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文档简介
1、精选优质文档-倾情为你奉上培养基质控标准操作规程1 检验目的对商品化的培养基进行质量检测,保证培养基的质量。2 检验原理培养基应该是无菌的,选择培养基会根据相应的细菌选择性生长,可以保证细菌所需要生长条件,菌落生长良好。3 步骤3.1 频率每批次或货次的培养基都要进行质量检测,包括外观质量验收和性能质量验收。3.2外观验收培养基外观质量验收包括平板有无裂纹、培养皿有无裂纹、充碟是否均匀、溶血情况、污染情况、有无冷冻、过多气泡和斑点、色泽是否均匀。通过肉眼观察后记录。3.3 性能质量控制3.3.1培养基质控菌株的选择。参照 WST232-2002商业微生物培养基质量检测规程和厂家说明书。3.3.
2、2 质控菌株的准备参见标准菌株使用标准操作规程。3.3.3培养基性能检测项目包括:无菌试验、生长试验(营养能力)、菌落生长形态、抑菌试验、3.3.3.1无菌试验不接种任何菌体选择适宜的培养条件进行培养。3.3.3.2生长试验(营养能力)用工作质控菌株配置菌悬液,通过比浊仪配到0.5麦氏单位作为基础菌悬液。基础菌悬液用生理盐水100倍稀释,接种0.01ml在待测平板上,使其浓度达到1-2×104CFU/碟。如果不能保证在特定培养基上形成单个菌落,则应10倍稀释接种物。3.3.3.3抑制试验基础菌悬液用生理盐水10倍稀释,接种0.01ml在待测平板上,使其浓度达到1-2×105
3、CFU/碟。3.3.3.4根据培养基的种类,选用适宜的温度和二氧化碳,培养18-24小时,同时用空白培养基做阴性对照。3.3.4次日观察菌落生长情况是典型。3.3.5每个批号或货次的培养基至少要抽查一块进行室内质控。3.3.6结果判断3.3.6.1无菌试验应该无任何微生物生长3.3.6.2营养能力质控菌在待测培养基上生长并形成典型的菌落形态,则认为培养基效果满意。某些情况下应该有适当的颜色或溶血。3.3.6.3抑菌试验对于选择性培养基,某些菌被抑制,而所需的细菌充分生长。表1 培养基质量控制标准培养基培养条件质控菌株预期结果典型菌落厌氧羊血琼脂培养基厌氧,35,18-24h脆弱拟杆菌ATCC2
4、5285生长灰白表面光滑边缘整齐产气荚膜梭菌ATCC13124生长灰白不透明双层溶血环血琼脂平板35,18-24h,5%CO2肺炎链球菌ATCC49619生长甲型溶血化脓链球菌ATCC19615生长乙型溶血金黄色葡萄球菌ATCC25923生长乙型溶血奇异变形杆菌生长迁徙生长麦康凯35,18-24h大肠埃希菌ATCC25922生长粉红色菌落粪肠球菌ATCC29212抑制>90%MH35,18-24h大肠埃希菌ATCC25922生长复方新诺明24-32金黄色葡萄球菌ATCC25923生长复方新诺明24-32营养琼脂35,18-24h大肠埃希菌ATCC25922生长金黄色葡萄球菌ATCC259
5、23生长科玛嘉念珠显色35,18-24h克柔念珠菌ATCC6258生长粉色模糊菌落大肠埃希菌ATCC25922抑制金黄色葡萄球菌ATCC25923抑制四号35,18-24h大肠埃希菌ATCC25922抑制>90%粪肠球菌ATCC29212抑制>90%副溶血弧菌生长半透明中心黑色碱性蛋白胨35,18-24h副溶血弧菌生长大肠埃希菌ATCC25922抑制>90%嗜血杆菌巧克力35,18-24h,5%CO2流感嗜血杆菌ATCC49247生长巧克力35,18-24h,5%CO2流感嗜血杆菌ATCC49247生长淋病奈瑟菌生长GC平板35,18-24h,5%CO2淋病奈瑟菌生长HE平板35,18-24h沙门菌生长黑心志贺菌生长蓝绿色4 纠正措施采取新的质控菌株(冷冻干粉,可靠来源)及来自不同厂家的新批号的材料。如果问题与制造商有关,联系并将测试结果提供给制造商。也可与使用同样方法的其他实验室交换菌株和材料,有助于找到无法解释的系统误差的根源。5 参考文献5.1尚红,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第四版.人民卫生出版社,20155.2周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海科学技术出版社
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