人支气管上皮细胞原代培养的护理支持

1、人支气管上皮细胞原代培养的护理支持摘要 目的 探讨人支气管上皮细胞原代培养中护理配合措施。 方法 做好我院2012年19月接收的34例肺癌患者的术前护理工作，包括人支气管上皮细胞分离前科普宣教和心理护理等，了解人支气管上皮细胞原代培养的各种方法，熟悉操作过程，备齐所需要的物品，并且协助研究人员完成人支气管上皮细胞的原代培养。 结果 经过有效地护理配合，34例患者均顺利完成支气管上皮细胞的分离，无不良反应发生；并且通过组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法三种不同的分离培养方法中探索出组织贴块法获得的支气管上皮细胞成活率高，纯度高，是一种经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法。 结论

2、 在人支气管上皮细胞的原代培养中，配合相应的护理，效果良好，为研究出经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法奠定了基础，值得在临床中推广应用。 关键词 人支气管上皮细胞；原代培养；护理配合 支气管上皮细胞是气道与外界环境接触的第一道屏障，在慢性阻塞性肺疾病、哮喘、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道疾病的发病机制中均起着重要的作用，逐渐受到人们的重视。支气管上皮细胞不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子，从而参与气道炎症及免疫反应，而体外培养的原代支气管上皮细胞由于与体内原组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，支气管上皮细胞的原代培养成为

3、研究呼吸道上皮功能的必要条件1。本室在参考国内外相关研究的基础上2-3，拟采用组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法三种不同的分离培养方法对支气管上皮细胞进行原代培养，探索出一种能够获得成活率高、纯度高的支气管上皮细胞，经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法，但是研究中发现在上皮细胞的分离过程中，患者的积极配合、护士对人支气管上皮细胞原代培养的各种方法的了解 和操作过程的熟悉，对于人支气管上皮细胞原代培养的成功尤为重要，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 对我院2012年19月接收的，确诊为肺癌34例患者进行人支气管上皮细胞的标本来源，其中：男19例，女15例，患者年龄

4、最小41岁，最大73岁，平均53.2岁，所有患者均在知情条件下对其支气管上皮细胞进行分离采集。 1.2 设备与耗材 倒置相差显微镜、纤支镜、一次性无菌细胞刷均为日本Olympus公司产品；支气管上皮细胞生长培养基为德国Promocell公司产品；蛋白酶、人的胎盘胶原为美国Sigma公司产品；细胞培养板、细胞冻存管均购自美国Coming公司；含青、链霉素的双抗、0.25%胰酶/EDTA、胎牛血清、MEM培养基均为美国Gibco公司产品。 1.3 护理配合 1.3.1 支气管上皮细胞分离前护理 由于肺癌患者本身对于自己的疾病就有一定的恐惧，当被告知需要对其癌旁正常的支气管组织进行分离采集或者在纤支

5、镜直视下，用毛刷进行刷检，进一步加重他们的心理负担，影响采集分离过程的进行。因此采集前护士应向患者就该项采集技术和操作的科学性、安全性和有效性及采集的主要方法和过程进行必要的介绍和说明，并且对患者进行心理护理，解除他们心理上不必要的顾虑，消除其焦虑、恐惧心理，尽量取得他们的认可和配合为人支气管上皮细胞的分离创造前提条件。分离前一晚患者应保证充足的睡眠，禁止服用影响实验结果的药物，护士在分离前评估患者的一般情况，如生命体征等，检测体温、脉搏、血压等，排除发热、心衰等患者。 1.3.2 支气管上皮细胞分离前仪器及物品准备 为防止出现不良反应，分离前应该注备好急救物品。为支气管上皮细胞分离准备好ME

6、M培养基、0.25%胰酶/EDTA、含青、链霉素的双抗、胎牛血清、支气管上皮细胞生长培养基、蛋白酶、人的胎盘胶原、鼠抗人的角蛋白8单克隆抗体、超敏即用型免疫组化试剂盒、细胞培养管、细胞冻存管等物品和倒置相差显微镜、纤支镜等设备；并且将支气管上皮细胞生长培养基配置成含有人表皮生长因子、牛垂体提取物、人转铁蛋白、肾上腺素、人胰岛素、氢化可的松等的无血清培养液于4避光保存备用。 1.3.3 支气管上皮细胞分离过程中的护理配合 了解人支气管上皮细胞原代培养的各种方法，熟悉操作过程，支气管上皮细胞分离麻醉前要与患者进行充分的交谈和提醒，并告知其注意事项及有可能出现的不良反应，相应措施等，以消除患者紧张情

7、绪。安装机器配套管路，并且分离过程中应严格执行无菌操作，保证一人一套管路，防止患者发生感染。作好观察记录，并且时刻注意观察不良反应的发生，如果发现患者出现四肢抽搐，血压、脉搏变化等症状，应及时告知医生给予对症处理。配合医生将分离的癌旁正常的支气管组织进行处理，用组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法三种不同的分离培养方法进行原代培养，并按照观察结果做好观察记录。支气管上皮细胞在体外培养中对环境要求较高，对成纤维细胞的污染、培养基、生长基质等都有特殊的要求，并且原代培养过程需要在无菌条件下进行，因此护士应该确保所用物品的洁净和无菌，实验操作环境的无菌。 1.3.4 支气管上皮细胞分离后

8、患者的护理 支气管上皮细胞分离后注意患者的伤口护理，防止感染。对患者进行饮食等其他生活护理，嘱患者卧床休息，加强对患者支气管上皮细胞分离的后续观察，严密观察生命体征，并且继续观察血压、脉搏、呼吸及是否有不适症状出现，发现问题及时处理。 2 结果 经过有效地护理配合，34例患者均顺利完成支气管上皮细胞的分离，无不良反应发生；组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法3种不同的分离培养方法中探索出组织贴块法获得的支气管上皮细胞成活率高，纯度高，是一种经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法。 3 讨论 临床研究中发现4-5，人支气管上皮细胞原代培养过程中，上皮细胞的分离技术非常重要，但是其受

9、患者的配合态度、护士对人支气管上皮细胞原代培养的各种方法的了解和操作过程的熟悉等多种因素的影响，限制了人支气管上皮细胞培养方法的研究。并且由于由于气道为开放性组织，与外界大气相通，黏膜表面有细菌定植，容易污染，对细胞的获取量、细胞的纯度和成活率都有较大的影响6，因此，对于仪器、设备和所使用的物品都与较高的要求，需要具有对操作熟练的护士人员进行配合，并加强对患者病情的观察，对于出现不良反应的患者，及时告知医生给予对症处理，才能够保证顺利完成人支气管上皮细胞的原代培养，探索出一种经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法。 在本研究中，经过有效地护理配合，34例患者均顺利完成支气管上皮细胞的分离，无

10、不良反应的发生；并且通过组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法三种不同的分离培养方法中探索出组织贴块法获得的支气管上皮细胞成活率高，纯度高，是一种经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法。由此可见，护士加强与患者的交流，熟练掌握人支气管上皮细胞原代培养的操作过程，规范操作规程，有助于人支气管上皮细胞的原代培养的成功。 综上所述，在人支气管上皮细胞的原代培养中，配合相应的护理，效果良好，为研究出经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法奠定了基础，并且为进一步研究不同的呼吸系统疾病提供了良好的基础，值得在临床中推广应用。 参考文献 1 秦爱平，袁素波，廖明阳.人支气管上皮细胞在致癌机制研究中的应用J.卫生毒理学杂志，2003，17（3）：188-191. 2 高元妹，徐军.组织贴块法人的支气管上皮细胞的原代培养J.国际呼吸杂志，2008，28（7）：397-399. 3 张景熙，李强，白冲，等.经纤维支气管镜刷检人支气管上皮细胞的原代培养J.第二军医大学学报，2004，25（7）：791-792 4 Yaghi A，Zaman A，Dolovich M.Primary human bronchial epithelial