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1、课题课题2多聚酶链式反应（多聚酶链式反应（PCR)扩增扩增DNA片段片段温故知新温故知新1o组成组成DNA分子的基本单位是什么分子的基本单位是什么?o这些基本单位是如何连接成这些基本单位是如何连接成DNA分子的分子的?oDNA分子结构有什么特点？分子结构有什么特点？12345碱基碱基OHOOPOHOOHOOPOHO碱基碱基OHOHOOPOHO碱基碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基535533DNADNA分子的复制需要哪些条件？分子的复制需要哪些条件？DNADNA分子的复制过程是怎样的？分子的复制过程是怎样的？温故知新温故知新2DNADNA母链：母链：提供复制的模板提供复制的模板解旋酶：解旋酶：

2、打开打开DNADNA双链双链4 4种脱氧核苷酸：种脱氧核苷酸：合成子链的原料合成子链的原料DNADNA聚合酶：聚合酶：催化合成催化合成DNADNA子链子链ATPATP：为复制过程提供能量为复制过程提供能量引物：引物：使使DNADNA聚合酶从引物的聚合酶从引物的3 3端开端开始连接脱氧核苷酸始连接脱氧核苷酸一、一、PCR原理：原理：oPCR（多聚酶链式反应）技术（多聚酶链式反应）技术n是一种体外迅速扩增是一种体外迅速扩增DNA片段的技片段的技术，它能以极少量的术，它能以极少量的DNA为模板，为模板，在几小时内复制出上百万份的在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。拷贝。n利用了利用了DNA的热变性

3、的热变性原理，通过控原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。制温度来控制双链的解聚与结合。DNADNA母链：母链：提供复制的模板提供复制的模板解旋酶：解旋酶： 打开打开DNADNA双链双链4 4种脱氧核苷酸：种脱氧核苷酸：合成子链的原料合成子链的原料DNADNA聚合酶：聚合酶： 催化合成催化合成DNADNA子链子链ATPATP：为复制过程提供能量为复制过程提供能量引物：引物：使使DNADNA聚合酶从引物的聚合酶从引物的3 3端开端开始连接脱氧核苷酸始连接脱氧核苷酸8080100100耐热的耐热的DNADNA聚合酶聚合酶缓冲溶液：缓冲溶液：维持反应的维持反应的pHpH值不变值不变 温度上升到温度上升到9090以上以上时时, ,双链双链DNADNA解聚解聚成为单链。成为单链。 温度下降到温度下降到5050左右左右, ,引引物与模板物与模板DNADNA单链单链的互补序列配对的互补序列配对结合结合。 温度上升到温度上升到7272左右左右, ,溶液中溶液中的的4 4种脱氧核苷酸在种脱氧核苷酸在Taq Taq DNADNA聚

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