传递窗验证方案

1、传递窗验证方案Validation protocol of the delivery windows编号Code：版本Version：编写Prepared by:日期Date:审核人日期Reviewed byData批准 Approved by:日期 Date:变更记录Change Log版本号变更描叙变更细节批准日期VersionDescriptionSection changedRelease Date目录Contents1 简介是一种洁净室的辅助设备，主要用于洁净区与洁净区之间，洁净区与非洁净区之间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，使洁净室的污染降低到最低程度。传递窗内安装有紫外灯

2、，物品经紫外线照射消毒后进入洁净区。紫外线是一种电磁辐射，波长 190 350nm，其中以的杀菌力最强，可使 DNA链上相邻嘧啶碱基之间形成二聚体，抑制 DNA的复制，导致突变或死亡。紫外线的杀菌力与紫外线强度、照射时间、温度和湿度等因素有关。本方案包括该设备的安装确认、运行确认和性能确认等内容。在确认过程中出现任何偏差，必须及时解决偏差之后再进行下一步的确认。2 实施计划实施内容时间安排安装确认运行确认性能确认3 验证小组成员部门姓名职责QA负责验证方案、验证报告的批准负责验证方案、验证报告的审核负责验证方案、 验证报告的审核， 指导和监督方案的实施QC负责验证方案、验证报告的起草，参加方案

3、的实施负责验证方案、验证报告的审核，协助方案的实施4仪器及用具名称型号或规格校验单位校验编号有效期细菌培养箱GNP-9270 型广州市计量所霉菌培养箱SHP-150 型广州市计量所数显式温湿度计DWS508D广州市计量所紫外线强度测定仪TN-2254广州市计量所净化工作台HS-1300-V 型电动混匀器G560E移液器 10ul移液器100 1000ul5菌株和培养基名称批号生产厂家营养琼脂培养基改良马丁琼脂培养基营养肉汤培养基改良马丁培养基金黄色葡萄球CMCC（ B） 26003枯草芽孢杆菌CMCC （ B） 63501大肠杆菌CMCC（ B） 44102白色念珠菌CMCC（ F） 9800

4、16 安装确认由供应商技术人员作为主要安装人员，工程部人员协助安装。安装过程中对装置及其工作状态进行检查。 若确认过程中发现因为紫外灯管不符合要求而造成偏差，工程部人员负责紫外灯管的申购与更换。将安装确认结果记录于附件1 和附件 2。确认项目描叙工作环境确认传递窗应安装在非洁净区（培养室）与洁净区（洁净走廊）之间。非洁净区温度应为 18 27；相对湿度应为40% 80%。电源确认设备的电源应正确连接，工作电源：AC （ 220±22） V 。确认紫外灯管功率。紫外灯管应正常，无损坏，匹配，紧密连接。装置确认传递窗侧门垫圈应配套、密合、完好。传递窗内部与紫外灯管表面应清洁，表面无尘土。

5、传递窗内表面材质应为不锈钢，平整光洁耐磨。备件确认是否有相同型号规格的紫外灯管备用。7运行确认运行确认在安装确认之后进行，若安装确认出现偏差，须在解决偏差之后进行。通过对传递窗进行试运行，以证明设备各项技术参数和功能能达到本公司设定要求。将运行确认结果记录于附件3 和附件4。SOP 确认：确认是否有传递窗使用的SOP，作为传递窗使用操作的技术支持与指导。验证全过程必须严格按照此SOP 对传递窗进行操作。设备操作功能确认：逐项确认各项操作功能，结果均应符合要求。互锁确认 : 两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。辐照强度测定：开启紫外灯5min 后，用中心波长为的紫外线强度测定仪在

6、灯管下方垂直中心操作面处测量其辐照度值（uW/cm 2）。普通型或低臭氧型直管紫外灯，新灯管的辐照度值应为：功率10W ， 65uW/cm2 ；功率 15W ， 145uW/cm 2。使用中的灯管其辐照度值：功率10W ， 45uW/cm 2；功率 15W ，100uW/cm 2，低于此值者应予以更换。7.5 紫外强度分布：开启紫外灯5min 后，在传递窗底部测量中央及四角5 个位置的紫外线强度（ uW/cm 2），确定紫外线强度最弱位置。以紫外线强度最弱位置达到所需照射剂量的时间作为消毒合格时间。洁净区5非洁净区8性能确认确认紫外灯对细菌及其芽孢和真菌的杀灭效果。性能确认在运行确认之后进行，

7、若运行确认出现偏差，须在偏差解决之后进行。培养基的制备8.1.1营养琼脂培养基配方：营养琼脂培养基粉纯化水1000ml配制：称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至 ±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121 ×15 分钟。改良马丁琼脂培养基配方：改良马丁琼脂培养基粉纯化水1000ml配制：称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调 pH 至 ±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115 ×20 分钟。营养肉汤培养基配方：营养肉汤培养基20g纯化水1000ml配制：称取营养肉汤培养基20 克

8、，加1000ml 纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121 ×15 分钟。改良马丁培养基配方：改良马丁培养基粉纯化水1000ml配制：称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至 ±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115 ×20 分钟。菌悬液的制备8.2.1接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,3035培养 1824 小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,23 28培养 1824 小时。8.1.1细菌芽孢悬液的制备：8.1.1.1取枯草芽孢杆菌增菌液适量至营养琼脂

9、培养基斜面，使菌液布满营养琼脂培养基斜面， 30 35培养5 7 天。用接种环取菌样少许涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在显微镜（油镜）下进行镜检。当芽孢形成率达95以上时，即可进行以下处理。否则，应在室温下放置一定时间，直至达到上述芽孢形成率后再进行以下处理。8.1.1.2取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，以L 棒轻轻推刮下菌苔。吸出第一批洗下的菌悬液， 再取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，重复洗菌一遍。 将第一和第二批洗下的菌悬液集中于一含玻璃珠的无菌三角烧瓶内，振摇 5min，打碎菌块，使成均匀的芽孢悬液。8.1.1.3将芽孢液放于 80水浴中 10min （或 60， 30m

10、in ），以杀灭残余的细菌繁殖体。待冷至室温后，保存于4冰箱中备用。有效使用期为半年。8.2稀释液1蛋白胨 PBS 溶液：取磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、蛋白胨，加水1000ml ，微温溶解，分装，置高压灭菌器121×30 分钟灭菌。8.3菌片的制备8.3.1试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成（×的不锈钢片）。所用载体染菌前应进行脱脂处理。脱脂方法如下： 将载体放在含肥皂的水中煮沸30min ；纯化水洗净；纯化水煮沸10min ；用纯化水漂洗至pH 呈中性；晾干备用。载体经灭菌后使用滴染法染菌。将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注10ul 菌悬液，用10ul 移液器接灭

11、菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后，染菌载体可置超净台上晾干后使用。每个菌片的染菌量即回收菌量应为1×105 5× 106cfu/ 片。8.4载体定量消毒试验取 4 种菌染菌载片各4 个。开启紫外灯5min 后，将 16 个染菌载片平放于无菌平皿内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4 个不同间隔时间（ 15min 、30 min 、 45 min 、60min ）各取出 1 个染菌玻片，分别投入 4 个盛有 10ml 稀释液的试管中，用电动混匀器震荡20s 或振打 80 次，洗脱载片上的菌体。8.4.2取洗脱液或其稀释液 1ml ，作平板倾注

12、。细菌放30 35培养 48 小时做活菌计数，真菌放 23 28培养 72小时做活菌计数。8.4.3阳性对照，除不做照射处理外，操作同上。8.4.4杀灭对数值计算杀灭对数值（ KL）对照组活菌浓度对数值- 试验组活菌浓度对数值8.4.5消毒合格时间在照射强度最弱处， 对细菌及其芽孢和真菌的杀灭对数值3 所需的时间即为消毒合格时间。 其它传递窗， 确定最弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合格时间。照射剂量（ uW· s/cm2）紫外线照射强度（uW/cm 2 ）×时间（ s）将性能确认结果记录于附件5。9 再验证9.1传递窗构造或紫外灯管安装位置发生改变时，需进行再验证。9.2若无任何改变或偏差时，每6 个月对该系统进行紫外灯强度确认。10 修改事项在实施过程中，如果方案需要修改，必须提交书面报告，阐述修改的原因、修改的内容，并经过相关部门及QA 的认可