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文档简介
1、市第二人民医院尿液培养操作规程1 检验目的做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。患有泌尿系感染时,尿中的细菌数高于 104/mL,以此作为诊断泌尿系感染依据。2 原理使用 BACT-IST 黑马微生物鉴定系统,原理见鉴定系统操作规程 。3 标本要求( 1)标本类型: 中段尿液。( 2)标本采集: 见标本采集手册( 3)标本储存和运输 :室温放置,室温运输并立即送检。( 4)标本拒收状态: 非无菌方式采集的标本。4 容器和添加剂类型使用灭菌器皿盛放标本,不加任何防腐剂。5 试剂( 1)试剂名称:革兰氏染液、氧化酶试剂、 3%触酶
2、、血平板、麦康凯平板、相关生化试剂等( 2)试剂生产厂家:珠海黑马生物技术有限公司( 3)包装规格: 4X500Ml( 4)试剂盒组成: 试剂 1:龙胆紫液 试剂 2:碘溶液 试剂 3:脱色液 试剂 4:沙黄溶液6 仪器设备:( 1)接种针、接种环、酒精灯、( 2) BACT-IST 黑马微生物鉴定系统( 3)显微镜、 GNP-P270隔水式恒温培养箱、 SW-CJ-IF超净工作台、 MCO-15A三洋牌二氧化碳培养箱、0414-1 台式离心机、 FA1004 电子天平7 校准程序( 送 XX市计量质量检测研究所校准)8 操作步骤( 1)细菌的分离培养:用接种环取1uL 标本接种于血平板及麦康
3、凯琼脂培养基,35培养过夜,观察结果。菌落生长者做菌落计数,并挑取优势菌菌落做纯培养。(若初次分离菌落单一且生长较多时可直接做鉴定)( 2)涂片:取菌落涂片做革兰氏染色,确认时G+或 G-以及是球菌还是杆菌(球杆菌)。( 3)细菌鉴定及药敏实验 : 革兰氏阴性杆菌做氧化酶试验(必要时做动力试验),氧化酶试验阳性或氧化酶试验阴性但不利用葡萄糖不产酸者使用非发酵鉴定测试板;氧化酶试验阴性者则使用肠杆菌科细菌测试板;革兰氏阳性球菌(主要是成簇或四联排列) ,触酶试验阳性者接种葡萄球菌、微球菌鉴定 / 药敏测试板;触酶试验阴性者则接种链球菌鉴定/ 药敏测试板;革兰氏阴性双球菌,氧化酶试验阳性者使用淋球菌鉴定 / 药敏试剂盒测试。( 4)鉴定:按照鉴定仪要求调配菌液浓度, 见 BACT-IST黑马微生物鉴定系统、 PHOENX100全自动细菌鉴定药敏分析系统操作规程 。9 质量控制:参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动10 生物参考区间正常人体膀胱中尿液无菌。11 患者检验结果
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