高二生物选修3课件222动物细胞融合与单克隆抗体备课讲稿

1、高二生物选修3课件222动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合（细胞杂交）2、概念：、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。的过程。3、结果：、结果：形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞4、原理：、原理：细胞膜的流动性细胞膜的流动性5、诱导方式、诱导方式物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒动物细胞融合动物细胞融合过程：过程：动物细胞动物细胞A A动物细胞动物细胞B B诱导，融合诱导，融合筛选筛选杂交细杂交细胞胞ABAB有丝分裂有丝分裂（膜融合、质融合、（

2、膜融合、质融合、核融合核融合）注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞7、意义：、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。8 8、应用：、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段新品种培育等的重要手段 特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技

3、术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。1 1、传统的抗体生产办法及缺陷是什么？、传统的抗体生产办法及缺陷是什么？2、抗体由什么细胞产生？、抗体由什么细胞产生？B淋巴细胞淋巴细胞每个每个B细胞只分泌一种特异性抗体细胞只分泌一种特异性抗体要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋淋巴细胞，形成细胞群巴细胞，形成细胞群设计方案：设计方案：一种一种B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能在体外大量增殖小鼠骨髓瘤细胞能在体外大量增殖杂交细胞杂交细胞二二. .单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备1

4、1、注射抗原的目的是什么、注射抗原的目的是什么2 2、诱导其融合的方法有哪些？、诱导其融合的方法有哪些？3 3、融合后培养液中有几种细胞、融合后培养液中有几种细胞4 4、第一次筛选的方法和目的、第一次筛选的方法和目的5 5、第二次筛选的方法和目的、第二次筛选的方法和目的6 6、杂交瘤细胞获得单一抗的方法、杂交瘤细胞获得单一抗的方法1、原理：、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。2、过程B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导诱导融合融合B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择

5、培养选择培养杂交瘤细胞杂交瘤细胞（ B-瘤细胞）瘤细胞）克隆化培养克隆化培养专一抗体检测专一抗体检测能产生特异能产生特异性抗体的杂性抗体的杂交瘤细胞交瘤细胞体外培养体外培养小鼠腹腔内增殖小鼠腹腔内增殖单克隆抗体单克隆抗体3.单克隆抗体的应用：单克隆抗体的优点：单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大特异性强、灵敏度高、产量大 作为诊断试剂作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速用于用于运载药物：制成运载药物：制成“生物导弹生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗治疗疾病：主要用于癌症治疗既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。 除通过杂交瘤细胞产生单克隆抗体

6、外，除通过杂交瘤细胞产生单克隆抗体外，还有什么方法？还有什么方法？1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞A3.3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同 B.B.所用的技术手段基本相所用的技术手段基本相同同 C. C. 所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D. D. 都能形成杂种细都能形成杂种细胞胞 D4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是-A.由小鼠能产生抗体的由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞与植物细胞的差别：无细胞壁全能性受限制，不能发育成杂种动