非生物及生物胁迫下脱水蛋白研究进展

1、非生物及生物胁迫下脱水蛋白非生物及生物胁迫下脱水蛋白研究进展研究进展Progress in Research of Dehydrins Response to Abiotic and Biotic Stresses 非生物及生物胁迫下脱水蛋白的研究进展非生物及生物胁迫下脱水蛋白的研究进展 23与大分子结合的脱水蛋白与大分子结合的脱水蛋白与小分子结合的脱水蛋白与小分子结合的脱水蛋白无序结构的脱水蛋白无序结构的脱水蛋白14参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白植物与非生物逆境胁迫植物与非生物逆境胁迫膜脂相变膜脂相变排列紊乱排列紊乱形成孔隙形成孔隙脂质过氧化脂质过氧化疏水基团外翻疏水基团外翻从

2、膜上脱落从膜上脱落流动性降低流动性降低膜脂、蛋白解体膜脂、蛋白解体细胞内容物外漏细胞内容物外漏离子、渗透平衡破坏离子、渗透平衡破坏植物与非生物逆境胁迫植物与非生物逆境胁迫第一个脱水蛋白的发现第一个脱水蛋白的发现4个干旱诱个干旱诱导蛋白导蛋白 ABA处理处理的大麦胡的大麦胡粉粒粉粒 干旱处理干旱处理的玉米幼的玉米幼苗苗 &1989年年脱水蛋白脱水蛋白Dehydrin植物应对逆境胁迫的代谢和分子基础植物应对逆境胁迫的代谢和分子基础脱水蛋白相关背景脱水蛋白相关背景-1980s，第一次报道脱水蛋白，第一次报道脱水蛋白-Late embryogenesis abundant protein, 第

3、第2组组LEA蛋白蛋白-第第2组组-Y，S和和K片段片段-5个亚类个亚类(Kn、SKn、KnS、YnKn和和YnSKn )三个保守片段三个保守片段脱水蛋白相关背景脱水蛋白相关背景碱性或酸性碱性或酸性干旱干旱&ABA酸性酸性低温低温&干旱干旱酸性或中性酸性或中性低温低温酸性酸性干旱干旱&低温低温酸性酸性低温低温无序结构的脱水蛋白无序结构的脱水蛋白 缺乏有序的高级结构是脱水蛋白最基本的缺乏有序的高级结构是脱水蛋白最基本的生化特征之一生化特征之一 脱水蛋白富含甘氨酸、带电荷氨基酸和极脱水蛋白富含甘氨酸、带电荷氨基酸和极性氨基酸性氨基酸 大部分脱水蛋白不含有半胱氨酸残基或其大部

4、分脱水蛋白不含有半胱氨酸残基或其他疏水结构域他疏水结构域 无序结构的脱水蛋白无序结构的脱水蛋白 无序蛋白无序蛋白生理状态或天然状态下没有特定高级结构的生理状态或天然状态下没有特定高级结构的蛋白质总称，蛋白质总称， 约占真核生物总蛋白的约占真核生物总蛋白的1/3 细胞内的无序蛋白可以分为完全无序蛋白和部分无序蛋白细胞内的无序蛋白可以分为完全无序蛋白和部分无序蛋白 无序蛋白的发现是对经典的无序蛋白的发现是对经典的“结构结构-功能功能”范式的挑战范式的挑战 无序蛋白灵活易变，有与多种底物结合的潜能，是细胞中无序蛋白灵活易变，有与多种底物结合的潜能，是细胞中的高效部队，是目前蛋白质组学研究中的重点与热

5、点的高效部队，是目前蛋白质组学研究中的重点与热点无序蛋白无序蛋白无序蛋白的基本特征无序蛋白的基本特征 以无序卷曲的形式存在于水溶液中以无序卷曲的形式存在于水溶液中 100.00Total100.00无序卷曲无序卷曲0.00-转角转角0.00-折叠折叠0.00-螺旋螺旋占肽链的百分百占肽链的百分百 (%) 二级结构名称二级结构名称无序蛋白的基本特征无序蛋白的基本特征 高温处理不发生沉淀高温处理不发生沉淀无序蛋白无序蛋白 vs 蛋白变性聚集蛋白变性聚集MpASR热稳定性分析热稳定性分析无序蛋白热稳定性分析无序蛋白热稳定性分析BSA(-)表示未经表示未经100热处理的热处理的BSA蛋白；蛋白；BSA

6、(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；MpASR(-)表示未经表示未经100热处理的热处理的MpASR蛋白；蛋白；MpASR(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的MpASR蛋白。蛋白。 无序蛋白的基本特征无序蛋白的基本特征 SDS-PAGE电泳迁移率较小电泳迁移率较小 对蛋白酶高度敏感对蛋白酶高度敏感 结构柔韧，可在无序与有序间变换结构柔韧，可在无序与有序间变换 无序蛋白的生物学优势无序蛋白的生物学优势 易结合性：由于无序结构呈线状延伸，使得它很容易被其易结合性：由于无序结构呈线状延伸，使得它很容易被其他分子所识别和结合；可以在较大范围内与其他蛋白

7、质或他分子所识别和结合；可以在较大范围内与其他蛋白质或大分子结构结合，其功能位点能够高效的与其他大分子进大分子结构结合，其功能位点能够高效的与其他大分子进行结合和组装行结合和组装 空间优越性：无序结构可以节省空间，未折叠多肽在细胞空间优越性：无序结构可以节省空间，未折叠多肽在细胞中所占据的空间与具高级结构的大分子相比要小的多；当中所占据的空间与具高级结构的大分子相比要小的多；当多个蛋白质同时结合于某一位点时，无序结构可以使这种多个蛋白质同时结合于某一位点时，无序结构可以使这种结合更紧密；同时还有利于完成互作后，不同成分的转换结合更紧密；同时还有利于完成互作后，不同成分的转换 高度协调性，大范围

8、、多组分的互作结合需要高度的协调，高度协调性，大范围、多组分的互作结合需要高度的协调，无序蛋白中所含的多个重复结合基序可以有效地协调蛋白无序蛋白中所含的多个重复结合基序可以有效地协调蛋白间的相互作用，使得大分子的组装与分解更加高效间的相互作用，使得大分子的组装与分解更加高效与大分子结合的脱水蛋白与大分子结合的脱水蛋白 脱水蛋白高度保守结构基元脱水蛋白高度保守结构基元K片段可以形成片段可以形成双亲性双亲性-螺旋，与大分子膜脂结合螺旋，与大分子膜脂结合 利用去垢剂，可以从膜碎片小泡中分离到脱水蛋利用去垢剂，可以从膜碎片小泡中分离到脱水蛋白白 氨基端的氨基端的Y-片段含有核酸结合结构域，因此脱水片段

9、含有核酸结合结构域，因此脱水蛋白还可能与核酸结合蛋白还可能与核酸结合 柑橘脱水蛋白柑橘脱水蛋白CuCOR5具有锌离子依赖的核酸结具有锌离子依赖的核酸结合功能合功能 与核酸的结合不是脱水蛋白的保守功能与核酸的结合不是脱水蛋白的保守功能与大分子结合的脱水蛋白与大分子结合的脱水蛋白 利用哺乳动物纤维母细胞筛选系统的研究表明拟利用哺乳动物纤维母细胞筛选系统的研究表明拟南芥南芥ERD10与与COR47是与细胞骨架互作的蛋白是与细胞骨架互作的蛋白 ERD10可以直接与肌动蛋白微丝结合，抑制肌动可以直接与肌动蛋白微丝结合，抑制肌动蛋白聚合蛋白聚合 磷脂质，核酸和细胞骨架这一类的大分子是细胞磷脂质，核酸和细胞

10、骨架这一类的大分子是细胞遭受胁迫时比较敏感的大分子。对脱水蛋白的研遭受胁迫时比较敏感的大分子。对脱水蛋白的研究表明，与这些大分子的结合可能是脱水蛋白在究表明，与这些大分子的结合可能是脱水蛋白在植物细胞遭受胁迫时发挥保护功能的关键植物细胞遭受胁迫时发挥保护功能的关键与小分子结合的脱水蛋白与小分子结合的脱水蛋白 水分胁迫可能引起从细胞器或膜上释放金水分胁迫可能引起从细胞器或膜上释放金属离子，从而导致细胞内自由金属离子浓属离子，从而导致细胞内自由金属离子浓度增大，而脱水蛋白与金属离子的结合可度增大，而脱水蛋白与金属离子的结合可以减轻由自由离子造成的伤害以减轻由自由离子造成的伤害金属离金属离子结合性子

11、结合性 分离得到的玉米胚的分离得到的玉米胚的Rab17蛋白是磷酸化形蛋白是磷酸化形式的，这是第一次报道脱水蛋白的磷酸式的，这是第一次报道脱水蛋白的磷酸化化 与磷酸基团结合性与磷酸基团结合性与小分子结合的脱水蛋白与小分子结合的脱水蛋白 各种逆境胁迫还会引起活性氧的积累各种逆境胁迫还会引起活性氧的积累 活性氧首先是对生物膜系统造成损伤，导致细胞膜过氧化，活性氧首先是对生物膜系统造成损伤，导致细胞膜过氧化，超氧化物歧化酶和其他清除自由基的酶类活力下降，同时超氧化物歧化酶和其他清除自由基的酶类活力下降，同时产生大量的膜脂过氧化产物，破坏膜脂的完整性和稳定性；产生大量的膜脂过氧化产物，破坏膜脂的完整性和

12、稳定性；膜系统的破坏会引起一系列生理生化紊乱。膜系统的破坏会引起一系列生理生化紊乱。ROS还对生物还对生物大分子如蛋白质和核酸造成氧化损伤大分子如蛋白质和核酸造成氧化损伤 脱水蛋白具有与活性氧分子结合的能力，对柑橘脱水蛋白具有与活性氧分子结合的能力，对柑橘CuCOR19蛋白的研究表明，蛋白的研究表明，CuCOR19蛋白能特异结合羟蛋白能特异结合羟基自由基和过氧化自由基的能力，羟基自由基作用的靶位基自由基和过氧化自由基的能力，羟基自由基作用的靶位点主要是点主要是Gly、His和和Lys，而脱水蛋白中富含这些氨基酸，而脱水蛋白中富含这些氨基酸，因此脱水蛋白可能在活性氧爆发的情况下通过自我牺牲的因此

13、脱水蛋白可能在活性氧爆发的情况下通过自我牺牲的方式消耗活性氧从而保护其它蛋白质免受损伤方式消耗活性氧从而保护其它蛋白质免受损伤 脱水蛋白具有活性氧结合与清除能力脱水蛋白具有活性氧结合与清除能力与小分子结合的脱水蛋白与小分子结合的脱水蛋白 脱水蛋白还可以与水分子结合脱水蛋白还可以与水分子结合 在水分胁迫细胞中维持水分，维持渗透压在水分胁迫细胞中维持水分，维持渗透压 保护蛋白在细胞内离子平衡打破时不发生保护蛋白在细胞内离子平衡打破时不发生变性变性脱水蛋白可能发挥功能示意图脱水蛋白可能发挥功能示意图参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白 不同的研究小组发现，水杨酸不同的研究小组发现，水杨酸(S

14、A)和茉莉酸和茉莉酸(JA)可以诱导特殊的脱水蛋白如厚叶旋蒴苣苔的可以诱导特殊的脱水蛋白如厚叶旋蒴苣苔的BcDh2表达表达 值得引起注意的是，值得引起注意的是，SA和和JA通常与植物抗生物胁通常与植物抗生物胁迫相关迫相关 同时，同时，Turco等人发现在抗旱栎树等人发现在抗旱栎树Quercus ilex受受到疫霉菌到疫霉菌Phytophthora cinnamomi侵染时，会表达侵染时，会表达若干个类脱水蛋白若干个类脱水蛋白 这些实验结果均表明，除了参与水分胁迫外，脱这些实验结果均表明，除了参与水分胁迫外，脱水蛋白还可能与生物胁迫相关水蛋白还可能与生物胁迫相关参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫

15、的脱水蛋白 小麦脱水蛋白DHN-5异源表达于拟南芥中时，不仅可以帮助植物抗水分胁迫，还具有多重抗胁迫功能 参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白 DHN-5异源过表达还影响了茉莉酸异源过表达还影响了茉莉酸(JA)信号通路信号通路 茉莉酸茉莉酸ZIM结构域结构域(JAZ)家族三个成员，家族三个成员，JAZ10、JAZ7和和JAZ5均下调表达均下调表达2.5至至10倍不等倍不等 病程相关蛋白家族的病程相关蛋白家族的PR1、PR13和和PR14的转录分的转录分别上调别上调2、2.6和和3.38倍倍 DHN-5转基因株与野生型相比更加耐受转基因株与野生型相比更加耐受JA的处理的处理 参与生物胁迫

16、的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白参与生物胁迫的脱水蛋白小结小结 脱水蛋白在非生物胁迫过程中发挥重要作用，具有脱水蛋白在非生物胁迫过程中发挥重要作用，具有多种功能。有些脱水蛋白可能同时发挥多种功能，多种功能。有些脱水蛋白可能同时发挥多种功能，而一些脱水蛋白只能发挥单一功能。而一些脱水蛋白只能发挥单一功能。 结合酸性磷酸脂、离子和抗冻保护能力被认为是脱结合酸性磷酸脂、离子和抗冻保护能力被认为是脱水蛋白的基本功能。水蛋白的基本功能。 逆境胁迫和病害是影响植物生长发育的一个重要因逆境胁迫和病害是影响植物生长发育的一个重要因素，深入研究脱水蛋白在非生物胁迫和生物胁迫中素，深入研究脱

17、水蛋白在非生物胁迫和生物胁迫中发挥的确切功能不仅有助于更全面的了解植物应对发挥的确切功能不仅有助于更全面的了解植物应对逆境胁迫的机制，还能为开发脱水蛋白在作物改良逆境胁迫的机制，还能为开发脱水蛋白在作物改良中的应用奠定理论基础。中的应用奠定理论基础。博士后期间工作博士后期间工作研究目的、意义及研究路线研究目的、意义及研究路线烟草是重要的经济作物，是云南省财税的重要经济来源。烟草是重要的经济作物，是云南省财税的重要经济来源。干旱等自然灾害给烟草等经济作物的生产造成了重大的损失。干旱等自然灾害给烟草等经济作物的生产造成了重大的损失。探索抗旱等非生物胁迫相关基因资源并阐明其功能对经济作物的生长探索抗

18、旱等非生物胁迫相关基因资源并阐明其功能对经济作物的生长及财政收入有着重要的战略意义及广阔的应用前景。及财政收入有着重要的战略意义及广阔的应用前景。 脱水蛋白响应植物体内多种造成生理性干旱的胁迫脱水蛋白响应植物体内多种造成生理性干旱的胁迫具体功能未知具体功能未知优良的候选基因优良的候选基因研究目的、意义及研究路线研究目的、意义及研究路线研究研究目的目的脱水蛋白在烟草逆境胁迫响应脱水蛋白在烟草逆境胁迫响应过程中发挥的生物学功能过程中发挥的生物学功能研究研究意义意义研究脱水蛋白在胁迫应答过程研究脱水蛋白在胁迫应答过程中发挥的生物学功能，不仅能中发挥的生物学功能，不仅能增加对植物抗逆机理的了解，增加对

19、植物抗逆机理的了解，还可为作物改良提供候选基因，还可为作物改良提供候选基因，具有研究和应用价值具有研究和应用价值研究目的、意义及研究路线研究目的、意义及研究路线研究路线研究路线RACE自然干旱处理自然干旱处理克隆到克隆到contig1045基因基因编码蛋白编码蛋白-17kDaNtDhn17烟草烟草Annotations Nicotiana tabacum Genbank 0502062个注释为脱水蛋个注释为脱水蛋白基因克隆白基因克隆contig1045contig9354 Dehydrin1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析烟

20、草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析contig1045片段的获得片段的获得 contig1045克隆的克隆的cDNA全长及编码蛋白序列全长及编码蛋白序列 contig1045克隆的克隆的cDNA全长及编码蛋白序列全长及编码蛋白序列 1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析表达谱分析表达谱分析DMP,青霉菌灭活菌丝体青霉菌灭活菌丝体,微生物代谢产物微生物代谢产物,植物系统抗病性诱导剂植物系统抗病性诱导剂1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析启动子分析启动子分析启动子序列克隆启动子序列克隆-热不对称热不对称PCR1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱

21、分析烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析启动子分析启动子分析启动子顺式作用元件分析及表达活性检测启动子顺式作用元件分析及表达活性检测顺式作用元件名称顺式作用元件名称可能的功能可能的功能出现频率出现频率ABRE响应响应ABA2ATCT-motif光响应元件光响应元件1BoxI光响应元件光响应元件1BoxIII蛋白结合位点蛋白结合位点1Box-W1真菌激活子响应元件真菌激活子响应元件2CGTCA-motif茉莉酸响应元件茉莉酸响应元件3G-BoxABA响应元件响应元件4GARE-motif赤霉素响应元件赤霉素响应元件2HSE分子伴侣结合元件分子伴侣结合元件2MBS干旱响应元件干旱响应元件3TC-ric

22、h repeat生物胁迫响应元件生物胁迫响应元件3TCA-element水杨酸响应元件水杨酸响应元件4TGACG-motif茉莉酸响应元件茉莉酸响应元件3启动子顺式作用元件分析及表达活性检测启动子顺式作用元件分析及表达活性检测顺式作用元件名称顺式作用元件名称可能的功能可能的功能出现频率出现频率ABRE响应响应ABA2ATCT-motif光响应元件光响应元件1BoxI光响应元件光响应元件1BoxIII蛋白结合位点蛋白结合位点1Box-W1真菌激活子响应元件真菌激活子响应元件2CGTCA-motif茉莉酸响应元件茉莉酸响应元件3G-BoxABA响应元件响应元件4GARE-motif赤霉素响应元件赤

23、霉素响应元件2HSE分子伴侣结合元件分子伴侣结合元件2MBS干旱响应元件干旱响应元件3TC-rich repeat生物胁迫响应元件生物胁迫响应元件3TCA-element水杨酸响应元件水杨酸响应元件4TGACG-motif茉莉酸响应元件茉莉酸响应元件3小结小结RACE - contig1045 - NtDhn17 NtDhn17基因在正常生长植物体内存在本底表达 NtDhn17基因受ABA；自然干旱和高渗胁迫；JA和SA；过氧化氢；微生物代谢产物（DMP）上调表达1 烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析烟草脱水蛋白基因克隆及表达谱分析2 NtDHN17蛋白生物信息学分析蛋白生物信息学分析NtDHN

24、17二级结构预测二级结构预测在线工具在线工具HNNC、MLRC、PHD和和Predator 二级结构以无序卷曲为二级结构以无序卷曲为主主2 NtDHN17蛋白生物信息学分析蛋白生物信息学分析NtDHN17蛋白由蛋白由169个氨基酸组成个氨基酸组成为为Y2SK2类脱水蛋白类脱水蛋白NtDHN17(MW):17,773DaMtDHN(pI):6.81YSK类脱水蛋白保守结构域比对类脱水蛋白保守结构域比对2 NtDHN17蛋白生物信息学分析蛋白生物信息学分析在线工具在线工具/molkit/hydropathy/index.htmlGly 21.

25、3%,亲水值亲水值 1NtDHN17蛋白是亲水素蛋白是亲水素NtDHN17蛋白氨基酸序列分析蛋白氨基酸序列分析在线工具在线工具/molkit/hydropathy/index.htmlGly 21.3%,亲水值亲水值 1NtDHN17蛋白是亲水素蛋白是亲水素NtDHN17蛋白氨基酸序列分析蛋白氨基酸序列分析NtDHN17是无序蛋白是无序蛋白80%氨基酸序列为无序结构氨基酸序列为无序结构 NtDHN17蛋白无序性预测蛋白无序性预测在线工具在线工具http:/prdos.hgc.jp/cgi-bin/top.cgi小结小结NtDHN17蛋白是

26、一个Y2SK2类中性脱水蛋白 NtDHN17蛋白二级结构以无序卷曲为主NtDHN17蛋白是一个高度亲水的无序蛋白2 NtDHN17蛋白生物信息学分析蛋白生物信息学分析3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究 NtDHN17亚细胞定位亚细胞定位细胞核细胞核3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究原核表达获得体外重组原核表达获得体外重组NtDHN17蛋白蛋白IPTG浓度浓度诱导时间诱导时间过柱纯化过柱纯化预测大小：预测大小：17.7kDaSDS-PAGE：25kDa无序蛋白特征之一：迁移率无序蛋白特征之一：迁移率NtDHN17蛋白蛋白生化性质生化性质研究方法研究方法高温诱导变性

27、沉淀高温诱导变性沉淀胰蛋白酶敏感实验胰蛋白酶敏感实验3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究蛋白聚集沉淀实验蛋白聚集沉淀实验无序性无序性亲水性亲水性3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究NtDHN17蛋白无序结构验证蛋白无序结构验证-热稳定性热稳定性热聚集实验表明热聚集实验表明NtDHN17蛋白具有无序蛋白蛋白具有无序蛋白典型特征，在高温处理后不发生聚集沉淀；典型特征，在高温处理后不发生聚集沉淀；与锌离子结合后，获得高级构象，失去了与锌离子结合后，获得高级构象，失去了无序蛋白在高温条件下保持水溶性的特征。无序蛋白在高温条件下保持水溶性的特征。 DHN(-)表示未经热处理的

28、表示未经热处理的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子结合后热处理30分钟的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；BSA(-)表示未经热处理的表示未经热处理的BSA蛋白；蛋白；BSA(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；BSA-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子结合后热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；DHN(-)表示未经热处理的表示未经热处理的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟

29、的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子结合后热处理30分钟的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；BSA(-)表示未经热处理的表示未经热处理的BSA蛋白；蛋白；BSA(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；BSA-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子结合后热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；DHN(-)表示未经热处理的表示未经热处理的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；DHN-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子

30、结合后热处理30分钟的分钟的NtDHN17蛋白；蛋白；BSA(-)表示未经热处理的表示未经热处理的BSA蛋白；蛋白；BSA(+)表示经表示经100热处理热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；BSA-Zn2+(+)表示与锌离子结合后热处理表示与锌离子结合后热处理30分钟的分钟的BSA蛋白；蛋白；3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究NtDHN17蛋白无序结构验证蛋白无序结构验证-蛋白酶敏感实验蛋白酶敏感实验NtDHN17蛋白预测是一个无序蛋白实验证明其的确是一个无序蛋白 SDS-PAGE迁移率 热聚集性1. 蛋白酶敏感性3 NtDHN17蛋白功能初步研究蛋白功能初步研究脱水蛋白脱水蛋白-抗冻保护能力抗冻保护能力均是体外实验获得的结果均是体外实验获得的结果BY-2细胞系细胞系BY-2细胞系细胞系体内防