中医药调节肝纤维化相关因子的研究进展

1、中医药调节肝纤维化相关因子的研究进展    【摘要】  肝纤维化发生、发展过程中和体内多种细胞因子合成与功能失调有关。肝星状细胞的激活、表型改变并分泌大量的细胞外基质是肝纤维化发生的中心环节。而细胞因子在肝星状细胞的活化、表型改变中扮演重要角色。目前中医药对肝纤维化相关因子的研究取得一定进展。 【关键词】  肝纤维化；肝星状细胞；细胞因子；中医药；综述Abstract：Liver fibrosis in the development process is related to synthesis of a variety of cy

2、tokines and dysfunction in vivo.The activation of hepatic stellate cell phenotype change and secretion of extracellular matrix of liver fibrosis is the central link.And cytokines play an important role in hepatic stellate cells activation and phenotype changes.Chinese medicine for liver fibrosis?rel

3、ated factors research achieved definite progress.Key words：liver fibrosis；hepatic stellate cell；cytokines；Chinese medicine； review    肝纤维化（Hepatic fibrosis，HF）是指肝脏内细胞外基质的合成大于降解，导致纤维结?组织异常过度沉积。HF是多种慢性肝病病情发展的共同病理基础，是发展至肝硬化的必经阶段。肝纤维化发生、发展过程中和体内多种细胞因子合成与功能失调有关。近年来,有些学者通过对HF发生机制的研究发现,肝星细胞（

4、HSC）的激活、表型改变并分泌大量的细胞外基质是HF发生的中心环节1。而细胞因子在肝星状细胞的活化、表型改变并分泌大量的细胞外基质中扮演重要角色2。    各种细胞因子根据其细胞因子在肝纤维化过程中所起的作用,可大致分为两大类：促进因子和抑制因子。前者包括如转化生长因子（TGF?拨拢?、血小板衍生生长因子（PDGF）、白介素1、6、13（IL?1、6、13）、瘦素（leptin）、结缔组织生长因子（CTGF）、血管紧张素（ANG）、基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）、肿瘤坏死因子?拨粒?TNF?拨粒龋缓笳咴蛑饕?为干扰素（IFN）家族,包括IFN?拨梁?IFN?拨

5、靡约鞍捉樗?10（IL?10）、肝细胞生长因子（HGF）、 基质金属蛋白酶家族（MMPS）等。近年来中医药在抗肝纤维化研究中取得了较大进展，对各种相关因子的作用也有较深入的阐述，现将研究现状，综述如下。1  对促进因子的作用1.1  结缔组织生长因子（CTGF） CTGF是一种新发现的细胞因子，在不同组织器官中，因其作用部位不同,表现出不同的生物学功能。在肝纤维化中CTGF是TGF?拨碌南掠涡葜?,介导了TGF?拨露约渲氏赴?的作用，如促进其增殖及胶原合成3。中医药可通过降低CTGF达到治疗肝纤维化的作用。贺松其等4用免疫组化方法观察鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠肝组织C

6、TGF的表达，示其能有效治疗复合因素诱导的大鼠肝纤维化，其作用机理可能是通过抑制肝纤维化组织CTGF的表达，进而阻断TGF?拨麓俳涸?合成作用、抑制细胞外基质的合成，最终延缓肝纤维化的进程。1.2  瘦素（leptin） 瘦素是主要由白色脂肪组织产的由肥胖基因所编码的一种的分泌型蛋白质5，能促进HSC的增殖,抑制HSC的凋亡，介导肝星形细胞产生细胞外基质,导致肝纤维化的产生6。董培红等7用不同浓度的川芎嗪培养大鼠的HSC细胞，用ELISA法检测其上清液瘦素型和胶原水平发现川芎嗪抑制HSC增殖，并抑制型胶原表达和瘦素的表达，提示川芎嗪也有可能通过减少HSC瘦素的表达使胶原合成

7、减少，达到抗肝纤维化的作用。1.3  转化生长因子?（TGF?拨拢?  TGF?拨率蔷哂写俳?细胞生长和转化特性的一类物质，在其超家族中，TGF?拨?1在肝纤维化形成和发展中起着重要作用8。主要是活化肝星状细胞（HSC）：通过促进HSC细胞增殖、表型的转换、与功能的改变,生成与分泌大量ECM,并沉积于肝脏,促使肝纤维化的形成与发展，并可抑制肝细胞再生,诱导肝细胞凋亡。有学者研究显示中药冬虫夏草的提取物虫草多糖脂质体,鳖甲、莪术等合剂抗纤软肝冲剂及中药复方护肝片既能分别下调TGF?拨?1的基因转录9和抑制TGF?拨?1蛋白的表达10，又能在其基因转录、蛋白表达双水平同时起作用

8、11。1.4  血小板衍生的生长因子（PDGF）  PDGF主要由肝内枯否细胞和产生,也是一种重要的促分裂剂,能刺激多种与肝纤维化有关的细胞分裂和增殖,如经PDGF 作用的HSC细胞贮存的脂滴消失,转换为能产生ECM的肌成纤维细胞,合成大量ECM,活化的HSC分泌活性PDGF,又进一步刺激HSC,形成了PDGF自分泌循环以维持HSC于活化状态。另外还可诱导HSC合成IGF（胰岛素样生长因子）,TGF等细胞因子外,并通过增加IGF而刺激HSC增殖的作用。近来研究用中药、中药复方、中药联合西药都有减少PDGF而减轻肝纤维化的作用。姚希贤等13用血清药理学的方法研究益肝康，发现其

9、复方及拆方不仅有抑制PDGF基因和蛋白表达同时抑制其受体的基因和蛋白表达，且全方作用优于拆方。单用抗纤二号、吡喹酮对小鼠日本血吸虫病肝纤维化PDGF 表达的影响有限，但将此两种药物合用后PDGF?BB下降显著，提示中西药合用有助于提高疗效14。1.5  肿瘤坏死因子（TNF?拨粒? 通常认为TNF?拨潦墙榈几嗡鹕说闹饕?和终末介质，且与其他细胞因子相互影响并形成调节网络，加强HSC的趋化性,促进HSC的增殖和转化，对肝纤维化的启动及调控起重要作用。甘乐文等15发现：氧化苦参碱具有下调血清TNF?拨了?平的作用,且呈剂量依赖性，提示氧化苦参碱抑制胶原合成度和抗肝纤维化作用的机

10、制可能与下调血清TNF?拨了?平有关。2  对抑制因子的作用2.1  干扰素（INF） 干扰素包括 INF?拨梁? IFN?拨茫?是肝脏免疫反应的重要因子之一，在临床实践中已证实具有良好的抗肝纤维化作用。目前研究显示INF的作用较复杂，通过以下多种途径发挥抗肝纤维化作用：通过抑制HSC的活化和增殖,降低ECM的沉积；通过抑制肝内病毒复制及减轻炎症反应降低肝纤维化发生和进展；抑制肝脏胶原的合成及促进其降解；通过抑制胶原蛋白基因的表达及上调基质金属蛋白酶及其抑制剂的活性等降低胶原的沉积；抑制TGF2B的表达；抗脂质过氧化作用。中医药在治疗肝纤维化过程中能增加INF的表

11、达，因而推测其可能通过诱导内源性INF的产生来实现的。刘春宇16、韩晓静17分别用沙苑子黄酮、大黄蛰虫丸观察中药对四氯化碳（CCL4）诱导的大鼠肝纤维化的影响。用ELISA 法检测血清IFN?拨谩?TGF?拨?1蛋白含量，发现其不仅有改善肝功能、减轻肝脏纤维化病理改变，而且有上调IFN?勃拨谩碌?TGF?拨?1的作用，提示上调IFN?拨玫谋泶锸瞧淇垢蜗宋?化的可能机制之一。用黄芪治疗人肝纤维化后检测相关细胞因子，也验证了动物实验的结果，提示中药诱导内源性IFN?拨貌?生在动物和人肝纤维化治疗中有良好的一致性 18。2.2  肝细胞生长因子（HGF）  肝细胞生长因子由非实质

12、细胞如HSC、窦状内皮细胞产生的多效性的细胞因子,在刺激肝细胞增殖和抑制肝纤维化中起重要作用：HGF可以减少前胶原mRNA的表达水平、抑制TGF?拨?1mRNA的表达、保护肝细胞、促进肝细胞增殖与成熟。晏维19用肝炎平作用血吸虫性感染后肝纤维化家兔，用苏木精?惨梁烊旧?观察肝脏病理形态改变，免疫组化法检测各组HGF、TGF?拨?1在肝内的表达；RT?PCR和Westernblot法分别检测各组HGF、TGF?拨?1mRNA和蛋白表达水平发现肝炎平能促进HGF的表达而抑制TGF?拨?1，因而认为增加HGF表达是其可能的机制之一。 2.3  血管紧张素（ANG） 近来研究发现血

13、管紧张素在肝纤维化的发生发展中也扮演着重要角色，血管紧张素主要通过直接刺激肝星状细胞使其活化、增殖，促进ECM的沉积；增加肝纤维化促进因子TGF?拨隆?PDGF、核因子（NF?拨?B）及整合素等的合成和分泌及减少抑制因子HGF的合成和分泌、下降金属蛋白质酶组织抑制因子MMP?1活性，增高MMP?2,-9活性导致胶原代谢失常等。杨玲20用莪术提取物治疗大鼠肝纤维化过程中发现其有降低大鼠血管紧张素及其型受体表达，提示其抗纤维化作用机理可能与干扰血管紧张素分泌及阻断AT1受体的表达有关。2.4  基质金属蛋白酶家族（MMPS）和基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs） 肝纤维化的主要病

14、理变化是ECM的合成和降解失衡导致其在肝脏中的过多沉积、重构。基质金属蛋白酶-基质金属蛋白酶抑制剂是肝脏ECM代谢的主要调节因素，前者促进降解，后者是对前者降解作用的抑制。当MMPs?TIMPs功能失调会导致ECM沉积增多和纤维化的发生。邱德凯21从基因水平研究冬虫夏草抗肝纤维化机理,表明该中药通过促进肝组织胶原酶mRNA表达而促使、胶原降解的。苦参素对CCl4诱导的肝纤维化有预防及治疗作用,其部分机制为通过减少MMP?2mRNA、MMP?2活性蛋白的表达、抑制其活性，促进细胞外基质（ECM）的降解,并使肝窦基底膜的完整性得以保持,从而减轻或逆转肝纤维化22。3  其它 &

15、#160;  白细胞介素（IL）家族中既有促进又有抑制肝纤维化形成的因子，IL?4、IL?10抑制HSC的激活，IL?1，IL ?6可促进肝HSC细胞增殖，刺激HSC合成胶原蛋白。成扬等23 应用氧化苦参碱作用小鼠免疫性肝纤维化模型，发现其可抑制肝组织胶原纤维增生，下调IL?4、IL?10的表达水平。中药复方肝纤灵不同剂量能使机体内的 IL?1、IL?6和 TNF?拨恋谋浠?趋于正常，其中尤以中剂量组作用显著，其抗肝纤维化作用与 IL?1、IL?6和 TNF?拨恋认赴?因子直接相关24。    另外，中药还能调解与肝纤维化相关的因子如细胞内皮素（ET?1

16、）、核因子KB（NF?KB）、细胞间粘附分子（ICAM?1）、血管内皮生长因子（VEGF）等。限于篇幅，在此暂不叙述。4  展望    综上所述，中医药在肝纤维化相关因子的研究中取得了较多的成果，但同时也存在一些问题需要解决。主要有1.范围局限：与肝纤维化相关的因子众多，目前中医药对其研究的范围大多限于几种主要的因子。2.机制欠清：现有的研究对于中药复方的有效活性成分及其相互作用机制难以阐明。3.研究对象单一：肝纤维化过程中细胞因子的作用是综合的，研究单个因子或研究因子的某个作用仍是目前研究的主流。4.研发脱节：不少研究只是限于动物阶段，缺少进一步的临床

17、试验。5.模型单一：动物实验模型比较单一，与临床常见的病毒性肝炎所致肝纤维化有一定差距。    因此，我们应在传统医学理论的指导下，借助现代医学的研究成果和方法，针对研究中出现的问题，对中医药抗肝纤维化进行系统、详细的分析；同时在动物造模上拓宽思路，综合考虑，通过对病毒性肝炎,酒精性肝炎及脂肪肝等所致肝纤维化病因、病理的研究，针对主要病因,建立能真实、客观反映人类肝纤维化的发病机理的动物模型。在今后的研究工作中,一方面要寻找新的有效成分,另一方面可开展已有的几种有效成分之间的作用比较,去粗取精,进一步阐明不同成分的主要作用机制,以寻找疗效更佳的药物。【参考文献】&

18、#160; 1Cassiman D，Libbrecht L，Desmet V，etal.Hepatic stellate cell/ myofibroblast subpopulations in fibrotic human and rat liversJ.J Hepatol,2002,36：2002,209.2Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosisJ.J Clin Invest 2005，115（2）：209?218.3Frazier K，Williams S，Kothapalli D，et al.Stimulation of fibroblast cel

19、l growth，matrix production，and granulation tissue formation by connective tissue growth factor.Invest Dermatol,1996，107（3）：404?11.4贺松其.鳖甲煎丸对肝纤维化模型大鼠结缔组织生长因子的影响J.辽宁中医杂志,2005，32（12）：1334?1335.5Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosisJ.J Clin Invest，2005，115（2）：209?218.6Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosis

20、J.J Clin Invest，2005，115（4）：1100.7董培红,郑宇,朱碧红,等.川芎嗪对大鼠肝星状细胞胶原合成及瘦素表达的影响J.实用医学杂志,2005，21（23）2613?2615.8Akiyoshi S，Ishii M，Nemoto N，Kawabata M，Aburatani H，Miyazono KJ.Jpn J Cancer Res,2001，92：257?268.9李泓俊,彭欣辉,吴应莲,等.虫草多糖脂质体对小鼠免疫性肝纤维化TGF?拨?1mRNA表达的影响J.医学临床研究，2004，21（5）：500?503.10周正,刘丽萍,张赤志,等.抗纤软肝冲剂对肝星状细胞自分泌转化生长因子的影响J.中国中医药信息杂志,2003，10（9）：21?22.11严茂祥.中药肝力克对实验性肝纤维化的影响J.浙江中医学院学报,2003，27（5）：55.13姚希贤,房红梅,王军民.拆方益肝康与药物血清对肝星状细胞PDGF及受体表达的影响J.世界消化杂志，2005，13（12）：1412?1416.14余治健,向选东,李萍等.抗纤二号治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化疗效观察及对肝脏PDGF表达的影响J.四川医学,2