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文档简介

1、第一次實驗課程第一次實驗課程市售果汁之還原糖定量市售果汁之還原糖定量（DNS法）法）實驗原理實驗原理 3,5-dinitrosalicylic acid（DNS）試劑之反應是利用）試劑之反應是利用DNS具還原力之特性，因此碳水化合物只要具有游具還原力之特性，因此碳水化合物只要具有游離或游離趨勢之醛或酮基，即能在鹼性溶液下有還離或游離趨勢之醛或酮基，即能在鹼性溶液下有還原的能力而進行以下反應：原的能力而進行以下反應： 於一定範圍內，顏色的深淺強度和還原糖濃度成正於一定範圍內，顏色的深淺強度和還原糖濃度成正比，故以標準葡萄糖檢量線來定量樣品中還原糖的比，故以標準葡萄糖檢量線來定量樣品中還原糖的比例

2、。比例。Reduction 3,5-dinitrosalicylic acid 3-amino-5-nitrosalicylic acid（orange-red）（yellow）實驗試劑實驗試劑3,5-二硝基水楊酸溶液二硝基水楊酸溶液(3,5-dinitrosalicylic acid；DNS)：3, 5-dinitrosalicylic acid 1 g酒石酸鉀鈉酒石酸鉀鈉(Potassium sodium tartrate) 30 gNaOH 1.6 g溶於溶於100 ml蒸餾水中並於水浴加熱使其溶解，最後置蒸餾水中並於水浴加熱使其溶解，最後置於棕色瓶於棕色瓶避光儲存備用。避光儲存備用。S

3、tandard solution glucose standard solution (1000 g /ml)：配置每：配置每ml含含100、200、 400、800和和1000 g之葡萄糖溶液以製作葡萄糖之之葡萄糖溶液以製作葡萄糖之標準曲線。標準曲線。glucose standard solution (ml) 0.5 1 2 4 5H2O (ml) 4.5 4 3 1 0Conc. (g /mg)1002004008001000實驗步驟實驗步驟（1）葡萄糖標準曲線）葡萄糖標準曲線 a. 取取 5支試管分別加入支試管分別加入0.5 ml葡萄糖標準溶液葡萄糖標準溶液 及及 0.5 ml DNS呈色劑。呈色劑。 b. 於於100恆溫水浴加熱恆溫水浴加熱5分鐘後，置冷水浴分鐘後，置冷水浴 冷卻。冷卻。 c. 加入加入3 ml蒸餾水，測蒸餾水，測 540 nm波長之吸光值。波長之吸光值。 d. 扣除空白值扣除空白值(以水取代葡萄糖溶液者以水取代葡萄糖溶液者)後，以吸後，以吸 光值對葡萄糖量光值對葡萄糖量(g)作圖可得一標準曲線圖。作圖可得一標準曲線圖。 （2）樣品之還原糖定量）樣品之還原糖定量 將樣品溶液經過適當稀釋，使還原糖含將樣品溶液經過適當稀釋，使還原糖含 量落在校正曲線範圍內，依上述方法，量落在校正曲線範圍內，依上述方法， 測定測

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