士的宁阻断橄榄耳蜗束对豚鼠畸变产物耳声发射的影响

1、士的宁阻断橄榄耳蜗束对豚鼠畸变产物耳声发射的影响李克勇1王直中2倪道风2曹克利2 摘要为探讨豚鼠听觉中枢对畸变产物耳声发射(DPOAE)的影响，利用士的宁阻断听觉系统的传出神经，系统观察了阻断前后DPOAE的变化。结果发现在本实验条件下，所有豚鼠均可引出DPOAE，在同等刺激强度和L1=L2的情况下，低频f0=1 006 Hz的DPOAE强度大，而较高频f0=2 011和f0=4 033的DPOAE强度较小。士的宁阻断橄榄耳蜗束对DPOAE无影响，提示在正常神经张力下中枢不参与、不影响DPOAE的产生和形成。 关键词畸变产物耳声发射士的宁橄榄耳蜗束 The effection of obstr

2、ucting OCB with strychine on the guinea pigs DPOAE Li KeyongWang ZhizhongNi Daofenget al (The First Peoples Hospital,Shanghai 200080) AbstractThe strychine was used to obstruct the oliver cochlear bundle (OCB) in order to explore the effect of the efferent system on distortion product otoacoustic em

3、ission (DPOAE) of guinea pig.The result showed that the DPOAE were not changed after strychine were administrated.It is concluded that the efferent pulses of the CNS does not affect on DPOAE in silent circumstance. Key wordsDistortion product otoacousticemissionStrychineOliver cochlear bundle 自从Kemp

4、 1979年发现畸变产物耳声发射(DPOAE)以来，经过多年努力，已能基本确定DPOAE产生于耳蜗，是一个生物性过程1。但耳蜗核等以上高位中枢是否影响其产生过程，其程度如何，这些问题目前仍远未明了1，2。 橄榄耳蜗束(OCB)是中枢传出到外周耳蜗的通道，它起源于上橄榄核，分交叉(COCB)和不交叉(UCOCB)两部分，跟随位听神经行走。UCOCB终止于内毛细胞底部，支配内毛细胞；COCB止于外毛细胞底部，支配外毛细胞。突触递质为乙酰胆碱。突触后结构上有胆碱酯酶。一般认为，士的宁是它的强大阻断剂2，3。 在本项研究中，我们利用士的宁阻断OCB方法，系统观察处理前后DPOAE的变化，以明确中枢对D

5、POAE的作用和影响。 现将研究方法及结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料来源 听力正常的健康豚鼠13只。性别不限，体重为250400 g，共用20耳。听力检查要求耳廓反射存在，短声诱发的ABR阈30 dB pe SPL，AP阈20 dB pe SPL。若3个条件中有1个条件没达到，则此豚鼠被剔除。豚鼠共分士的宁阻断组和对照组两组。士的宁阻断组共用豚鼠8只12耳。25%乌拉坦溶液中加入-氯醛糖，使后者浓度达5%，混合后按2 ml/kg剂量腹腔注射全身麻醉。切除耳廓，打开骨大泡，气管切开，插管自主呼吸。然后用立体定位仪的头夹将豚鼠头部夹紧固定。记录DP采用丹麦Madsen公司提供的Celes

6、ta 503耳声发射分析仪。 1.2实验方法 动物暴露圆窗在立体定位仪上定位好后将CELESTA 503 OAE分析仪的探头塞入残存外耳道，保存密封。测3组频率的DPOAE(f0=1 006，2 011，4 033Hz，f1/f2=1.2)的输入输出曲线，存盘。然后将士的宁针剂(Strychine)按4 mg/kg剂量3注入豚鼠腹腔再测DP。整个手术、数据采集过程中用100 W台灯加热，维持豚鼠肛温38左右。 对照组再分为两组，1组为时间过程对照组；豚鼠2只(2耳)，若不切耳廓记录较为困难，切除后探头与外耳道封闭严密，DP值稳定，连续记录6 h，以排除时间因素对DP的影响。另1组为士的宁阻断对

7、照组；经听力筛选豚鼠3只(6耳)，除腹腔注射等量生理盐水外，其余处理方法及数据采集均同士的宁阻断组。 2结果 腹腔注射士的宁前，所有豚鼠3个中心频率上都引出DPOAE，输入输出曲线稳定。腹腔注射4 mg/kg的士的宁后，豚鼠在5 min之内出现肌张力增加，轻微刺激(轻触豚鼠)即可引起短暂抽搐，1.53.0 h后肌张力逐渐恢复正常，我们记录数据是在腹腔注药后5 min1 h内。DPOAE的2f1f2无明显变化(P均0.05)，见附表。 附表士的宁阻断OCB前后DP的变化() dB 声强 耳数 f0=1 006 Hz f0=2 011 Hz f0=4 033 Hz 阻断前 阻断后 阻断前 阻断后

8、阻断前 阻断后 60 12 45.28.3 48.111.7 32.55.6 33.53.2 36.56.8 35.87.7 50 12 39.35.9 40.84.1 30.26.5 30.34.6 34.85.4 34.77.4 40 12 27.36.6 29.27.1 27.53.8 25.58.3 22.010.7 20.315.1 30 12 20.87.7 21.56.7 4.33.4 4.69.0 4.08.5 4.67.1 20 12 15.08.3 16.36.1 3.64.9 1.82.1 -0.64.8 1.64.8 10 12 2.34.5 3.04.3 -0.66.

9、2 0.26.4 2.63.8 3.33.0 时间过程对照组豚鼠2只(2耳)，切除耳廓，打开骨大泡后测DPOAE，1 h、2 h、4 h、6 h各测1次，给声50 dB，L1=L2，f0=1 006 Hz。结果稳定，DPOAE波动5 dB。士的宁阻断对照组的3只豚鼠腹腔注射生理盐水0.30.6 ml。DP值无明显改变，其中1只经腹腔注射生理盐水1.53.0 ml亦未发现有明显变化。 3讨论 时间过程对照组的2耳在6 h内DP值波动5.0 dB，说明豚鼠DP产生时间上的稳定性及描记系统的可靠性。另外，在实验过程中利用耳蜗电图对耳蜗功能的监测，排除了操作过程对耳蜗可能造成的创伤。麻醉采用-氯醛糖和

10、乌拉坦，避免了使用巴比妥类可能造成的中枢抑制及中枢阻断的副作用。因此，本实验结果是可靠的。 利用士的宁阻断OCB早有报道，方法也比较成熟简单，对豚鼠创伤较小。因此，我们选此法阻断中枢对外周耳蜗作用。DPOAE没有出现明显的变化，这说明在正常神经张力下中枢对DP没有影响。 有人发现电刺激OCB和对侧耳加噪声都能影响DPOAE3，4，而后者也是通过COCB起作用的。在以上两种情况下，OCB的神经活动大大强于正常安静状态，而在我们的实验条件下，OCB的神经张力是正常的，这可能是造成不同结果的原因之一。参考文献 1Martin GK,Probst R,Lonsbury Martin BL. Otoac

11、oustic emission in human ears:Normative findings.Ear Hear,1990,11:106 2Pickles JO.The cochlea.In: Pickles JO.An introduction to the physiology of hearing. New York:Academic Press,1982.24-26 3Rajan R,Johnstone BM.Efferent effects elicited by electrical stimulation at round window of guinea pig.Hear Res,1983,12:405 4Puel