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文档简介

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2、皿 为 ( : 发 十 刈 愈伤 纵诱 , 化 较近 件 时 表 达 情 况 爱边 : 抗 愈伤 组 织 的分 子 生物 学 鉴定 眭 的瞬 蕊色 点 ( 所 示 ) 为 ( 箭上 ; 块虽然 扳 扩 片 办 能 仞步断定 为转 析, 化 休 , 需 受进 还 作 站 占分 梭 删 拗 山进 止仳 转 化成 从 筛选 卷 讨 论 小 研 究 以 华 佛 丁 叶 黼 为 受 体 材 料 ,通 过 抗 筛 选 , 讨 了叶 傩 培 养 、 杆菌 浸 染 、 培 养 探 农 时问、 及 添 加 等 多 种 刈 农 忏 菌 介 导 素 佛于 转 化 影 响 , 定 适 转化 条 什 。比较 各 勺 确

3、 , 勺 长 会影 响刽转 化 的成 败 。术 究 结 果 他们 的 ! 结论 。 敛 佛 为 香 科 植物 , 人 多数 乔科 的柑 橘 品 绝 种 都对 农杆 闲比较 敏感”, 佛于 也 例 外 。水文利 用 农杆 力 法转 化 海 藻糖 合 酶 响转 化 的 , 扶 , 化 了 系列 影 优 外 源 的瞬 表 达 , 用 、 利 种参 数 ,我们 认为 的添 加对 转化 影 响 平 较 人 。 刘 忠【 、 林树 州 ” 勤等 进 行 农 卡 】 永 、 蚓 茼 介 导 圳 萝 卜( ( )怂 浮 细 胞 、 勺 人 ( , 、 ) 小麦 ( ) 化 【 ( 转 采 ,他们 仅 ) 培

4、养 、预 培 养 】 】 添 【 分子 物 学 法 步 榆 测 剑 外 源 整 合 剑 植 物 。我 们 也曾利 用 枪 法探 索佛 手转 化 人 】 条什, 川 筛选 影 响此 力 法 转 化 效 率 的 几 个 关 键 子 , 较 高 勺 瞬 衷达 牢 ( 高瞬 时 最 表 哞 ), 术 得到 稳 定表 达 。我 的 取 得 了显 符的效 。 , 本研究 发现 , 同时存 培养 农 ¨ 机 培 养过 添 加 显 提 】 袭愈 伤 勺 导牢 。 诱 具何 抑 制 培 养摹 附 适 口 们 认 为 , 种 方法 各 仃 优 缺 , 杆 法 步 骤 繁 农 埘方 琐 , 人 , 实验

5、成 本 低 , 但 作 常 实 验 器材 和 药 本 操 作 。 , 枪 力 步骤 大 易行 , 但实 验 成 为 种 方法 植 物材 , 刖是 特 枪 仪器 昂 贵。 变 作 。 通 过 门 ” 的 疏 化 物 也 手 硫 酸 钠 、 培 千 币 共 的 幔 次 数仃 , 从 步 得 的 验 结 料 特 ¨ , 们 建 议 使 用 农 杆 :之 我 本 , 能 达 剑 的 。 义 乔, 扶 从 、均 增 加 到 的转 化牢】 。 人 遗 传 转 化 的 培 养 加 入 。 增 加 农 茼 浸 染 能 力 、 高 了转 化 效 率 , , 提 、 衡 除 剂选 择 压 和农 杆 菌浸

6、 染之 间 的关 系 , 卜 优 化 了选 择 体 系 。本研究 参考 】 的方法 , 在共 培 养 基 添 加 , 发现 其 明显 抑制 了佛 下 叶盘褐 化 。这 与 的研究 结论 相吻 合 。此外 , 多 许 既 约 成 ; , 对 卡 少 定 的抗 性 愈伤 织 , 【前 要 的 作 是建 佛 南 效 再牛 体 系 。 , 需要 做 进 刮时 还 步 分 子 乍 物 学 榆测 ,如 稳 定 表达 和 杂交 。 参 考 文 献 陈 鹏 ) 莉 ) 顾 跃 君 ) ( , ( , ( , ( 试 验 研 究 了 菌 液 浓 度 和 浸 染 时 、 培 养 、 培 共 预 养对转 化 的 影

7、 响 , 管 所试 材 料和 菌 株 同 , 尽 但 获得 的 一 结果 是 : 般 预培养 培 养 菌 , , ) 扬 州 人 学 学 报 农 业 生 命 科 学 版 ) , : ( , () ( ) 液浓度 , 染时 间 。本 研 究 浸 与此一 致 。 蒋 迪 ) 徐 杰 ) ( 火 明) ( , ( , 陈 ( 树 学 报 ) 果 , ,( ) : ( ) 选 择 适 宜 的 能抑 制 农 杆 菌 , 长的抗 生 素 也 是 必须 的 , 、 均可 达 到 除菌 效果 , 香 、 芸 科 植 物 因 晶种 同所 用抑 菌抗 牛素 种 类 和 浓 度 也 ( 成 ) ( 秀 新 ) ,

8、邓 农业 大学学报) , : ( () ) 同, 转化 枳壳 ( 用 ) 。的 ,而 转 化 沙 田 柚 ( 采 用 ) 抑 菌 。 本 实 验 中 使 用 与荨麻 科 植 物苎 麻 ( , 所 用抑 菌抗 生素 种类 一致 , ) 但浓 度 不 同【。 抑 菌 处 理 可 以使 经农 杆 蔺 感 染后 的外 植 体 生理 状 态 有 一个 恢 复过程 , 利于 转化细 胞 的增殖 。另外 , 有 当 外 源基 因进 入 受 体细 胞 后 , 合 与表达 以及 表达 量 整 的 积 累 都 需 要 有 一 个 过 程 。前 人 研 究 西 兰 花 ( ) 和 卷 心 菜 ( 转 化 , 为抑

9、芮 处理 的 倒 ) 认 、 、 , , : () 张 桂 芳 ) 贺 红 ) ( , ( 中医 药 学 川) , : ( , () ( ) ( 奋 丽 ) ( 尔 ) 张 燕 燕 ) 周 , 郭 , ( ) ( 北 西 十 ± 院 报 ) ,: , () ( ) ( ) 、 ( , ( 德 解 ) 尔) ; , 第 期 周 春 丽 等 : 杆 菌 介 导 佛 手 遗 传 转化 主要 影 响 因素 的研 究 农 , , , , : ( 北 植 物 西 学 报 ) , ) ) , ( : ( , , , 【】 李 志 邈 ) 张 海 扩 ) 曹 家 树 ) ( , ( , ( , ,

10、: , , !; , , 【 ( 物 生 理 与 植 分 子 生 物 学 学 报 ) , : ) , () ( , , , : , 【 , : 【 王 关 林, 宏 筠 物 基 因 工 程 原理 与 技 术 第 一 版 , 京 : 方 植 北 科 学 出版 社 , 【 ( 传 堂 ) 黄 粤 ) ( 新 道 ) 王 , ( 杨 , : 【 ( 关 庭 )( 张 华 ) 郎 春 秀 ) 吴 , 胡 , ( , ( 农 学 报 ) , : 核 , () ( ) , ( 花生 学报 ) , ,: ) () ( 【 ( 莉 萍 ) 包 满 珠 ) 高 , ( 京 林 业 大 学 学 报 ) , : (

11、 ( , () ) 【 ( 红 ) ( 瑞 炽 ) 韩 美 丽 ) 贺 , 潘 , ( 【 ( 瑶 ) ( 木 兰) , 林 生 物 技 术 通 报 ) , ( , () ) : ( 【 关 林 , 宏 筠 物 基 因 工 程 版 , 京 : 学 出 版 社 , 王 方 植 第 北 科 【 ( 南 植 物 研 云 】 究 ) , : , () ( ) 【 刘 明 志 ) ( 【 韩 美 丽 ) ( 耀 军 ) ( 荣 生 ) ( , 吴 , 陆 , ( 物 植 学 报 ) , : ) , () ( ) ( ( 广 西 林 业 科 学 ) , : ) , () ( 【 陈 建 荣 ) 郭 清 泉 ) ( 学 文 ) , 】 ( , ( , 张 , 【 ( 树 柱 ) ( 越 平

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