选修1大肠杆菌的培养和分离答案

1、第一部分 微生物的利用实验 1 大肠杆菌的培养和分离1. 如何操作才能尽量避免呗杂菌污染？（ 1） 规范操作，符合灭菌原则：培养基、实验用具等严格灭菌在无菌室，超净工作台上操作，在酒精灯旁操作，手、实验服等（ 2） 减少操作时间（3）控制培养条件：PH温度等2. 在培养后如何判断是否有杂菌污染？1)观察菌落形态、大小等2)鉴别培养基：伊红美兰3)显微观察形态、结构等4)染色观察等3. 进行恒温培养时为什么要将培养皿倒置？防止水蒸气凝结成水滴，从培养皿盖上滴落培养基表面并扩散，导致菌落间 相互影响，不能形成单菌落，达不到实验目的。4. 实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？先高压灭菌后再洗涤，

2、废弃物经高压灭菌后再抛弃。5. 如果分离的是转基因的大肠杆菌，如何保证不被普通的大肠杆菌污染？配置选择培 养基， （如含抗氨苄青霉素的培 养基） ，筛选出转基因工程菌。实验 2 分离以尿素为氮源的微生物1. 为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？琼脂是未被融化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养基上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的而细菌的筛选，故而用 经纯化的琼脂糖而不用琼脂作固化剂。2. 有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水解后的氨使土壤 变成碱性

3、，氨与其他阴离子物质如 SO2-4、CO2-3、NO-3 等形成化合物，则会使 土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体分解，并利用了所形成的 氨，有利于自然界中氮的循环。3. 有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现？ 细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中中的尿素分解，尿素分解后产生氨，氨为 碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境中变为红色。培养基中的酸碱 指示剂产生颜色变化（变红） ，标志着攒脲酶水解尿素的作用，从而证明这 一菌株可以以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量 的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强。4. 与全培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基

4、上只有少数菌落？实验 3 观察土壤中能水解纤维素的微生物1. 本实验为什么不用滤纸，而用卷烟纸？木质素可抑制纤维素酶的活力。卷烟纸通常不含有木质素，因木质素所含的 苯酚类物质对人体有害。当然，质量差的卷烟纸不一定不含木质素。我们用 铝制崩溃法测定纤维素酶活力，也取得了良好的结果，因为化学分析用的无 灰滤纸也不含木质素。滤纸有输送及吸水性好于卷烟纸的优点，更易于被纤 维素酶作用，因此，没有质量好的卷烟纸时，也可用无灰滤纸进行实验。严 格不含木质素的纸，也可防止产生木质素酶的菌的作用，这种作用会影响观 察结果。2. 为什么只有分解纤维素的微生物生长在卷烟纸上？ 严格的说，卷烟纸是只含纤维素而不含其

5、它物质的。纤维素是这种微生物可 利用的碳源和能源。因此，只有能分泌纤维素酶并以纤维素为碳源和能源的 微生物才能生长在卷烟纸上。3. 你认为分解纤维素的微生物通常是细菌、霉菌还是酵母？为什么？ “细菌吃荤，霉菌吃素” ，也就是说，细菌多以蛋白质水解物为它的能源， 而霉菌多以糖或多糖的水解物为能源。因此，分解纤维素的菌通常是霉菌。 酵母通常不含纤维素、淀粉酶等水解酶，只利用单糖或双糖等作为碳源和能 源。4. 含有纤维素酶非得菌种可能有哪些应用价值？ 纤维素的用途在“纤维素酶的用途”一节中已作了叙述。除此之外，纤维素酶 在生态循环中也起重要作用，他可以水解森林中自然淘汰的树枝和砍伐的树桩， 维持生态

6、平衡。实验 8 果酒和果醋的制作1. 葡萄或其它果实上常有天然的野生酵母存在，为什么上述两个实验都要接种 酵母？生产葡萄酒时一般不加蔗糖， ，都只用野生酵母。本实验为了加速反应，使 观察更直观，需要有更多底物（蔗糖）参加反应，所以加入酵母使酒精发酵 占有优势是必须的。否则会有许多霉菌生长，出现异味，影响质量。2. 为什么发酵瓶中的液体不能装满？ 从以葡萄糖为底物发生乙醇发酵的反应式看， 1 个葡萄糖分子经过乙醇发酵 后 要产生 2 分子的 CO2, 因此发酵过程中有气体的产生。如果发酵液装满容 器，则液体将外溢，一则发酵液会损失，二则瓶口等处会被许多杂菌污染， 特别是被霉菌污染，影响产物品质，

7、所以发酵液不能装满。3. 教材图 12 装着水的弯曲玻璃管起什么作用？ 装着水的玻璃管可防止氧气进入。由于厌氧发酵过程中有 CO2 产生，使瓶内 压力加大，CO气体可以从装有水的玻璃管中出去，减小瓶中压力。此外，有 水封闭也起着防止被空气中杂菌污染的作用。4. 制酒时必须保证所有用具都是清洁的，为什么？ 不论是葡萄糖还是其他水果， 对微生物来说都是良好的培养基， 特别是霉菌 空气中有很多霉菌孢子，也有细菌，如果用具不清洁，就等于向果汁接种了 许多杂菌，他们都可以利用糖繁殖菌体。这样，我们饮用的就不是果酒，而 是杂菌的培养液了，轻则会影响我们的口感，重则会影响我们的健康。5. 制醋时为什么要向发

8、酵瓶中通入空气？从乙醇进行醋酸发酵的反应式看， 反应是一个氧化过程， 需要空气中的氧气， 因此要向发酵瓶中通入氧气。6. 为什么空气要用棉花过滤？ 甲瓶中的酒水混合物和乙瓶中的锯末都含有微生物可利用的养分，进入的空气含有大量微生物，经棉花过滤可防止微生物进入。7. 你所得到的丙瓶中的液体就是市售的白醋？为什么？怎样才能得到白醋？ 市售白醋中除醋酸外，还含有丰富的不挥发性酸、糖、酯、醇等物质，这些 物质多为加入的酵母所产生。只有醋酸不能达到口感好、有香气的目的。在 生产中将一部分丙瓶产物加工成成品，另一部分再与甲瓶溶液一起进入乙 瓶，这样可增加口感。最后的成品需要调兑、过滤、化验，再包装成成品，

9、如光华白醋的流出液含 酸可达 9.0%9.5%，而成品中只有 5%，要经过上述过程才能得到市售类型的 白醋。实验 9 腐乳的制作1. 在发酵过程中，你认为有哪些生物化学变化和有什么酶参加？ 在红腐乳的制作过程中，包含了毛酶和红曲霉生长繁殖过程，他们利用 和分解了豆腐和大米中的蛋白质、脂肪和糖类，形成了许多分解的中间 产物。其中，主要的酶是水解酶类，如蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等，产 物有氨基酸、脂肪酸和糖类，也含有核苷酸类。氨基酸与核苷酸可刺激 人的味觉，感到有鲜味。脂肪酸、有机酸和醇类又可形成酯而刺激人的 嗅觉，并有香味。氨基酸、脂肪酸和糖类进一步代谢，会产生一些醛、 酮类化合物，也具有香味。霉

10、菌还可产生许多种维生素。因此我国的腐 乳具有极丰富的营养成分是各种生化产物的宝库。人们经过多年的实践， 证明这些霉菌对人是无害的，腐乳可与西方的乳酪相媲美，比乳酪更营 养。根据已有的资料分析，腐乳含有各种维生素，其中包括胡萝卜素、 维生素Bi、生素B、维生素E、烟，各种微量元素，其中包括钾、钙、钠、 镁、铁、锰、锌、铜、磷和硒等。在发酵过程中，除水解酶外，还有与糖、脂肪、蛋白质和核酸的代谢有 关的其他各种酶类参加。2. 制作过程中哪些因素影响腐乳品质？影响腐乳品质的因素主要有： （ 1）菌种和杂菌。菌种是生产发酵制品的 关键，如果菌种退化则表现出生化功能的变化，如水解速率、代谢产物 等都会发生

11、变化，从而影响品质。如果有杂菌污染，则直接影响产品的 的色香味，会有发霉味和口味不纯等现象。 （ 2）温度。温度影响菌丝的 生长和代谢，如温度低菌丝生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度高， 菌丝易老化和死亡，也影响品质。温度还影响生化反应的速度。 （3）发 酵时间。发酵和各种产物的生长是一个过程，过早终止发酵会影响发酵 产物的生成，从而影响品质。酒在地窖中保存时间越长，酯类越多，越 有醇香味。腐乳也是一样，发酵达到一定时间才能有好的色香味。发酵 时间影响生化反应完成度和生化产物的量。 （ 4）调味品。加入的各种酒 类、糖类等辅料的多少也对口感有重要影响。调味品影响人对生化物质 的味觉和嗅觉。3. 市售腐乳有时口感不好，豆腐较硬，你认为是什么原因造成的？ 腐乳口感不好和豆腐较硬的原因有： （ 1）豆腐块的含水量不当，它影响 毛霉菌丝的深入度。 （2）发酵时间短，蛋白质未被完全水解，在加盐后 豆腐脱水，蛋白质变性，于是变硬。 （ 3）菌种不纯、菌种变异、菌种老 化都会影响产品口感。（4）调味品加入的量不足实验 10 泡菜的腌制和亚硝酸的测定1. 加入白酒起什么作用？ 白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长， 它也是一种调味剂， 可增加醇香感。2. 用水封闭坛口起什么作用？不封闭有什么结果？ 水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用，空气中 21%是氧气， 这是最简易的造成无