5. 3.5. 合格合格 pH3.53 3干扰的排除干扰的排除 (1) (1) 供试品有色：可采用外消色法消除干扰。供试品有色：可采用外消色法消除干扰。 (2) (2) 供试品有微量供试品有微量Fe3+:Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析在弱酸性溶液中

20、氧化硫化氢析 出硫，产生混浊影响比色，可出硫，产生混浊影响比色，可 加加VcVc或盐酸羟胺使或盐酸羟胺使Fe3+Fe3+氧化成氧化成 Fe2+ Fe2+离子再检查。离子再检查。 五、砷盐检查法五、砷盐检查法 采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法法Ag-DDCAg-DDC检查药物中的微量的砷盐。检查药物中的微量的砷盐。 一古蔡法一古蔡法Gutzeit) (BPGutzeit) (BP也采用此法也采用此法 1. 1. 原理原理 As3+ + 3Zn + 3H+ 3Zn+ As3+ + 3Zn + 3H+ 3Zn+ +AsH3 +AsH3 AsO33- + 3Zn

21、+ 9H+ AsO33- + 3Zn + 9H+ 3Zn+ + 3H2O + AsH33Zn+ + 3H2O + AsH3 AsO43- + 4Zn + 11H+ AsO43- + 4Zn + 11H+ 4Zn+ + 4H2O + AsH34Zn+ + 4H2O + AsH3 AsH3 + 3HgBr2 AsH3 + 3HgBr2 3HBr + As(HgBr)3 (3HBr + As(HgBr)3 (棕色棕色) ) 2As(HgBr)3 + AsH3 3 2As(HgBr)3 + AsH3 3 AsH(HgBr)2 (AsH(HgBr)2 (黄色黄色) ) As(HgBr)3 + AsH3

22、As(HgBr)3 + AsH3 3HBr + As2Hg3 (3HBr + As2Hg3 (棕黑色棕黑色) ) 2. 安装与试剂作用安装与试剂作用 (1) 验砷仪验砷仪 砷化氢发生瓶砷化氢发生瓶;中空磨口塞中空磨口塞;导气管导气管 (2) 试剂的作用试剂的作用 合格合格 KI-SnCl2的作用：交替复原作用；首先将的作用：交替复原作用；首先将AsO43-还还 原成原成AsO33-，生成的碘再被复原成碘离子。，生成的碘再被复原成碘离子。 AsO43- + 2I- +2H+ AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ H2O I2 +

23、Sn2+ 2I- + Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI42- Zn Zn粒与氯化亚锡作用，在其面上构成粒与氯化亚锡作用，在其面上构成Zn-SnZn-Sn齐，起齐，起 去极化作用。去极化作用。 Pb(AC)2 Pb(AC)2棉的作用是消除供试品能够含有的少量的硫棉的作用是消除供试品能够含有的少量的硫 化物。化物。 S2- + 2H+ H2S S2- + 2H+ H2S H2S + HgBr2 2HBr + HgS H2S + HgBr2 2HBr + HgS 汞斑汞斑 H2S + Pb(AC)2 PbS + 2HAC H2S + Pb(AC)2 PbS + 2HAC 3. 干扰的排除干扰的

24、排除 1供试品为供试品为S2-,SO32-, S2O32-等等: 因在酸中生成因在酸中生成H2S,SO2,与与 HgBr作用生成作用生成HgS或或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫 酸盐可消除。酸盐可消除。 2供试品为供试品为Fe3+ 能耗费能耗费KI，SnCl2 应测定条件，先可加应测定条件，先可加足足 量量KI。 3含锑药物含锑药物 锑盐被复原为锑盐被复原为SbH3与与HgBr2试纸作用，产生灰色试纸作用，产生灰色 锑斑，干扰砷斑的检查，可改用锑斑，干扰砷斑的检查，可改用Betterdorff法。法。二二Ag-DDCAg-DDC法法( (二乙基二硫代氨基甲酸银

25、，二乙基二硫代氨基甲酸银，USPUSP采用此法采用此法) ) 1. 1.原理：是利用砷化氢与原理：是利用砷化氢与Ag-DDCAg-DDC吡啶溶液作用，吡啶溶液作用，使使Ag-DDCAg-DDC中的中的 银复原为红色胶态银，以银复原为红色胶态银，以Ag-DDCAg-DDC溶液为溶液为空白，于空白，于510nm510nm 的波优点，测定吸收度，供试品溶液的的波优点，测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大吸收度不得大 于规范砷溶液的吸收度。于规范砷溶液的吸收度。 2. 2.试剂的作用：同古蔡法。试剂的作用：同古蔡法。六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法 溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国

26、药典溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典 20002000年版收载有三种方法：年版收载有三种方法： K2Cr2O7 K2Cr2O7 黄、绿黄、绿 1. 1. 规范比色液进展比较的方法规范比色液进展比较的方法 规范比色液规范比色液 CoCl2 CoCl2 橙黄橙黄, ,橙橙红红 2. 2. 分光光度法分光光度法 CuSO4 CuSO4 棕红棕红 3. 3. 色差计法色差计法 经过测定供试品与规范比色液或水之间的色差值经过测定供试品与规范比色液或水之间的色差值七、易炭化物检查法七、易炭化物检查法 是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微

27、量有机杂质。这类杂质多数构造未知，常采用与规范量有机杂质。这类杂质多数构造未知，常采用与规范 比色液比色的方法进展检查。比色液比色的方法进展检查。(规范比色液为规范比色液为CoCl2, K2Cr2O7, CuSO4) 是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊 度标度标准液比浊的方法进展检查。浊准液比浊的方法进展检查。浊 度规范液制备原理：度规范液制备原理： (CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3 HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混浊甲醛腙白色混浊 不同级号浊度规范液不同级号浊度规范液 级 号 0.

28、5 1 2 3 4浊度标准原液（ml） 2.5 5.0 10.0 30.0 50.0水 （ml） 97.5 95.0 90.0 70.0 50.0八、溶液廓清度检查法八、溶液廓清度检查法九、炽灼残渣检查法九、炽灼残渣检查法(residue on ignition) BP称硫酸灰分称硫酸灰分sulphated ash) 是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用 分量方法进展检查。分量方法进展检查。 残渣及坩埚重残渣及坩埚重 坩埚重坩埚重 残渣残渣% = 100% 供试品重供试品重十、枯燥失重检查法十、枯燥失重检查法 主要检查药物中的水分及其他挥发性的物

29、质。主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。常采用分量方法进展检查。常用的方法有四种：常采用分量方法进展检查。常用的方法有四种：一常压恒温枯燥法一常压恒温枯燥法 二枯燥剂枯燥法二枯燥剂枯燥法 三三 减压枯燥法减压枯燥法 热重分析法热重分析法四四 热分析法热分析法thermo analysis) thermo analysis) 差示热分析差示热分析 差示扫描量热法差示扫描量热法 1. 1.热重分析法热重分析法thermogravimetric analysis, TGA)thermogravimetric analysis, TGA) 在程序升温下，丈量物质的质量与温度的关系，研讨物在程序升温

30、下，丈量物质的质量与温度的关系，研讨物质在质在 加热同时失重的情况下，所发生的质的变化，常用于药物稳加热同时失重的情况下，所发生的质的变化，常用于药物稳定定 性的研讨；贵重和易氧化药物的枯燥失重测定。性的研讨；贵重和易氧化药物的枯燥失重测定。( (长春碱长春碱) ) 2. 2.差示热分析差示热分析differentialtherml analysis , differentialtherml analysis , DTA)DTA) 是在程序升温下，丈量被测物质和参比物之间的是在程序升温下，丈量被测物质和参比物之间的温差与温温差与温 度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加度关系的一种技术。

31、参比物是一种惰性物质，在加热过程中热过程中 不发生相变和化学变化。因此温差不发生相变和化学变化。因此温差( (T)T)只与被测物只与被测物质的量质质的量质 变化有关。变化有关。T=0 T=0 被测物未发生吸热或放热反被测物未发生吸热或放热反响响; ;T= - T= - 为为 吸热峰吸热峰; ;T = + T = + 为放热峰为放热峰. . 测药的溶点测药的溶点 DTA DTA在药物分析中运用在药物分析中运用 尖峰为物理变化尖峰为物理变化 药物定性分析药物定性分析 宽峰为化学变化宽峰为化学变化 估测药物的纯度估测药物的纯度 3. 3.差示扫描量热法差示扫描量热法(differential sca

32、nning calorimetry, (differential scanning calorimetry, DSC) DSC) 是在程序升温下，丈量维持样品和参比物的温度一样，系统是在程序升温下，丈量维持样品和参比物的温度一样，系统 所需供应样品随温差变化的能量的一种技术。所需供应样品随温差变化的能量的一种技术。DSCDSC与与DTADTA的不同之的不同之 处是记录方式不同，是记录系统供应的能量，吸热供应能量；放处是记录方式不同，是记录系统供应的能量，吸热供应能量；放 热减少供应的能量。在药物分析中运用与热减少供应的能量。在药物分析中运用与DTADTA一样。一样。DSC-TGDSC-TG常结

33、合常结合 用。用。十一、有机溶剂残留量测定法十一、有机溶剂残留量测定法ChP(2019) 主要检查药物在消费过程中引入的有害的有机溶剂主要检查药物在消费过程中引入的有害的有机溶剂(如苯、氯如苯、氯 仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、二氧六环等。常采用仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、二氧六环等。常采用 气相色谱法方法进展检查。常用的方法有二种：气相色谱法方法进展检查。常用的方法有二种： 直接进样法和直接进样法和 顶空进样法试用于挥发性大的样品测定。顶空进样法试用于挥发性大的样品测定。 色谱系统性实验的要求：色谱系统性实验的要求： (1) N1000;(2) 用内标法测定时，要求用内标法测定

34、时，要求R1.5; (3)外标法测外标法测 定时，待测物的峰面积的定时，待测物的峰面积的RSD10%。残留有机溶剂测定的方法和限量残留有机溶剂测定的方法和限量有机溶剂 柱温（） 内标 物 测定方法 限量（%） 二氧六环 170 吡啶 1 法 0.038吡啶 170 二氧六环 1 法 0.02苯 170 甲苯 1 法或2 法 0.0002甲苯 170 苯 1法或2 法 0.089氯方 140 二氯甲烷 1 法或2 法 0.006二氯甲烷 140 1法或2 法 0.06环氧乙烷 80 2 法 0.001第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法 一、利用药物和杂质在物理性质上的差别一、利用

35、药物和杂质在物理性质上的差别 一臭味及挥发性质的差别一臭味及挥发性质的差别 例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品2.0g,2.0g,直直火加热无火加热无 辛味。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：辛味。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：10ml10ml水浴蒸水浴蒸 干残渣干残渣15mg15mg 二颜色差别二颜色差别 例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品品2.0g2.0g， 加加NaOHNaOH试液试液10ml10ml，加水，加水25ml25ml，与黄色，与黄色3 3号比号比色液比，色液比， 不得更深。不得更深。 三

36、溶解行为的差别三溶解行为的差别 例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯I I和和IIII检查检查 四旋光性质的差别四旋光性质的差别 例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液(50mg/ml)(50mg/ml)- - 0.4 0.4 五对光吸收性质的差别五对光吸收性质的差别 1. 1. 紫外分光光度法：紫外分光光度法： 例如例如: : 地蒽酚中二羟基蒽醌的检查地蒽酚中二羟基蒽醌的检查 再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度 比来控制杂质比来控制杂质; ;纯品苯丙醇纯品苯

37、丙醇A247nm/A258nm= 0.59; A247nm/A258nm= 0.59; 99.5% 99.5% 时时A247nm/A258nm= 0.79;A247nm/A258nm= 0.79; 因此规定供试品因此规定供试品A247nm/A258nm A247nm/A258nm 0.79; 0.79; 即所含苯丙即所含苯丙酮酮 0.5%. 0.5%. 2. 2. 原子吸收分光光度法：原子吸收分光光度法： 是经过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自是经过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素

38、的 含量。含量。 限量检查时：对照品液限量检查时：对照品液 = = 供试品供试品 + + 限量限量- a - a 供试品液供试品液 = - b = - b 符合规定时符合规定时 b b (a-b); b (a-b); b (a-b)(a-b)不合格。不合格。 3 3。红外分光光度法：。红外分光光度法： 主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲苯咪唑中苯咪唑中 A A晶型检查晶型检查 A 晶型 C 晶型 在640cm-1 有强吸收 吸收很弱 在662cm-1 吸收很弱 有强吸收 662cm-1 640cm-1 662cm-1 640cm-1 供试品+10%A晶

39、型 D2 D1 供试品 D2 D1 10% R = D1/D2 R = D1/D2 4. 4.荧光分析法荧光分析法 3,4- 3,4-二去氢利血平二去氢利血平 利血平中氧化产物检查：利血平利血平中氧化产物检查：利血平( (无荧光无荧光) (I)() (I)(黄绿色荧光黄绿色荧光) ) 3,4,5,6- 3,4,5,6-四去氢利血平四去氢利血平 (II)( (II)(蓝色荧光蓝色荧光) ) ( (六六) )吸附或分配性的差别吸附或分配性的差别 1. 1.薄层色谱法薄层色谱法(TLC) (TLC) (1) (1)杂质对照品法杂质对照品法 例如例如: :盐酸左旋咪唑中检查盐酸左旋咪唑中检查 硅胶硅胶

40、G G 2,3- 2,3-二氢二氢-6-6-苯基咪唑苯基咪唑2,1-b2,1-b噻唑盐噻唑盐 苯苯: :甲醇甲醇: :冰冰HACHAC 样品样品 对招品对招品。 (2) (2)高低浓度对比品法高低浓度对比品法 例如例如: :盐酸异丙嗪中有关物质的检查盐酸异丙嗪中有关物质的检查 硅胶硅胶G G 有多个杂质而且构造不清有多个杂质而且构造不清 样品样品10mg/ml;10mg/ml;对照品对照品(1)0.15mg/ml (1)0.15mg/ml 己己烷烷: :丙酮丙酮: :乙胺乙胺 (2)0.05mg/ml (2)0.05mg/ml 样品液样品液 对对(1) (2)(1) (2) 供试液杂质斑点不多

41、于供试液杂质斑点不多于3 3个个; ;杂质斑点与对照杂质斑点与对照(2)(2)的主斑点比的主斑点比 较较, ,不得更深不得更深; ;如有一点超越如有一点超越, ,应不深于对照液应不深于对照液(2)(2)的主斑点的主斑点. . . . . . . 2. 2.纸层析法纸层析法(PC)(PC) 常用于极性大的药物的分别、分析，如地高辛中的常用于极性大的药物的分别、分析，如地高辛中的有关杂质的检查。有关杂质的检查。 3. 3.高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)(HPLC) 1 1峰面积归一化法：峰面积归一化法：L% = Ai /(Ai + AL% = Ai /(Ai + A主主100% 100%

42、 例如：利巴韦林中有关杂质的检查：例如：利巴韦林中有关杂质的检查： 对照品液对照品液(5g/ml)(5g/ml)进样进样10l,10l,调灵敏度，使调灵敏度，使主峰达满主峰达满 量程的量程的20%20%25%25% 样品液样品液(0.4mg/ml)(0.4mg/ml)进样进样10l, 10l, 杂质杂质AiAi(Ai+A(Ai+A主主 的的1.0%1.0% 2 2不加校正因子主成分对照法不加校正因子主成分对照法 对照品液为供试品的稀释液进样测得对照品液为供试品的稀释液进样测得A A主主 供试品液进样测得供试品液进样测得Ai Ai 其其AiAi A A主即为合格主即为合格. . 例如例如: :甲

43、硝唑中甲硝唑中2-2-甲基甲基-5-5-硝基咪唑硝基咪唑: : 对照品液对照品液(0.01mg/ml)(0.01mg/ml)进样进样20l,20l,调灵敏度，使主峰达调灵敏度，使主峰达10%10%30%30% 样品液样品液(0.14mg/ml)(0.14mg/ml)进样进样20l,20l,杂质杂质AiAiA A主的主的1.0%.1.0%. 3 3内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量 对照品对照品+ +内标内标 进样求校正因子进样求校正因子f)=(As/Cs)/(AR/CR)f)=(As/Cs)/(AR/CR) 供试品供试品+ +内标内标 进样求进样求AX

44、.AS,AX.AS,那么杂质浓度那么杂质浓度CX = f CX = f AX/(AS/CS)AX/(AS/CS) 4. 4.气相色谱法气相色谱法(GC)(GC) 主要用于药物中挥发性的杂质检查，其检查方主要用于药物中挥发性的杂质检查，其检查方 法与法与HPLCHPLC法一样。法一样。二、利用药物和杂质在化学性上的差别二、利用药物和杂质在化学性上的差别一酸碱性的差别一酸碱性的差别 1.规定耗费滴定液体积规定耗费滴定液体积 例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：(NaOH 0.02mol/L) 取本品取本品0.20g + 中性乙醇中性乙醇 + 溴麝香草酚蓝

45、溴麝香草酚蓝 微蓝色微蓝色0.50ml 2.pH法法 例如乙琥胺中例如乙琥胺中2-甲基甲基-2-乙基丁二酸检查：乙基丁二酸检查：0.01g/ml pH3.04.5. 3.指示剂法指示剂法 例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得使甲基橙显红使甲基橙显红 色。色。二氧化复原性的差别二氧化复原性的差别 例如：例如：NaClNaCl中中I-I-和和Br-Br-检查检查EOCl/2Cl- =+1.3595V EOCl/2Cl- =+1.3595V EOBr/2Br- EOBr/2Br- =+1.065V =+1.065V EOI/2I- =+0.5345

46、V , EOI/2I- =+0.5345V ,因此因此+NaNO2+H2SO4+NaNO2+H2SO4+淀淀粉显蓝色粉显蓝色 再例如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性再例如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性 绿色化绿色化 合物。因此合物。因此ChP规定：本品规定：本品50mg +4mlH2O+1dI2 + 5ml乙醚乙醚 乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。三杂质与一定试剂反响产生沉淀三杂质与一定试剂反响产生沉淀 例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者+Pb(Ac)2 白色白色 ChP规定：本品规

47、定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2 不得发生混浊，即为合格。不得发生混浊，即为合格。 例二、硝酸毛果芸香碱中其他生物的检查：后者例二、硝酸毛果芸香碱中其他生物的检查：后者+氨水氨水+K2Cr2O7 ChP规定：本品规定：本品0.2g+20mlH2O两份；两份；I份份+数滴氨试液；另数滴氨试液；另 1份份+数滴数滴K2Cr2O7试液试液 ，均，均不得发生混浊。不得发生混浊。四杂质与一定试剂反响产生颜色四杂质与一定试剂反响产生颜色 例一、盐酸普萘洛尔中游离例一、盐酸普萘洛尔中游离-萘酚检查：利用后萘酚检查：利用后者可与重氮盐者可与重氮盐 发生重氮化发生重氮化-巧合反响，生成偶氮染料。巧合反响，生成偶氮染料。 ChP规定：供试品规定：供试品20mg+乙醇与乙醇与10%NaOH液各液各2ml+重氮苯重氮苯 磺酸试液磺酸试液1ml,放置放置3min；如显色，；如显色，与与0.3ml -萘萘 酚对照液酚对照液20g/ml)比较不得更深。比较不得更深。 例二、碘他拉酸中氨基化合物的检查：利用重氮例二、碘他拉酸中氨基化合物的检查：利用重氮化化-巧合反响巧合反响 ChP规定：供试品规定：供