GMS-六胺银-真菌

1、GMS 一六胺银-GROCOTT'S改良法目的：鉴别真菌。原理：真菌细胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。醛基与硝酸银反应，再将银还原成可见的金属形式。对照：含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。固定：10%甲醛技术：4-5m石蜡切片。设备：酸清洗玻璃器皿，染色缸，微波炉。试齐I：2%铭酸：三氧化铭 Chromium trioxide 10.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。1% 偏重亚硫酸钠 Sodium Metabisulfite:偏重亚硫酸钠 Sodium metabisul

2、fite 5.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。5%硼砂：四硼酸钠 Sodium borate 5.0 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。六胺银备用液：3%六亚甲基四胺Methenamine（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸银 Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。警告：腐蚀性，可能致癌。工作液：六胺银备用液 Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸储水 Distill

3、ed water 25.0 ml5% 硼砂 Borax 2.5 ml使用前新鲜配制，用后丢弃。0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期 1年。警告：避免接触和吸入。0.2%亮绿：亮绿 Light green SF yellow. 0.2 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml冰醋酸 Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。保存期6个月。警告：避免接触和吸入。安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接

4、触和吸入染料和化学品。铭酸：对皮肤和粘膜有腐蚀性，高度毒性，影响靶器官为肾。致癌物质。偏重亚硫酸钠：侵入途径为摄入，能引起胃肠道不适，对皮肤、眼睛和粘膜有刺激性。硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。摄入将导致严重的胃肠道不适。可能致 癌：可疑的月中瘤发生因素。硫代硫酸钠：摄入毒性。能引起胃刺激，接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。亮绿SF Yellowish :可能致癌。程序：1 .脱蜡至无水酒精。2 . *2% 铭酸微波高火 45 seconds ,放置 5 minutes。3 .流水冲洗蒸储水稍洗。4 . 1% 偏重亚硫酸钠温室1 minute。5 .流水冲洗，蒸储水稍洗3 change

5、s 06 . *六胺银工作液微波高火70seconds ,在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸袋 色。7 .蒸储水稍洗2 changes。8 . 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。9 .蒸储水稍洗。10 . 5% Hypo, 3 minutes.11 .流水冲洗，蒸储水稍洗。12 .亮绿液 1 minute.13 .蒸储水稍洗。14 .脱水、透明和封固。*传统方法：5% 铭酸60 C水浴1 hour o银液：60° C水浴1 hour或直至棕色。结果：真菌：黑色背景：绿色注思：1 .如果铭酸变褐色是需要更换，传统方法 5%铭酸胜于2%,高浓度的铭酸容易在微 波处理时引起组

6、织掉片。2 .如果微生物不变黑色，检查：a.铭酸是否新鲜。b.偏重亚硫酸钠是否新鲜。c.硼砂是否新鲜fo3 .如果银液出现混蚀或在染色缸上出现银镜时，重新配制溶液。参考文献：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp243-246, Battelle Press, OhioLuna L, Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd Ed,1968, pp230-231, McGraw-Hill,NYCrookham

7、,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the HistopathologyLaboratory, 2nd ED, 1991, Anatech程序卡GMS - METHENAMINE SILVER, GROCOTT'S, MODIFIED对照：含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。技术：4-5m石蜡切片。程序：1 .脱蜡至无水酒精。2 . *2% 铭酸微波高火 45 seconds ,放置 5 minutes。3 .流水冲洗蒸储水稍洗。4 . 1% 偏重亚硫酸钠温室1 minute。5 .流水冲洗，蒸储水稍洗3 changes 06 .

8、*六胺银工作液微波高火70seconds ,在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸袋 色。7 .蒸储水稍洗2 changes。8 . 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。9 .蒸储水稍洗。10 . 5% Hypo, 3 minutes.11 .流水冲洗，蒸储水稍洗。12 .亮绿液 1 minute.13 .蒸储水稍洗。14 .脱水、透明和封固。*传统方法：5% 铭酸60 C水浴1 hour 0银液：60° C水浴1 hour或直至棕色。结果：真菌：黑色背景：绿色安全：所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。2%铭酸：三氧化铭 Chromium trioxid

9、e 10.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。1%偏重亚硫酸钠：偏重亚硫酸钠 Sodium metabisulfite 5.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。5%硼砂：四硼酸钠 Sodium borate 5.0 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。六胺银备用液：3%六亚甲基四胺Methenamine（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸银 Silver

10、 nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期 3个月警告：腐蚀性，可能致癌。工作液：六胺银备用液 Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸储水 Distilled water 25.0 ml5% 硼砂 Borax 2.5 ml使用前新鲜配制，用后丢弃。0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期 1年。警告：避免接触和吸入。0.2%亮绿：亮绿 Light green SF yellow. 0.2 gm蒸储水 Distilled wa

11、ter 100.0 ml冰醋酸 Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。保存期6个月。5%硝酸银备用液：硝酸银 Silver nitrate 25.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml用酸清洗过的瓶。冷藏，保存期6个月。警告：腐蚀性，可能致癌。日期：技师：使用限期：3%六亚甲基四胺六亚甲基四胺Methenamine 30.0 gm蒸储水 Distilled water 1000.0 ml用酸清洗过的瓶。冷藏，保存期6个月。警告：避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：1%偏重亚硫酸钠：偏重亚硫酸钠 Sodium metabisulfite 5.0

12、 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。警告：避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：1%偏重亚硫酸钠日期：技师：六胺银备用液：3%六亚甲基四胺（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸银 Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期 3个月警告：腐蚀性，可能致癌。日期：技师：使用限期：5%硼砂：四硼酸钠 Sodium borate 5.0 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。日期：技师：使用限期：2%铭酸：三氧化铭 Chromium trioxide 10.0 gm蒸储水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：2%铭酸日期：技师：0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸储水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清