微柱凝胶免疫检测技术博迅产品操作03版ppt课件

1、微柱凝胶免疫检测技术微柱凝胶免疫检测技术 反响原理反响原理 微柱凝胶免疫反响的本质是红细胞凝集实验，也可微柱凝胶免疫反响的本质是红细胞凝集实验，也可称之微柱凝胶血凝实验称之微柱凝胶血凝实验Microcolumn Gel Microcolumn Gel Heamagglutination AssayHeamagglutination Assay，MGHAMGHA。 在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，构成在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，构成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶外表或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的外

2、表或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。部。4+4+2+2+- - 特点和优点特点和优点 简单：不需洗涤，对阴性结果不需确证实验，适用于大量标本简单：不需洗涤，对阴性结果不需确证实验，适用于大量标本检测，处理了检测，处理了CoombsCoombs实验由于程序复杂费时等缘由未能在临床常规实验由于程序复杂费时等缘由未能在临床常规运用问题。运用问题。 使不完全抗体检测实际使不完全抗体检测实际“金规范成为临床的金规范成为临床的“金规范。金规范。 多份标本一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。多份

3、标本一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。 另外还具备准确、敏感、标本用量少、结果保管时间长、易于另外还具备准确、敏感、标本用量少、结果保管时间长、易于规范化、规范化、 操作更平安等优点。操作更平安等优点。产品操作产品操作一一.预备任务预备任务检测卡的预备检测卡的预备1.在在18-25条件下平衡条件下平衡30分钟。分钟。2.离心离心2-3分钟，平衡反响介质。分钟，平衡反响介质。3.外观检查应无气泡、干胶和杂质。外观检查应无气泡、干胶和杂质。4.要缓慢撕膜。防止膜面上的液滴凝结因冷热交替产生的污染邻孔。要缓慢撕膜。防止膜面上的液滴凝结因冷热交替产生的污染邻孔。离心！检测标本的预备检测标本的预备

4、1.1.标本要求用标本要求用EDTAEDTA抗凝管采集的新颖血如陈旧血需设阴抗凝管采集的新颖血如陈旧血需设阴性对照。性对照。2.2.抗凝血样标本要上清廓清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、抗凝血样标本要上清廓清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状，应溶血、脂肪等状，应 再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降，建议运用红细胞稀释液。响红细胞沉降，建议运用红细胞稀释液。3.3.血辫血样须放置试管中离心处置，确保血清廓清微黄。血辫血样须放置试管中离心处置，确保血清廓清微黄。必要时需洗涤。必要时需洗涤。4.4.在在18-2518-25条件下平衡条件下平衡3030分钟，防止

5、冷凝集。分钟，防止冷凝集。红细胞悬液的制备红细胞悬液的制备1.1.将红细胞配制为将红细胞配制为0.8%0.8%的悬液，最高浓度不要超越的悬液，最高浓度不要超越1% 1% 。如。如: :取取8l 8l 压积红细胞，参与到压积红细胞，参与到1ml1ml的红细胞稀释液抗人球的红细胞稀释液抗人球蛋白实验要求用低离子液配置红细胞悬液中，配制出的蛋白实验要求用低离子液配置红细胞悬液中，配制出的红细胞悬液浓度大约为红细胞悬液浓度大约为0.8%0.8%。2.2.外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物如有纤维外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物如有纤维蛋白需去除。蛋白需去除。二二. .结果断定结果断定阳性结果

6、：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中构成的特异性抗阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中构成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶外表或胶中，为阳性反响。原抗体复合物浮在凝胶外表或胶中，为阳性反响。阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反响。体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反响。反响强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶外表，为强阳性反响强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶外表，为强阳性反响；复合物在胶中，为弱阳性反响；愈接近胶底部颗粒愈小，反响；复合物在胶中，为弱阳性

7、反响；愈接近胶底部颗粒愈小，反响愈弱。反响愈弱。 ？4+ 4+ 红细胞复合物凝集位于凝胶外表红细胞复合物凝集位于凝胶外表3+ 3+ 大部分红细胞复合物位于凝胶外表，少部分位于凝胶中部大部分红细胞复合物位于凝胶外表，少部分位于凝胶中部2+ 2+ 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部1+ 1+ 红细胞复合物位于凝胶中下部红细胞复合物位于凝胶中下部 与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为 - - 红细胞完全堆积在凝胶管尖底部红细胞完全堆积在凝胶管尖底部完全溶血完全溶血 凝

8、胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色不完全溶血不完全溶血 残留红细胞在胶外表、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色残留红细胞在胶外表、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色混合凝集混合凝集 红细胞复合物位于凝胶外表和凝胶底部红细胞复合物位于凝胶外表和凝胶底部 完全完全 不完全不完全 混合凝集混合凝集景象及阐明景象及阐明反响强度反响强度三、规范操作规程三、规范操作规程 1、ABO、RhD血型定型检测卡单克隆抗体血型定型检测卡单克隆抗体操作步骤：操作步骤：1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志；2将待检者血浆分别参与将待

9、检者血浆分别参与5-6管中，各管中，各50l；50l50l待检者血浆待检者血浆3 3将待检者将待检者0.8%0.8%红细胞悬液分别参与红细胞悬液分别参与1-41-4管中，管中，各各5050l l；待检者待检者0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液50l50l50l50l4 4取取0.8%0.8%的的ABOABO血型反定型红细胞试剂，分别参血型反定型红细胞试剂，分别参与与5-65-6管中，各管中，各5050l l；50l50lA A细胞细胞B B细胞细胞5离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；6结果判读。结果判读。结果：结果：A A型型RhDRhD阳性阳性50l5

10、0l50l2 2、ABOABO、RhDRhD血型检测卡微柱凝胶血型检测卡微柱凝胶操作步骤：操作步骤：1 1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志；2 2将待检者将待检者0.8%0.8%红细胞悬液分别参与第红细胞悬液分别参与第1313或或4646管中，各管中，各5050l l； 待检者的待检者的0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液3离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；4结果判读。结果判读。结果：结果：1.A1.A型型RhDRhD阳性；阳性； 2.B 2.B型型RhDRhD阳性阳性 3、Rh血型抗原检测卡单克隆抗体血型抗原检测卡单克隆抗体操作步骤操作

11、步骤:1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志；2将待检者将待检者0.8%红细胞悬液分别参与红细胞悬液分别参与16管中，各管中，各50l；待检者待检者0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液50l50l50l50l50l50l3离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；4结果判读。结果判读。结果：结果：RhDRhD、C C、e e阳性阳性4 4、抗人球蛋白检测卡、抗人球蛋白检测卡不规那么抗体筛不规那么抗体筛检检 操作步骤：操作步骤：1 1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志； 2 2将将0.8%0.8%、筛检红细胞各筛检红细胞各5050l l

12、分别参与对应的微管中分别参与对应的微管中; ; 50l50l50l0.8%0.8%、筛检红细胞筛检红细胞bioxun3将待检者血浆各将待检者血浆各50l分别参与分别参与、微管中；微管中；437孵育孵育15分钟；分钟；待检者血浆待检者血浆50l50l50lllbioxun50l50l50l5 5离心离心5 5分钟分钟900rpm2900rpm2分钟，分钟，1500rpm31500rpm3分钟；分钟；6 6结果判读。结果判读。根据当前运用的筛检红细胞的反响格局来断定根据当前运用的筛检红细胞的反响格局来断定bioxun 5 5、抗人球蛋白检测卡、抗人球蛋白检测卡交叉配血实验交叉配血实验操作步骤：操作

13、步骤：1 1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志； 2 2将供血者将供血者0.8%0.8%红细胞悬液与受血者血浆各红细胞悬液与受血者血浆各5050l l先后参与主侧管先后参与主侧管中；中； 受血者血浆受血者血浆50l供血者红细胞悬液供血者红细胞悬液50l3将受血者将受血者0.8%红细胞悬液与供血者血浆各红细胞悬液与供血者血浆各50l先后参与次侧先后参与次侧管中；管中；437孵育孵育15分钟；分钟；供血者血浆供血者血浆50l受血者红细胞悬液受血者红细胞悬液50l5离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；6结果判读。结果判读。例如上图：例如上图：1、3

14、不配合；不配合；2配合配合 交叉配血实验本卷须知交叉配血实验本卷须知1.1.运用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫实验检测病人红细胞时，一定运用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫实验检测病人红细胞时，一定要用适量要用适量EDTAEDTA的试管采血液标本，该标本不能放入的试管采血液标本，该标本不能放入2-82-8冰箱冰箱保管，以防止红细胞在病人体外致敏所致假阳性反响。保管，以防止红细胞在病人体外致敏所致假阳性反响。2.2.红细胞标本一定不能被细菌污染，否那么出现假阳性反响。尽能红细胞标本一定不能被细菌污染，否那么出现假阳性反响。尽能够运用当日采集的新颖血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血够运用当日采集的新颖血做

15、本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，那么必需首先用该标本做阴性对照实验，以确定该标天性否可，那么必需首先用该标本做阴性对照实验，以确定该标天性否可以做本实验。以做本实验。3.3.血清标本：血清标本必需充分去纤维蛋白，否那么标本中纤维蛋血清标本：血清标本必需充分去纤维蛋白，否那么标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，妨碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反响。白在微柱凝胶中析出，妨碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反响。4.4.如在微柱凝胶管中出现溶血景象，剧烈提示为红细胞抗原抗体阳如在微柱凝胶管中出现溶血景象，剧烈提示为红细胞抗原抗体阳性反响，也不排除其他缘由所致溶血，故对此标本一定仔细分析性反响，也不排除其他缘由所致

16、溶血，故对此标本一定仔细分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其缘由。，并向上级主管技术人员报告并讨论其缘由。5.5.每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。6.6.红细胞悬液的浓度应为红细胞悬液的浓度应为0.8%0.8%，不得超越，不得超越1%1%。7.7.运用低离子液运用低离子液LissLiss液稀释红细胞可加强敏感性。液稀释红细胞可加强敏感性。8.8.检测卡应放在检测卡应放在18-2518-25储存，如假设长期放在储存，如假设长期放在44冰箱，建议每冰箱，建议每1 1个月取出，用公用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。个月取出，用公用离心机离心一次

17、，以防止干胶或产生气泡。操作步骤：操作步骤：1 1将预备好的检测卡做好标将预备好的检测卡做好标志；志； 2 2将将0.8%0.8%待检者和阴性对照待检者和阴性对照安康男性安康男性O O型红细胞悬液型红细胞悬液各各5050l l分别参与微管中；分别参与微管中； 150l50l50l50l50l50l2345 0.8% 0.8%待检者红细胞悬液待检者红细胞悬液阴性对照阴性对照 6、抗人球蛋白检测卡、抗人球蛋白检测卡抗人球蛋白实验抗人球蛋白实验 3离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；4结果判读。结果判读。结果：结果：1 1、2 2、3 3和和5 5阳性阳性4 4阴

18、性阴性 7. 7.抗人球蛋白检测卡抗人球蛋白检测卡母体母体IgGIgG抗体效价检测抗体效价检测 操作步骤操作步骤 1 1在试管中分别参与在试管中分别参与200200l l母体血清和母体血清和200200l 2-MEl 2-ME运用液，然后运用液，然后置于置于3737水浴水浴30-6030-60分钟。以充分破坏血清中分钟。以充分破坏血清中IgMIgM类抗体；类抗体；200200l l母体血清母体血清200200l 2-Mel 2-Me3737水浴水浴30-6030-60分钟分钟bioxun2取取6只干净试管，分别做好标志。将处置后的血清做倍比稀释；只干净试管，分别做好标志。将处置后的血清做倍比稀

19、释； 326412825651216350l 200l 200l 200l 200l 200l 标志并参与稀释液标志并参与稀释液326412825616灭活后的血清灭活后的血清50l 200l 200l 200l 200l 200l 512bioxun3 3将预备好的将预备好的HDNHDN母体母体IgGIgG抗体效价检测卡做好标志，在一切孔中分别参与抗体效价检测卡做好标志，在一切孔中分别参与5050l l父亲或父亲同型的父亲或父亲同型的0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液ABOABO血型系统血型系统IgGIgG血型抗体或在一切孔血型抗体或在一切孔中分别参与中分别参与5050l l规范规范O O

20、型型0.8%0.8%红细胞悬液测定孕妇红细胞悬液测定孕妇ABOABO血型系统以外血型系统以外IgGIgG血型抗血型抗体；体； 50l50l50l50l50l50l0.8%红细胞悬液红细胞悬液bioxun4依次将依次将50l倍比稀释血清分别参与对应孔中；倍比稀释血清分别参与对应孔中； 163250l 50l 50l 50l 50l 50l 64512256128bioxun537孵育孵育15分钟；分钟；6离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；7结果判读。结果判读。结果：效价为结果：效价为 1 1：128128提示：提示： 将每次采集的血清标本分装冻存，每次检测要

21、以同样的方法、将每次采集的血清标本分装冻存，每次检测要以同样的方法、同样的表型抗原红细胞，当次检测的血清要和以前冻存的血清同时同样的表型抗原红细胞，当次检测的血清要和以前冻存的血清同时对照实验。对照实验。bioxun HDN母体母体IgG抗体效价检测实验本卷须知抗体效价检测实验本卷须知1.血清标本：血清标本必需充分去除纤维蛋白，否那么标血清标本：血清标本必需充分去除纤维蛋白，否那么标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，妨碍红细胞沉淀，呈本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，妨碍红细胞沉淀，呈假阳性反响。假阳性反响。2.父亲红细胞标本也可用与其同型的父亲红细胞标本也可用与其同型的A型或型或B型红细胞替型红细胞

22、替代。代。3.每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。4.红细胞悬液的浓度应为红细胞悬液的浓度应为0.8%，最高不超越，最高不超越1%。5.检测卡应放在检测卡应放在18-25储存，如假设长期放在储存，如假设长期放在4冰箱，冰箱，建议每建议每1-2个月取出，用公用离心机离心一次，以防止个月取出，用公用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。干胶或产生气泡。6.倍比稀释时要留意正确改换枪头。倍比稀释时要留意正确改换枪头。7.灭活时要留意用封口膜密封试管口。灭活时要留意用封口膜密封试管口。bioxun50l50l50l50l50l50l操作步骤：操作步骤：1 1

23、将预备好的检测卡做将预备好的检测卡做好标志；好标志；2 2将将0.80.8待检者红细待检者红细胞悬液分别参与胞悬液分别参与1-61-6管中管中, ,各各5050l l； 待检者待检者0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液8 8、新生儿、新生儿ABOABO、RhDRhD血型检测卡微柱凝胶血型检测卡微柱凝胶新生儿溶血病检新生儿溶血病检测卡测卡 3离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；4结果判读。结果判读。结果：结果：ABAB型型RhDRhD阳性，阳性， 直抗实验阳性。直抗实验阳性。 9、抗人球蛋白检测卡、抗人球蛋白检测卡-新生儿溶血病胎婴儿不完全抗体检测卡新生儿溶血

24、病胎婴儿不完全抗体检测卡预备任务预备任务热放散：热放散：取同体积的压积血至少洗涤三次和牛血洁白蛋白混匀，置于取同体积的压积血至少洗涤三次和牛血洁白蛋白混匀，置于56水浴水浴10分钟，期间不断摇动，然后离心分钟分钟，期间不断摇动，然后离心分钟2000rpm，取上清。即放散，取上清。即放散液。液。酸放散：酸放散： a.用生理盐水洗涤待检红细胞用生理盐水洗涤待检红细胞4次。次。b.配制放散液配制放散液(取取4体积的放散液体积的放散液A与与1体积的放散液体积的放散液B混合均匀混合均匀)。c.将待检压积红细胞与酸放散液等体积混合均匀，室温孵育将待检压积红细胞与酸放散液等体积混合均匀，室温孵育1-2分钟。

25、分钟。d.以以3000rpm离心离心1-2分钟。分钟。e.立刻将酸放散液移到另一只干净试管中，并参与紫红色中和液调至肉色或水粉立刻将酸放散液移到另一只干净试管中，并参与紫红色中和液调至肉色或水粉色色500ul放散液参与中和液放散液参与中和液80-85ul，此时，此时PH值近中性。值近中性。f.将中和后的酸放散液再次进展离心将中和后的酸放散液再次进展离心3000rpm离心离心1-2分钟取上清即放散夜分钟取上清即放散夜。v操作步骤操作步骤v1 1将预备好的检测卡做好标志；将预备好的检测卡做好标志；2 2将将0.80.8A A型红细胞悬液各型红细胞悬液各5050l l分分别参与别参与1 1号、号、4

26、 4号管中；将号管中；将0.80.8B B型红型红细胞悬液各细胞悬液各5050l l分别参与分别参与2 2号、号、5 5号；号；将将0.80.8的的O O型红细胞悬液各型红细胞悬液各5050l l分别分别参与参与3 3号、号、6 6号孔中；号孔中；3 3将将1313管分别参与管分别参与5050l l新生儿血浆新生儿血浆，4646管分别参与管分别参与5050l l新生儿红细胞新生儿红细胞放散液；放散液；50l50l50l50l50l50lA BO0.8%0.8%红细胞悬液红细胞悬液新生儿血浆新生儿血浆50l50l50l50l50l50l新生儿红细胞放散液新生儿红细胞放散液437孵育孵育15分钟；

27、分钟；5离心离心5分钟分钟900rpm2分钟，分钟，1500rpm3分钟；分钟；6结果判读。结果判读。结果：游离抗体阳性、放散实验阳性结果：游离抗体阳性、放散实验阳性 新生儿溶血病检测实验本卷须知新生儿溶血病检测实验本卷须知1.红细胞标本一定不能被细菌污染，否那么出现假阳性反响。尽能红细胞标本一定不能被细菌污染，否那么出现假阳性反响。尽能够运用当日采集的新颖血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧够运用当日采集的新颖血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，那么必需首先用该标本做阴性对照实验，以确定该标天性血，那么必需首先用该标本做阴性对照实验，以确定该标天性否可以做本实验。否可以做本实验。2.血清标本

28、：血清标本必需充分去除纤维蛋白，否那么标本中纤维血清标本：血清标本必需充分去除纤维蛋白，否那么标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，妨碍红细胞沉淀，呈假阳性反响。蛋白在微柱凝胶中析出，妨碍红细胞沉淀，呈假阳性反响。3.如在微柱凝胶中出现溶血景象，剧烈提示为红细胞抗原抗体阳性如在微柱凝胶中出现溶血景象，剧烈提示为红细胞抗原抗体阳性反响，也不排除其他缘由所致溶血，故对此标本一定仔细分析反响，也不排除其他缘由所致溶血，故对此标本一定仔细分析，并向上级主管技术人员多报告并讨论。，并向上级主管技术人员多报告并讨论。4.父亲红细胞标本也可用与其同型的父亲红细胞标本也可用与其同型的A型或型或B型红细胞替代。型红细

29、胞替代。5.洗出尽量多红细胞进展放散；留意放散的温度不可超越洗出尽量多红细胞进展放散；留意放散的温度不可超越56，以，以防溶血；酸放散室温孵育时间必需在防溶血；酸放散室温孵育时间必需在1-2分钟之间；天冷时放散分钟之间；天冷时放散液留意保温；尽能够多得放散液吸出；留意除去放散液中残留液留意保温；尽能够多得放散液吸出；留意除去放散液中残留的红细胞；放散前红细胞要充分洗涤，至少三次。的红细胞；放散前红细胞要充分洗涤，至少三次。6.每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。7.红细胞悬液的浓度应为红细胞悬液的浓度应为0.8%，最高不超越，最高不超越1%。8.检测

30、卡应放在检测卡应放在18-25储存，如假设长期放在储存，如假设长期放在4冰箱，建议每冰箱，建议每1-2个月取出，用公用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。个月取出，用公用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。临床遇到的一些问题及缘由的分析临床遇到的一些问题及缘由的分析问题问题1：正反定型卡反定型侧出现弱阳性结果：正反定型卡反定型侧出现弱阳性结果缘由及分析缘由及分析能够是一些特殊标本如血液病、肿瘤病人和老年人等抗体比较弱，有些大医能够是一些特殊标本如血液病、肿瘤病人和老年人等抗体比较弱，有些大医院做过统计当地院做过统计当地10%左右的人群存在此情况，不同地域比例能够不同。左右的人群存在此情况，

31、不同地域比例能够不同。处置方法处置方法加样后加样后2-8 孵育孵育1015分钟，可添加弱抗体检出率。分钟，可添加弱抗体检出率。问题问题2. 正反定型卡正定型结果阳性弱正反定型卡正定型结果阳性弱缘由及分析缘由及分析能够是一些特殊疾病引起抗原减弱。能够是一些特殊疾病引起抗原减弱。处置方法处置方法加样后室温孵育加样后室温孵育1015分钟，可添加弱抗原检出率。分钟，可添加弱抗原检出率。问题问题3. 交叉配血阴性结果不好假阳性，有交叉配血阴性结果不好假阳性，有1+或或2+结果结果缘由及分析缘由及分析 a. 标本本身的问题放置时间长、标本本身存在致敏景象、标本被标本本身的问题放置时间长、标本本身存在致敏景

32、象、标本被污染。污染。 b. 低于实验要求温度或没有孵育，特别是在冬天很容易出现此问低于实验要求温度或没有孵育，特别是在冬天很容易出现此问题。题。问题问题4. 4. 正反定型不符正反定型不符缘由及分析缘由及分析a. a. 一些特殊疾病引起。一些特殊疾病引起。b. b. 新生儿抗体弱或无抗体。新生儿抗体弱或无抗体。c. c. 抗原弱或亚型引起。抗原弱或亚型引起。问题问题5. 血型卡或抗人球卡出现混合凝集及疑似景象血型卡或抗人球卡出现混合凝集及疑似景象缘由及分析缘由及分析a.不同血型相容性输血、骨髓移植和器官移植等。不同血型相容性输血、骨髓移植和器官移植等。b.标本存放时间过长，存在一些细胞碎片、细胞团块或纤维标本存放时间过长，存在一些细胞碎片、细胞团块或纤维蛋白在胶上部构成红线或红色圆环。蛋白在胶上部构成红线或红色圆环。c.亚型亚型问题问题6. 母体效价卡结果各稀释度都为阳性母体效价卡结果各稀释度都为阳性缘由及分析缘由及分析灭活不完全或者稀释度不够。灭活不完全或者稀释度不够。处置方法处置方法重新灭活或重新灭活或先将血清标本稀释，取先将血清标本稀释，取4+最高稀释倍数的血清用等量最高稀释倍数的血清用等量2-me灭活。灭活。问题问题7. 7. 卡式法检测卡式法检测HDNHDN母体母体IgGIgG抗体效价的临界值抗体效价的临界值 卡式