全自动生化分析仪的校准标准

1、全自动生化分析仪如何校准1、校准的重要性和必要性2、首先必须明确生化分析仪不论如何先进，它还是一个比较器，它测试出来的标本结果是随着标准限的设置不同而变化的。所以，在卫生部临床检验中心拟定的“临床实验室(定量测定)室内质控工作指南”中明确指出“对测定标本的仪器一定要求进行校准，校准时要选择合适的(配套的)标准品/校准品；如有可能，校准品应能溯源到参考方法或/和参考物质；对不同的分析项目要根据其特性确立各自的校准频率。”这说明校准仪器是室内质控的重要部分，强调了校准工作的必要性和重要性，同时指出了校准的方法和要求。二、确立测定系统的概念对于一个临床检测项目，如果所用方法的测定原理、试剂、仪器、校

2、准品中任何一个不同，都可能得到不同的测定结果。因此，测定系统包括测定原理、试剂、仪器、校准品四要素。如果我们想要得到准确可靠的测定结果，而该结果又具有与国际、国内其他实验室的可比性，应该自己建立一个标准测定系统。在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品，即日立7170使用宝灵曼的试剂和校准品(c.fas),在贝克曼CX-7生化分析仪上使用贝克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系统。对于校准品不能乱用，如绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪，同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。三、校准品和质控品校准品(Calibrationmaterials)含有已知量的欲测物，用以

3、校准该测定方法的数值，它与该方法及试剂、仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差。因此最好为人血清基质，以减少基质效应造成的误差。质控品(Controlmaterials)只用于和待测标本同时测定的，为了控制标本的测定误差，因此要求保存时间十分稳定。前者是校准其值而后者是控制误差用的。四、校准前准备1 .了解灯泡已使用多久？检查飘移是否合乎要求；2 .检查比色杯的清洁及磨损情况？必要时进行更换；3 .用清洁剂泡洗管道4 .测定仪器的精密度及线性是否达到仪器性能要求？5、定值质控血清是否可以校准仪器？6、我们在相同条件下，同时用五个进口产品，每家两种不同浓度的定值如

4、TP、ALBUREAUAALRGGTCKHBDHLDAMY等，在日立7170A上进行测定(用常规试剂），详见质控血清对部份常规测定项目（如T、ALBUREACr、UAK、NaCl、ASTALT）结果与靶值比较：表不同厂家定值质控对TP、ALB、ASTALP结果与靶值比较TPALBUREAASTALP偏偏偏偏偏T差%T差T差T差T差汽巴5420544-94康宁17.399.0.5310.56.2汽巴44221-1-20康宁26.894.089.35.768411.765.2宝灵523-805-22曼10.04.85.17.96.458.311.242.7宝灵423-2-1-32曼28.6.883

5、.75.0446.774012.384.7RAND5643746-2-OX19.7.360.8.88.67.3217.71416.1RAND38252-1-3-OX29.336.9.981.65.674412.79417.1Huma744-353-1-n12.186.74.18.78.163.57.5682.2Huma2-2-2-1-2-n29.82.689.82.765.15.085111.7879.1Bio-6031702-22Red139.28.1414.652Bio-41201-2-20Red22.7978.04.440114.398.84* 从总蛋白结果来看RANBOXBio-Red

6、相差为6.45%,而宝灵曼与Bio-Red较为接近；* 从白蛋白结果分析，宝灵曼与Bio-Red相对相差5.75%,与总蛋白结果明显不同。Bio-Red则与汽巴康宁比较接近。* UREA结果中凡是高值均上不去，分析其原因很可能与我们采用试剂盒的质量有关，所以试剂盒的线性范围理应成为选择试剂盒的重要依据之一。但从低值结果分析，也有5%勺偏差（Bio-Red与Human* AST与ALT测定值均低于靶值，这就涉及我们选用什么K值问题。* ALP测定中RANDOX-16.6%）与宝灵曼（2.7%）靶值之间竟相差19.3%,这可能涉及试剂盒选用缓冲液种类，PH值以及所用£值等有关。通过上述结

7、果比较，说明不同厂家生产的定值质控血清靶值之间有的相差较大，提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用。六、校准方法例如日立（Hitachi）系列您必须购买宝灵曼（Boehringer）的试剂及其校准的说明书设置参数，用c.f.a.s.校准血清进行校准，即可获得各项目的校准K值，同时观察一下各项目测定时反应进程图，检查各项目参数设置是否在最佳位置，如不在最佳位置应予以重新设置并测定。此时得到的K值即为准确的校准K值，然后测定待测的10至20份新鲜血清三次取其平均值，应该说此结果是用Hitachi-Boehringer检测系统所获的测定值。然后用此血清值校准其它测定系统。表日立7170、BM

8、试剂连续四个月每天进行校正（n=81）K值的变化TAAACUUTCGCCGPLBLTSTreareaAGholluaKGTM36321ean017940232744756S86641D6.6939.7448C21219V%.8.0.1.7.82111153267354327244974492864603511115660.26.16.97.48.46.81.117.911111916.9.1.4.2.0.6.6.97、关于酶活性测定校准问题8、有的主张不进行校准而采用固定K值，有的作者以为应该进行校准。酶活力计算公式如下：酶活力（u/l）=A/minXVx106/（eXvXl）令k=Vx106

9、/（eXv;则酶活力（u/l）=A/minxk常用K值有以下几种：a）理论K化根据理论摩尔消光系数（&）来计算，如NAD由6.22X103b）实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度不同，而应根据实测£值来设定K值c）厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有的厂家提供6.3X103）d）校准K值：通过校准物直接校准得到的K值在日立7170A全自动生化分析仪上，可以得到几种不同的酶K值，见下表表日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法得到几种酶的K值指示物长波理论K值实测K值校准K值LTANADHnm34024442642(8.1%)3026(23.8%)STANADH

10、nm34024442642(8.1%)2775(13.5%)KCNADPHnm34038783878(8.1%)3886(8.3%)GTG4NAmm40514181539(8.5%)1612(13.7%)GTG4NBmm40514751739(17.9%)A4NA405757825LP(PH10mm(8.9%)注：1校准物为宝灵曼c.f.a.s,试剂也用宝灵曼的配套试剂。2括号内数字是该K值与理论K值相比的变化率以上摘自张克坚文章中*从上述K值中不难发现实测K值大于理论K值，这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差，如波长、半宽度及光径等偏差，使仪器达不到理论上的最佳状态；*校准K值与实测K

11、值之间也存在一定的差距，即使指示物和仪器相同，其差异可能由试剂及校准品造成的；*作者认为最好使用校准K值，但必须由两个先决条件：1必须使用配套的试剂；2必须使用配套的高质量的校准品，但校准K值应有其溯源性。关于酶活标准品，欧洲标准局（BCR和美国国家标准技术研究院（NIST）均发表了人血清基质的酶活性标准物，相信不久将会有公认的标准（校准）品问世。8、必须拟订校准计划（文件）校准工作不是仅进行一次就可万事无忧一劳永逸，而必须经常化。按照“临床实验室质量控制（QC的要求（草案）”必须要求拟定校准计划，其内容包括：1 .建立校准方法选择合适（配套）的校准品，包括校准品数目、类型和浓度；如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质；确定校准的频度。至少每六个月进行一次校准；如有下列情况发生时，必须进行校准*改变试剂的种类，或者批号更换了。如果实验室能说明改变试剂批号并不