雅培生化大型生化仪上岗培训

1、6 Sigma 在临床生化检测的应用: Architect c16000 Kasal C, et al. Evaluation of general chemistry assays on the Abbott Architect c16000 clinical chemistry system. Clin Chem 2007;53(S);A175. Alb BCG 15.5 sAlbuminBCG = 15.5 s sAlbumin BCP = 24.3 s sTotal Bilirubin = 11.9 s sCalcium = 10.1 s sCholesterol = 9.1 s sC

2、reatinine = 5.8 s sGlucose = 5.9 s sTotal Protein = 14.8 s sTriglycerides = 14.2 s sLambert-Beers Law 当一束平行的单色光通过一定均匀的某吸当一束平行的单色光通过一定均匀的某吸收溶液时，该溶液对光的吸收程度收溶液时，该溶液对光的吸收程度 与吸光与吸光物质的浓度物质的浓度c和光通过的液层厚度和光通过的液层厚度b的乘积的乘积成正比。这种关系称为朗伯成正比。这种关系称为朗伯-比尔定律，其比尔定律，其数学表达式为数学表达式为 。 A = Kbc c=A *1/kb F=Kb A称为吸光度，称为吸光度，I

3、0和和I分别为入射光和透分别为入射光和透射光的强度，射光的强度，b为光通过的液层厚度，为光通过的液层厚度，c为为吸光物质的浓度，吸光物质的浓度，K为比例常数。为比例常数。b的单位的单位为为cm, 假设假设c的单位以的单位以mol/L表示，那么用表示，那么用表示表示K，称为摩尔吸光系数，单位为称为摩尔吸光系数，单位为L/(molcm)；假设；假设c的单位以的单位以g/L表示，那表示，那么用么用a表示表示K， a称为吸光系数，单位为称为吸光系数，单位为L/(gcm)。由于吸光度与吸光物质浓度的。由于吸光度与吸光物质浓度的关系最为重要，有时又被简称比尔定律。关系最为重要，有时又被简称比尔定律。光学检

4、测原理 光路系统为直接光检测，后分光，采用凹面衍射光栅，有16个检测波长。光路系统主要组成有：卤钨灯，隔热玻璃，凸镜，Shutter，狭缝，反光镜，光栅，线性硅二极管矩阵，前置放大板，数据处理板和CPU板等。光路组件将光聚焦后射入反响杯，当反响杯中的物质发生化学反响时，其吸光度会发生变化。光经狭缝到光栅后被分成不同的波长，线性硅二极管矩阵根据不同波长进行检测。用单波长或双波长测定每个读数点，一般分析工程都使用双波长检测。 关于反响时间 反响时间包括反响杯转盘的转动，转动的时间和转盘周围组件的位置 每次转动都发生在特定的时间和到达特定的位置 反响转盘按逆时针方向每秒旋转近1/4圈41个反响杯的位

5、置使反响杯到达特定位置 每一次旋转，有41个反响杯会经过光路系统，每个反响杯中的吸光度值都会被检测到 关于反响的几个点1.起始位置，样品探针将样品吸入反响杯 2. R1位置，试剂探针1将1试剂或样品稀释液参加反响杯 3.无动作 4.混匀位置1，样品和1试剂或样品稀释液被混匀 45.反响杯经过光路系统被读取吸光度值5.以上总共转了4个1/4圈共164个反响杯位置，此位置为起始1号位置的后一个反响杯的位置总共有165个反响杯。如果样品需稀释，在此位置样品探针将稀释样品吸入放入1号位置的反响杯。 31.如此样品进行ICT检测，在此位置被ICT系统的探针从反响杯吸入稀释样品进行检测 67.R2位置，试

6、剂探针2将2试剂参加反响杯此前时间为5.1分钟 68.混匀位置2，样品/试剂1和试剂2被混匀 6135.为持续旋转孵育时间，当反响杯每经过一次光路系统将被读取吸光度值，总共最多33次读数 136164.反响杯清洗系统对反响杯进行8步清洗步骤 165.此位置为到重新使用的1号位置前的最后一个循环位置至此全部反响时间为9.6分钟 REACTION TIME TABLEsample reagent 1 mix sample & R1Cuvette position:1246768132136reagent 2mixsample + R1 +R2last optic readwash star

7、tfirst4.594.954.54.8Sample + R1 (blank reading)Reaction (sample + R1+ R2) wash start18read point 1read point 17read point 18read point 33blank read optionreact. readtime / flex rate read optionstartR1firstTotal reaction time = 9.9 min. (same for each assay)- 10 -读数点示意图仪 器 详 述 分配组件加液量分配组件加液量 光路光路 反响时

8、间反响时间常见报警常见报警- 6 -雅培诊断各分配组件加液量详述各分配组件加液量详述范围范围步进步进Sample Volume 样本体积样本体积:DS Vol = Diluted sample Volume:稀释样本稀释样本Reagent 1 Volume R1 试剂量试剂量:Reagent 2 Volume R2 试剂量试剂量 :Smartwash Volume 智能冲洗洗液量智能冲洗洗液量Water/Diluent Vol for Conc. Reagent:浓缩试剂使用水或稀释液的量Total Volume in Cuvette:反响杯最小量及最大量反响杯最小量及最大量* Not inc

9、luding over aspiration volume* Water- and reagent volume entered determine the dilution ratio- 7 -Volume Tolerance:Volume range Min/Max Range Precision20 to 50 L nominal +/- 5% /= 2 %51 to 345 L nominal +/- 2.5% /= 0.5%2 to 35 L0.1 L steps2 to 15 L0.1 L steps20 to 345 L1.0 L steps20 to 345 l1 L step

10、s10 to 345 L1.0 steps*0 to 345 L1.0 L steps*Min. 160 lMax. 360 l光路详述光路详述波长波长SpecificationsOptions光径光径测量体积测量体积:读数点读数点:吸光度范围吸光度范围吸光度线性吸光度线性- 8 -16340 380 404 412 444 476 500 524 548 572 604 628 660 700 748 - 8045 mmMono-/Bichromatic(单或双单或双)Min. 160 LMax. 360 LMono Reag.: 1 33 pointsBi Reag.: 1 16 (Bla

11、nk) 17 33 (Reaction)1 33 (每每 18 秒秒)- 0.1 to 3.0 AbsWithin +/- 2 % at 2 Abs工程反响类型工程反响类型 - 11 - 终点法终点法: End up End down 速率法速率法 (Kinetik): Rate up Rate - down- 11 - 终点法终点法:反响到达平衡反响到达平衡单双试剂都可以使用单双试剂都可以使用 双试剂推荐使用双试剂推荐使用Self blank 反响类型反响类型 终点法终点法1反响类型终点法2 TimeSample Dispense + R1R2 addition =Reaction Star

12、t- 9 - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 AbsorbanceTotal Abs Self blank Abs = 未知样本浓度未知样本浓度= D D Abs x cal Factor D D AbsTotal AbsD D AbsSelf blank Abs self blank 可读点范围A1A2Absorbance反响类型反响类型终点法终点法2 - 13 -R2 addition = Reaction StartSample Dispen

13、se + R1反响类型反响类型 速率法速率法 1- 11 - 酶类酶类 - 使用因子使用因子 物质物质 - 定标曲线定标曲线 - 未到达平衡时段未到达平衡时段速率法速率法 :AbsorbanceTime反响类型反响类型 速率法速率法 2 For Enzymes 因子用于计算因子用于计算- 12 -Sample Dispense + R1R2 addition = Reaction StartA1 A2A3A4A5A6A7A8.未知待测物浓度未知待测物浓度 = D D Abs 变化变化 / min x Enzyme Factor or D D Abs 变化变化/ sec x Factor D D

14、 Abs change / min = U/LD D Abs change /sec = kat/L Flex Time Reading 酶的线性扩展 样本稀释样本稀释- 91 -雅培诊断速率法速率法 - FLEX TIME READING 弹性速弹性速率率AbsorbancePhotometric PointsSR1R2Flex Read TimeMain Read Time正常样本正常样本高浓度或高活性样本高浓度或高活性样本Abs RangeSubstrate Depletion- 92 -样本稀释加样本加样本( 2.0 to 35.0 L)用来稀释的用来稀释的反响杯反响杯用量反响的用量反

15、响的反响杯反响杯参加稀释液参加稀释液(10 to 345 L4.5 s x 1 cycle混匀混匀100 L或或 更多更多参加稀释后的样本参加稀释后的样本( 2.0 to 15.0 L)4.5 s x 1 cycle4.5 s x 2 cycles- 94 - 42 -样本稀释CC Application Training- 42 -空 白 选 择 Self - Blank Reagent Blank 试剂空白试剂空白 (R1 + R2 + Water as Sample)(R 1 and Sample)- 43 -终点法终点法 /速率法速率法 试剂空白试剂空白Sample Dispensef

16、irst Reagent DispenseFirst Mix定标过程使用定标过程使用 R1 + R2 + (Sample) = 水, 生理盐水或定标液 APhotometric PointsAbsorbance 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 Second Reagent DispenseSecond MixBLK Abs Range- 44 -错误代码错误代码报警解释报警解释Blank Absorbance RangeBLK一个或多个空白定标的吸

17、光度超出一个或多个空白定标的吸光度超出BLK 限定的范围限定的范围终点法终点法 - SELF BLANKAbsorbancePhotometric PointSample Dispense first Reagent DispenseFirst MixSecond Reagent DispenseSecond Mix151016Self-BlankMain Read Time OptionD DAbs1720253033- 46 -CC Application TrainingFlaggings定标定标- 50 -定 标 的 报 警 设 置7个检测功能个检测功能:试剂空白吸光度检测 定标重复次

18、数间的离散度检测定标重复次数间的离散度检测 斜率检测斜率检测 Factor Comparison Check * SD 检测检测 Monotonic Check * Approximation Convergence Error *- 51 -终点法终点法 /速率法速率法 试剂空白试剂空白Sample Dispensefirst Reagent DispenseFirst Mix定标过程使用定标过程使用 R1 + R2 + (Sample) = Water, Saline or Calibrator APhotometric PointsAbsorbance 1 2 3 4 5 6 7 8 9

19、 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 Second Reagent DispenseSecond MixBLK Abs Range- 44 -错误代码错误代码报警解释报警解释Blank Absorbance RangeBLK一个或多个空白定标的吸光度超出一个或多个空白定标的吸光度超出BLK 限定的范围限定的范围定标定标离散度检测离散度检测AbsorbanceConcentrationC1C2calibrator deviation- 54 -代码代码解释解释Calibrator abso

20、rbance rangeDEV定标几次重复超出限定定标几次重复超出限定定标定标 斜率检测斜率检测AbsorbanceConcentrationBlankCalibrator 1min. & max. allowed Spani.e. between Blank and Cal 1xx- 56 -错错误误代代码码解释解释Slope CheckSPN空白与指定定标点空白与指定定标点浓度间斜率超出范浓度间斜率超出范围围定标方法定标方法定标推荐定标推荐: 在手册上没有官方的明确限定到定标周期或换批号时，建议全线定标换盒进行空白定标选项: Blank 1-Point 2-Point Full-

21、31 -定标设置定标设置 体积体积 2PrintImportUpdateDeleteOKCancelDeletePrintUpdate Lot ChangeCtg. ChangeOver Interval2-Point1-PointBLK - Export C3C4C5C6C7C8 SampleBLK:C1C2S. VolDS.VolD.VolW.VolWater0 WCocain2 150Cocain3 30010.0Blank abs RangeCal DeviationBaseCALIBRATIONQCSmart WashRerun rulesOutline Calib. ModeBla

22、nk / Calib. ReplicationExtrapolation%SpanBLK. Span abs RangeInterval (H)/33LinearCocain4-10.00.00.00.00.0Assay Configuration - Cocain10.010.010.010.0Cocain55001000- 34 -PrintImportUpdateDeleteOKCancelDeletePrintUpdate Lot ChangeCtg. ChangeOver Interval2-Point1-PointBLK - Export C3C4C5C6C7C8 SampleBL

23、K:C1C2S. VolDS.VolD.VolW.VolWater0 WX9080.77 X9080.7710.02.010.0Blank abs RangeCal DeviationAssayConfiguration-OROSO BaseCALIBRATIONQCSmart WashRerun rulesOutline Calib. ModeBlank / Calib. ReplicationExtrapolation%SpanBLK. Span abs RangeInterval (H)/330SplineX908-10.00.00.00.00.0X908X9080.77 0.77 0.

24、77 20.035.035.010.025010.018510.010.010.010.015515090定标设置定标设置 自动稀释自动稀释 2- 37 -CC Application Training- 42 -Flaggings分析结果确认分析结果确认 ASSAY RESULT FLAGGING- 65 -REACTION VALIDITY CHECKS速率法速率法非线性非线性 & 终点法终点法 -AbsMaxVar 检测最终吸光度的变异性- Absorbance Limit 检测在读数窗内吸光度变化的线性-Colour Correction -颜色矫正-Reaction Chec

25、k-检测免疫反应的前代效应（抗原过剩）终点法终点法 - 66 -终点法稳定性的检测终点法稳定性的检测S R1R2Blank Read optionpoint1 up to 17AbsorbancePhotometric PointsMain Read TimeEnd Stability = AbsMxVarMain Read Time option point 18 upt to 33- 67 -代码代码解释解释Main Read TimeABSAbs 超出超出 (0.1 3.0)AbsMaxVarRF读数波动读数波动速率速率/终点吸光度限定终点吸光度限定AbsorbanceAbs Upper

26、 limitAbs Lower limitS R1R2Photometric PointsMain ReadTimeNormal SampleHigh Concentration/highactivity Sample- 69 -ErrorInterpretationAbs LimitA#0Main/Flex Read time-none of the read points within defined abs limitsA#1Only 1 point within defined abs limitsA#2Only two points within defined abs limits

27、ABSAbs OOR (0.1 3.0)速率法速率法 -检测在读数窗内吸光度变化的线性检测在读数窗内吸光度变化的线性AbsorbancePhotometric PointsDADAfDADAbDADAReading TimeCalculation:D DAf - D DAbD DAx 100 % = rate of linearity %- 71 -代码代码解释解释LinearityRL %Main/Flex Read 读数读数窗口内的点超出了以窗口内的点超出了以下限定：前三点与后下限定：前三点与后三点的速率之比的范三点的速率之比的范围围终点终点/速率速率 -颜色矫正颜色矫正Calculati

28、on: (Abs Reagent 1 & Sample Blank) - (Abs Reagent Blank)Sample DispenseSecond Reagent DispenseAbs WindowAfter CorrectionBefore CorrectionFirst ReagentDispenseAbsorbance of Sample ColourReagent Blank AbsAbs. ofSample ColourAbsorbancephotometric pointsAbs Limit- 73 -终点终点/速率速率 -颜色矫正颜色矫正终点终点/速率速率 -颜

29、色矫正颜色矫正颜色矫正颜色矫正 例子例子Lower abs limitHigher abs limitRBlkR2R1+SMain Read Timeadj. Lower abs limit adj. higher abs limitR1+S - RBlkAbsorbancephotometric pointsR1+S- 74 -非线性非线性 前带反响前带反响- 79 -Photometric PointsRead TimeABError CodeInterpretationReaction CheckRCD超出前带反应限定超出前带反应限定ProzoneNormal电解质系统的检测原理 电解质

30、检测是测定样品中的电位。使用集成晶片技术ICT来检测钠，钾和氯。ICT技术是将固项的离子选择电极组合在一个单一的晶片上，从而减少了在进行电极检测中所需要的保养程序。ICT系统包括一个ICT的吸样针和一个ICT的模块。ICT吸样针从反响杯中吸入稀释样品并送入ICT模块进行检测分析前先吸入经加热的参比液，以提供一个参比浓度用于最后结果的计算 仪器详述酶的线性扩展的设置和稀释的设置空白定标可靠性检测 常见报警代码雅培诊断测 试 流 程 图测 试 流 程 图Thermostated ICT ModuleReaction CuvettesISE PreamplifierOutline of the IS

31、E UnitThermostated Reference SolutionReaction Bath OverflowISE SolutionPumpsISE Mid-level Reference Solution 参考液杯参考液杯反应杯反应杯参考液杯参考液杯Result样本杯样本杯反应杯反应杯试剂盒试剂盒反应杯反应杯搅拌搅拌1234567ISE Integrated Chip Technology (ICT ISE Integrated Chip Technology (ICT TMTM) ) 测 试 步 骤测 试 步 骤定 标定 标每 8小时仪器自动进行定标 两种定标液 血 清 尿 液2

32、 个定标液：高、低标 (CL = 低浓度, CH = 高浓度)1 参考液 (CM = 中等浓度)电动势 (EMF) 响应曲线(E) EMFE = E + S log Ci (Nernst Equation)CLCMlog CiCHDE HDE LSLSHDE LTimeEMFCLCMDE HCMCHCMDE L ISE Integrated Chip Technology (ICT ISE Integrated Chip Technology (ICT TMTM) )ASSAY RESULT ERROR CODES 1- 96 -Error CodeDescriptionABSAbsorban

33、ce out of range (-0.1 3.0) 超出吸光超出吸光度的范围度的范围CALA calibration error occured 定标出现定标出现错误错误INVInvalid result occurs when the sytem is unable to calculate the results and cannot identify the specific cause 无效结果系统无法计算，且无法确认原因无效结果系统无法计算，且无法确认原因NDCNo data for calculation an error occured for one of the assay

34、s used to perform a calculationPRMAn assay parameter is defined incorrectly 项目参项目参数设置错误数设置错误SRShort reagent 试剂不足试剂不足SSShort sample 样本不足样本不足SWRSmart Wash Reagent probe wash insufficient volume aspirated of the solution used for washing the reagent probes 试剂探针试剂探针Smart Wash 溶液用量不够溶液用量不够 SWSSmart Wash

35、Sample probe wash insufficient volume aspirated of the solution used for washing the sample probe 样本探针样本探针Smart Wash 溶液用量不够溶液用量不够 RESULT ERROR CODES 2All Settings are in: ASSAY CONFIGURATION SCREEN- 97 -Error CodeDescriptionInstrument Field SettingA#0A#1A#2None of the photometric reads during the Ma

36、in or Flex Read Time had a measured absorbance within the defined absorbance limit.Only 1 read was within the above mentioned absorbance limitOnly 2 reads were within the above mentioned absorbance limit 读数点读数点不在吸光度范围不在吸光度范围Base pageAbsorbance LimitFLXThe result was calculated using the read data in

37、 the Flex Read Time No indication for an error, just an alert message 使用使用Flex计算结果计算结果 Base pageFlex Read TimeRL %For Rate assays the abs linearity was outside the defined Linearity % range 吸光度线性出了吸光度线性出了Linearity % 范围的限定范围的限定Base page% LinearityEXPDefined Calibration Interval has been exeeded 定标间隔过期定标间隔过期Calibration pageIntervalRFRead Fluctuation for endpoint assays, the abs reads for the Main Read Time fluctuated more than the defined MaxAbsVar_ 读数波动终点法，吸光度主读数波动超过读数波动终点法，吸光度主读数波动超过MaxAb