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1、即时痰、夜间痰和晨痰分枝杆菌检查分析 关键词 结核分支杆菌; 检出结果; 分析 中图分类号 R825.2 文献标识码 A文章编号 1005-0515(2011)-11-352-01 结核病控制项目把痰细菌学检查,即厚涂片法摆列首要位置,被形象的比喻为项目工作的“方向盘”。结核病实验室检查是发现传染源的最主要手段,有效的细菌检查是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效、指导整个化疗过程的主要依据1。现将2010年1-12月门诊可疑和肺部有异常阴影345份痰检结果分析如下。 1 材料和方法 1)留痰容器使用
2、统一的直径4、高度2带盖塑料盒。2)受检人员根据项目“规划”查痰3份,即深咳的即时痰1份,夜间痰和晨痰各1份,并按质控要求,不合格重新送痰。一张载玻片上只能涂抹一份痰标本;每张载玻片只能用一次,不得清洗后再次使用;应使用95%乙醇擦拭(或浸泡)脱脂,经干燥、清洁、无油污、无划痕的新载玻片制备涂片,在玻片一端的1/3处注明实验室序号。3)制备涂片;小心打开承载痰标本的容器,防止产生气溶胶或使标本外溢;仔细观察标本,使用折断竹签茬端,挑取痰标本中干酪样脓样或可疑部分约0.05-0.1ML,于玻片正面右侧2/3处,均匀涂抹成10×20卵圆形痰膜。涂抹完毕后的痰标本,在结果报告前应暂时保留;
3、为保证检验人员的安全,严禁在涂抹标本的同时,对载玻片进行加热。4)涂片自然干燥后,放置在染色架上,玻片间距保持10以上;火焰固定(在5秒钟内将玻片置于火焰上烤4次)。5)滴加石碳酸复红染液盖玻片,火焰加热至出现蒸汽后脱离火焰,保持染色5分钟。染色期间始终保持痰膜被染色液覆盖,必要时可持续加染液。加温时不要使染液沸腾。6)流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染液,沥去标本上剩余的水自痰膜上端外缘滴加脱色剂布满痰膜,脱色1分钟,如有必要,需流水洗去脱色液后,再次脱色至痰膜可视红色为止。流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染液,沥去标本上剩余的水。7)滴加亚甲蓝染液,染色30秒钟。8)流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去复
4、染液,然后沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检。9)染色合格的玻片,由于被亚甲蓝染色而呈亮蓝色。将染色后的玻片放置在报纸上,若透过痰膜不能分辨报纸上的文字,则表明该玻片涂抹过厚。 2 判断标准 1)阴性:镜检100个视野以上或连续观察5分钟未发现抗酸杆菌。2)阳性:(1)100个视野内有3-9条抗酸杆菌。(2)10个视野内有1-9条抗酸杆菌。(3)每个视野内有1-9条抗酸杆菌。(4)每个视野内有9条以上抗酸杆菌。受检人数345例,共1035份痰标本,3份痰标本阳性或其中2份,1份阳性者130例,涂阳检出率37.68%,其中即时痰116例(87.23%),夜间痰检出126例(96.92%),晨痰
5、检出119例(91.54%)。 3 结果 3份痰均为阴性215例,占受检人数的61.31%,即时痰、夜痰、晨痰检查结果见表1、2。 表1三种痰标本检出痰菌量 表2即时痰、夜间痰、晨痰菌量比较 4讨论分析 1)夜间痰和清晨浓缩痰检出率较高,夜间痰检出率高于晨痰5.38%,高于即时痰9.69%,晨痰高于即时痰4.31%。三种痰标本菌量比较没有显著的差异变化。2)结核分枝杆菌俗称结核杆菌,是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官,但以肺结核为多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报到,每年约有800万新病例发生,至少有300万人死于该病。根据2000年全国流行
6、病学抽样调查,全国近5.5亿人口感染了结核病,明显高出全球1/3人口感染水平。我国现有肺结核病人450万,其中传染性肺结核病人150万,每年新发肺结核病人145万,每年因肺结核病死亡13万。在因结核病死亡的病人中,有21.6%的病人由于经济等原因从没有接受过结核病的治疗,83.8%的病人从未进行过登记报告,全国大约80%的结核病人在农村,结核病是我国因病致贫、因病返贫的主要疾病之一。在结核病防治工作中,结核病的细菌学检查占有重要的地位,痰检查结核分枝杆菌工作是发现传染源的主要手段,并有临床鉴别诊断及疗效考核的重要意义。过去临床诊断以X线检查为主,现在世界卫生组织专家委员会提出只有发现结核分枝杆
7、菌的患者,才算1例结核病,无菌患者只是可疑病例,所以找到结核分枝杆菌方为诊断结核病的主要依据。要找到结核分枝杆菌,第一要素是痰标本的质量,是提高阳性率的关键。不合格痰的阳性率为1.25%,培养为2.5%。阳性率极低,极易造成排菌患者的漏诊。因此,取得真正合格的痰液,才能真正做到痰检标准化。在显微镜下每个视野中看到一条结核分枝杆菌,则每毫升痰中含有50万条。培养标本只要有100条即可培养出。3)肺结核病人痰内结核菌的检出率与采取标本的好坏有直接关系。因为痰液是由肺部结核性的坏死组织,气管内分泌物及口腔粘液等组成。只有病症坏死组织才有大量结核菌,因此,病人必须按医嘱采取合格标本,才能提高痰菌检出率
8、。4)制作痰片标准、操作按照规程,镜检细致、结果准确。5)痰结核菌检查不仅是确诊肺结核的重要手段,也是制定化疗方案、考核疗效的主要依据,也是防治工作的重点对象。因此,对肺结核可疑者须反复验痰找结核菌,一般新发病人的结核菌阳性率可达50左右。6)提高痰检质量水平,最有效的办法就是进一步完善痰检质控系统,强化痰涂片、染色、镜检的标准与规范操作,进一步延伸质控覆盖面,保持痰检人员的相对稳定,建立逐级定期的培训考核制度,使其从思想上重视,理论上掌握、操作上规范,痰检工作将会保持在较高的水平。7)痰标本的采集及标本性状,直接影响检查结果。标本的采集,要求临床医生医护人员指导肺结核可疑症状者,从肺部深处咳
9、出的分泌物,标本量一般在3-5ML,采集标本时,应在远离人群的开放空间进行,或在通风良好的室内进行。合格的痰标本一般为干酪痰,褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰。痰标本不合格时,应进一步指导并要求患者重新送检。正确的标本采集,是实验室细菌学检查诊断传染性肺结核的关键,也是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效的主要依据。8)痰涂片检查结核分枝杆菌,是当前发现和控制传染源的主要手段,是相应国家开展结核病控制项目时,非常符合成本效益原则的细菌学实验技术。反映某一国家或地区结核病疫情的严重程度的指标中,涂阳患病率、涂阳发病率是考核的重要指标。高质量的痰涂片镜检有其自身特有的优势。如:作为诊断手段,对传染性肺结核的诊断比X线的准确性高;技术相对简单,容易标准化和完成操作;建立AFB检查时需要设备投入少;检查成本低,易于接受;从收到标本到报告结果的时间短,能够满足临床诊断的需要;对涂阳患者的治疗效果,能够作出及时和准确的评价。 总之,痰涂片结核分枝杆菌检查,无论是从检查对象、标本的收集、患者的留痰宣传教育、采集痰标本地点等,必须通过医护人员与患者相互配合,提供宣传材料,耐心指导教育,保证痰标本的合格,只有这样,实验人员才能提供准确可信的检验结果,为诊断传染性肺
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