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文档简介

1、实验十一 病毒的血清学实验操作：血凝实验血凝抑制实验实验目的实验目的l血凝实验：滴定病毒的血凝效价，采用一定的病毒量，通常采用4个血凝单位。l血凝抑制实验：l 运用规范病毒液测定血清中的相应抗体或运用特异性抗体鉴定新分别的血凝性病毒。 0.2弃掉弃掉孔号12345678910生理盐水（ml）尿囊液（ml）0.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2病毒稀释度1 101 201 401 801 1601 3201 6401 12801 2560对照补充液（ml）各0.2ml鸡红血球细胞悬液（ml）各0.4ml

2、血凝实验血凝效价的滴定)将有机玻璃板孔从110进展编号，从第1孔起至第10孔，每孔加生理盐水0.2ml。将尿囊液按下表进展稀释。自第10孔开场反方向向前每孔补充0.2ml生理盐水。(WHY?)自第10孔开场反方向向前每孔参与0.5%鸡红血球0.4ml，摇匀后放置室温45分钟 0.2弃掉弃掉孔号1234567血清对照病毒对照红细胞对照生理盐水（ml）抗血清（ml）0.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.2+0.20.20.4抗血清稀释度1 101 201 401 801 1601 3201 6404个单位病毒液（ml）各0.2ml0.

3、2ml鸡红血球细胞悬液（ml）各0.4ml血凝抑制实验从第1孔起至第9孔，每孔加生理盐水0.2ml，第10孔加0.4ml。抗血清按下表进展稀释，第8孔为血清对照。于第1孔至第7孔中各参与0.2ml 4个血凝单位的病毒液，第9孔亦参与0.2ml病毒液作病毒对照。稍加震摇后，每孔参与0.5%鸡红细胞0.4ml，室温静置45分钟。血凝实验原理血凝实验原理l血凝素hemagglutinin HA：由病毒基因编码的糖蛋白刺突。与病毒吸附和传入宿主细胞有关。HA能与人或其它动物多种红细胞外表N乙酰神经氨酸酶受体结合引起红细胞凝集。血凝实验结果断定血凝实验结果断定l效价断定：l 凝集特别显著：“l 凝集景象次之：“l 凝集清楚可见：“l 稍显凝集者：“l血凝效价：呈“凝集时的最高稀释度。此时的稀释度即为1个血凝单位。血凝抑制实验原理血凝抑制实验原理l病毒引起的血凝景象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，称血凝抑制。利用血凝素特异性抗体与病毒外表相应的HA相互作用，使病毒血凝景象抑制的实验称血凝抑制实验。血凝原理血凝抑制原理血凝抑制实验结果断定血凝抑制实验结果断定l测定孔 RBC沉于孔底中心，呈纽扣状。(+)l 凝集 -l血清对照孔：RBC沉于孔底，无自凝l病毒对照孔：凝集lRBC对照孔：无自凝l血凝抑制实验效价：呈完全血凝抑制使的最高血清稀释度。 思索问

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