维生素K对肾结石患者尿抑制作用的影响

1、    维生素K对肾结石患者尿抑制作用的影响        摘要为了解维生素K在尿石形成中作用，用超滤法分离正常人和草酸钙肾结石患者尿中大分子物；结合草酸耐受试验，检测肾结石患者应用维生素K前后尿不同分子量物质的草酸耐受量。结果:正常人及肾结石患者尿分子量10 00030 000大分子物草酸耐受量最高;肾结石患者较正常人草酸耐受量低(分别为2.72±0.74ml和3.75±0.35ml,P<0.05);肾结石患者应用维生素K后尿10 00030 00

2、0大分子物草酸耐受量增加(3.19±0.57ml,P<0.05)。提示尿中草酸钙结石抑制物主要为分子量10 00030 000的大分子物，维生素K应用后明显改善肾结石患者尿抑制作用。关键词肾结石维生素KVitamine K and urine inhibitory ability against urolithiasis in patients with nephrolithiasisAn Ruihua,Li Yongqiang,Qi Youcheng,et al.Departemt of Urology,the First Affiliated Hospital of Har

3、bin Medical University,Harbin 150001AbstractVitamine K was instituted to 12 nephrolithiasis patients for one week and urine specimens were collected both before and after the vitamine K institution.The urine specimens were superfiltrated and the inhibitory activity of substances with various molecul

4、ar weight was evaluated with oxalate tolerance test (OTT).The result revealed that the oxalate tolerance was the highest with substance of 10 00030 000 molecular weight in the urine of either normal subjects or in nephrolithiasis patients.The oxalate tolerance was lower in nephrolithiasis patients t

5、han in the normal subjects (P<0.05).Significant increase of oxalate tolerance of urine substances with a molecular weight of 10 00030 000 has been observed when vitamine K was instituted to the nephrolithiasis patients (P<0.05).The above result suggested that the megasubstances with a molecula

6、r weight of 10 00030 000 play the main role in inhibiting the calcium oxalate stones and vitamine K would enhance the urine inhibitory ability against nephrolithiasis.Key wordsKidney calculiVitamine K本课题受卫生部杰出青年人才基金资助作者单位：150001 哈尔滨医科大学临床第一医学院泌尿外科为了观察维生素K对草酸钙肾结石患者尿大分子物抑制作用的影响，我们对草酸钙结石患者应用维生素K，并分离尿中大

7、分子物，采用草酸耐受试验观察维生素K对尿大分子物抑制作用的影响。材料与方法一、临床资料结石组男性肾结石患者15例，经X线，B超检查确诊。有排石史，结石分析为草酸钙,无遗传病家族史、无其他泌尿系统疾病、代谢疾病史。15例健康男性为对照组，无泌尿系结石及其他肾脏疾病史。二、实验方法1.尿样留取及保存：普通饮食条件下收集两组24小时尿液。肾结石患者每日肌肉注射维生素K1 10mg,维生素K3 8mg,1周后收集24小时尿液，4保存。2.尿中大分子物的提取及分离：取尿样120ml,4 000r/min离心10分钟；取上清液100ml；在13MPa条件下，分别以6 000，10 000，30 000，6

8、0 000滤膜截流分子量6 000以下，6 000，10 000,30 000和60 000以上的物质,4保存。三、统计学方法各样本之间草酸耐受量采用t检验。结果正常组及肾结石患者尿中不同分子量物质草酸耐受值见附表。正常人和草酸钙结石患者尿分子量10 00030 000大分子物草酸耐受量均比其他组大分子草酸耐受量高(P<0.05),正常人该组尿大分子草酸耐受量也显著高于草酸钙结石患者(P<0.05)。肾结石患者应用维生素K后草酸耐受量从2.72±0.74ml增加到3.19±0.57ml(P<0.05),但仍低于正常人(P<0.05)。附表正常人及肾结

9、石患者尿大分子物的草酸耐受量(ml)6 0006 00010 00030 00060 000正常组0.37±0.052.58±0.823.72±0.351.26±0.451.30±0.56肾结石组0.35±0.072.56±0.902.72±0.74*1.88±0.841.19±0.29     * P<0.05讨论正常人尿中存在许多抑制结石形成物，Fredric等1用透析方法去除尿中小分子物发现，尿液仍保持大部分的抑制作用，提出尿大分子物是尿中草酸

10、钙结石形成的主要抑制物。Nakagawa等2将大分子物进一步分离纯化,提出在大分子抑制物中,起主要作用的是分子量14 000的酸性糖蛋白-肾钙素。本组结果表明：尿中分子量10 00030 000的物质草酸耐受量均高于尿中其它各组尿分子，说明尿中对草酸钙结晶起主要抑制作用的是分子量10 000-30 000的尿大分子物。推测肾钙素是尿中草酸钙结晶的重要抑制物。本组结果还表明，肾结石患者尿各组分中10 00030 000大分子物比正常人尿中此组分草酸耐受量显著减低。而其它各组分两者差异不显著。提示肾结石患者尿中10 00030 000物质的抑制作用减低与肾结石形成有密切关系。Nakagawa等2在

11、研究肾钙素的抑制作用中发现:肾结石患者肾钙素分子中-羧基谷氨酸(Gla)与正常人肾钙素比较含量较少,认为这可能与其肾钙素抑制作用降低有关。研究证明,当应用维生素K拮抗剂饲养大鼠后,鼠尿肾钙素中-羧基谷氨酸含量降低,说明肾钙素中谷氨酸羧化成-羧基谷氨酸需要维生素K的参与,推测维生素K的绝对或相对减少会导致肾结石患者尿肾钙素-羧基谷氨酸减少,使肾结石患者尿中肾钙素对草酸钙结晶抑制作用降低,易发肾结石。本组应用维生素K予肾结石患者,以达到提高肾结石患者尿肾钙素-羧基谷氨酸量,增强其抑制作用,减少肾结石的发生。研究结果显示:肾结石患者应用维生素K 1周后,其尿中分子量10 00030 000大分子物的

12、草酸耐受量明显增高,说明维生素K确可增加肾结石患者尿对草酸钙结晶的抑制作用。因此,对草酸钙肾结石患者适当补充维生素K对预防肾结石的发生是有益的。本研究还观察到,肾结石患者应用维生素K后,尿中10 00030 000大分子物草酸耐受量比正常人低,分析原因,除可能与用药时间短,肾结石患者尿肾钙素羧化不全有关外,还可能由于肾钙素的谷氨酸羧化非单一维生素K作用3,其它因素如机体内环境和羧化酶的异常等都会影响肾钙素的谷氨酸羧化和抑制作用。因此,肾钙素的抑制作用与其结构的关系及其它影响肾钙素作用的其它因素还需进一步研究。参考文献1Fredric L Coe,Nakagawa Y,Parks JH.Inhibitor within the nephron.Am Kidney Deseases,1991,107407-413.2Nakagawa Y,Mary AA,Susan L.Isolation from human calcium oxalate renal stones of nephrocalcin,a glycoprotein inhibitor of calcium oxalate crystal growth,evidence that Nc from p