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1、 多重PCR试剂盒论文：食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用【中文摘要】近年来,食品安全事件频发,不仅影响到人们的生活、工作和健康,更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中,细菌性食物中毒则是食物中毒的主要因素,常见的食源性致病菌包括沙门氏菌属、变形杆菌属、副溶血性弧菌、葡萄球菌及毒素、肉毒梭菌毒素、蜡样芽胞杆菌、韦氏梭菌、弯曲杆菌、李斯特菌、致病性大肠杆菌、结肠炎耶尔森氏菌、志贺氏菌属。本文针对在我国食物中毒中最常见的致病菌进行研究,寻求食物中毒诊断及食品检测的有效方法。本文涉及的食源性致病菌蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、沙门氏(Salmonellaspp)、大肠

2、埃希氏菌0157: H7 (E.coli-0157: H7)、志贺氏菌(Shigella spp)、金黄色葡萄球菌(Sta. aureus)、单增李斯特氏杆菌(Listeria monocy togenes)等菌属或菌。通过大量的文献参考和实验,我们经过筛选挑取种或属间特异的序列及相应引物,然后用这些引物对各种细菌的基因组序列进行PCR扩增检测其特异性,最终决定出用于检测的最优的基因及沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因、志贺氏菌的侵.【英文摘要】The problem of food safety is becoming more awa

3、red and more serious in many countries .Its associated closely with the national development and peoples health and happiness. The immediate and proper treatment to patients who have eaten contaminated food is important as well as the food safty testing before food are sold or eaten by people. Whats

4、 urgent now is how to detect pathogenic bacteria in food and patients. To develop an effective and practical way to detect foodborn pathogens in this study, six s.【关键词】多重PCR试剂盒 食源性致病菌 大肠埃希O157:H7 单增李斯特菌 志贺氏菌 家禽屠宰市场 街道零售商【英文关键词】Multiplex PCR detection kit Pathogens Ecoli-O157:H7 L. monocytogenes Shig

5、ella Chicken abattoirs street vendors【索购全文】联系 Q1：138113721 Q2：139938848【目录】食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用中文摘要7-9Abstract9-10前言11-261 食品安全概述11-122 本文所涉及的食源性致病菌12-183 致病菌快速检测方法18-253.1 免疫学技术18-203.2 代谢学技术20-213.3 分子生物学技术213.4 生物传感技术21-223.5 PCR 技术22-254 肉及肉制品中食源性致病菌 PCR 检测研究现状25-26研究内容26-571 材料26-302 方法30-572

6、.1 食源性致病菌的培养、分离和鉴定30-472.1.1 沙门氏菌的培养、分离和鉴定30-352.1.2 志贺氏菌的培养、分离和鉴定35-372.1.3 单核细胞增生李斯特氏菌的培养、分离和鉴定37-402.1.4 金黄色葡萄球菌的培养、分离和鉴定40-422.1.5 大肠埃希氏菌0157:H7 的培养、分离和鉴定42-452.1.6 蜡样芽孢杆菌的培养、分离和鉴定45-472.2 菌体 DNA 的提取47-492.3 目的基因的选择和引物的设计49-502.4 阳性对照模板的制备50-542.5 多重 PCR 扩增条件的优化542.6 多重 PCR 体系的特异性54-552.7 多重PCR体系灵敏度55-562.8 试剂盒组装及重复性、稳定性和保存期试验562.9 山东泰安禽肉市场（屠宰市场，零售商）致病菌流行情况监测调查56-573 结果57-693.1 DNA 模板的提取方法的比较573.2 多重 PCR 引物设计结果573.3 多重 PCR 调试结果57-593.4 多重 PCR 体系特异性59-613.5 多重 PCR 体系的灵敏度61-623.6 食品模型试验结果62-653.7 试剂盒的组装65-663.8 试剂盒重复性、稳定性和保存期试验结果