2010版GMP无菌制剂实施指南

1、14、6过滤除菌本节旨在提供系统的方法对除菌过滤工艺进行选择与验证。除菌过滤过程中的关键设备为除菌（级）过滤器，对其进行的具体确认与验证项目的相关原理与要求等，将在以下14.6.114、6、3中详细阐述。按照不同药品分类,需要、推荐、可选与评估后确定就是否进行的确认与验证项目，总结为下表。项目应用于非最终火菌产 品的除菌过滤应用于可最终火菌产品的过滤每种型号除菌 级过滤器选型 的确认（由过滤器生产 商完成）每种型号除菌级过 滤器的标准细菌截 留试验数据与完整 性检测数值的关联1.推荐2.推荐每种型号除菌级过 滤器的溶出物分析3.推荐4.推荐构成过滤器的各种 材料的生物安全性5.推荐6.推荐每批

2、除菌级过 滤器的确认（由过滤器生产 商完成）每批除菌级过滤器 抽样进行细菌截留 标准试验，并确认与完整性检测数值关 联的持续有效7.推荐8.推荐出厂前每支完整性 检测9.推荐10.推存抽样进行滤出液质 量确认，例如:pH、内 毒素、总TOC与洁净 度11.12.抽样进行湿热灭菌 耐受测试13.推荐14.推存工艺验证细菌截留15.需要16.可选溶出物d -7毛W/ -需d o 毛W6 需化学兼容性4 c毛W/.需 30英寸过滤器或多芯的）上的累积扩散流增加的数量会降低这些完整性测试的实 际可应用性。有多种完整性测试方法 （例如,工程测试系统或扩散检测 ）可用来验证特定工艺。一种方法就是得到一个组

3、合件特异的值来测试多个滤芯 ,该值低于线性累加的极限值。 需要进行风险评估证明此方法有效。如果组合件的扩散气流超过正确的限值,这些过滤器可被分开测试确证其完整性。以下就是起泡点与扩散 /前进流测试需要考虑的要点 :在对多芯组件测试最小泡点时 ,总扩散流可能会掩饰了其中某支处于临界的不完整 性的滤芯组件的泡点拐点。观察到的 /测量到的此组件的起泡点也许会高于具有最 低起泡点滤芯的起泡点 ,这可能会导致错误的通过判定 ,不能发现不完整的过滤器。多芯组件的在指定的测试压力下 ,总气体流量也可能掩盖了其中某一支不完整过滤 芯的偏高的气体流量。 总扩散流量仍可能低于以组件中滤芯数目乘以单支滤芯的最 大扩

4、散流得到的该组件的最大扩散流限值 （线性叠加极限值 ）。这可能导致错误的通 过判定 ,不能发现不完整的过滤器。F、完整性测试装置的确认完整性测试装置的确认与确认其它工艺测试设备类似。 完整性测试装置的确认从该装置 的研发开始 ,通常由其制造商进行。设计确认与装置研发文件由制造商准备。这些文件可能 包括在过滤器使用者验证文件包中。运行确认应该包括装置的主要功能;然而 ,运行确认不一定能涵盖功能与设置的所有可能的组合。因此风险评估应该包括主要功能,例如:作为装置主要功能的试验程序错误条件的探查及出错信息数据处理 ,正确的数据输入与输出以及避免错误的选项测试方法本身的验证 （准确度与限度 ）典型的验

5、证工作可能包括 :软件评估 -测试参数、测试方法、仪器编程与测试仪器灵敏度评估仪器启动仪器校准进行测试完整性测试性能评定 （起泡点、扩散 / 前进流、压力保持 ）其它功能的测试 （体积测定、错误模式、无效输入拒绝 ）测试打印输出评估计算机软件评估密码保护外围功能评定日期/时钟/记忆存储/清洁G、什么时候需要对除菌级过滤器进行完整性测试只要过滤器被用于除菌，完整性测试就应进行（见图14-22）。在线测试还就是离线测试 过滤器由实际工艺需要决定。过滤前还就是过滤后进行完整性测试的目的不同。图14-22完整性测试可选项完整性测试使用前使用后灭菌后灭菌前滤前完整性测试模拟细菌截留研究的测试状况，得到的

6、测试值与那些于研究中得到的完整性数据相关联。滤前完整性测试可在过滤器灭菌前进行，在灭菌后进行更好。灭菌前的测试会确认正确精度的完整过滤器已经被正确安装在滤壳中了。灭菌后完整性测试提供与灭菌前测试相同的信息，而且更能说明滤芯就是否在灭菌过程中被损坏。当进行灭菌后完整性测 试时，需要采取措施确保系统的下游保持无菌。滤后完整性测试可以发现过滤器在过滤过程中已发生的渗漏或穿孔。滤芯完整性测试值受两方面变化影响，一方面就是在过滤过程中由于大量颗粒被捕捉而导致的孔隙率变化，另一方面就是由于大孔被堵塞后的明显的起泡点变化。这些改变会在工艺过程中出现严重堵塞与流量衰减时发生。完整性测试值也可能受到过滤器润湿特

7、性变化的影响。如果发生大量孔被堵塞或大孔被阻塞的情况时，了解滤前完整性测试值就是十分重要的，以确定这种现象可能产生的影响，如果有任何影响的话。显著的通量衰减或为了维持流量造成的压力上升都能证明 这些变化。因为滤芯孔隙率的显著变化，或者大孔的堵塞可能会对使用后完整性检测产生“正向”影响，而掩饰膜的缺陷。并且，如果该缺陷在过滤前就存在，可能会导致滤出液非无菌。孔 隙率降低与大孔堵塞的迹象会分另懒扩散流的降低与起泡点的上升所证实。过滤前后进行完整性检测需要注意的事项，见下文实例分析部分的讨论。H、连续过滤如果某种过滤器对特定产品的除菌性能已经被验证过，那么这个单独的除菌过滤器必须令人满意地通过使用后

8、完整性测试。在那些工艺中，如果组合过滤器就是工艺要求并且它们对特定产品的除菌性能已经被验证过，那么这个过滤器列被瞧作为一个除菌单元并且其中所 有除菌级过滤器均必须令人满意地通过使用后完整性测试。确定系列中任何过滤器的使用前灭菌后完整性可能会有困难，因为可能会危及第一个过滤器的无菌下游侧。过滤器制造商已 经开发出不同的方法以处理这个情况，能提供相应建议。在过滤器列中增加一个除菌级过滤器以再次确保不会因第一位的除菌级过滤器可能失 效而导致产品损失 ,除非首要过滤器不能通过测试 ,否则增加的过滤器不需要进行过滤后完整 性测试。如果发生首要过滤器不能通过测试的情况,第二个过滤器或冗余的过滤器必须令人满

9、意地通过使用后完整性测试。 （注 :过滤器列中的首要过滤器应该就是系列中的最后一个。）出于工艺要求 ,需要对组合在一起的过滤器进行完整性测试（如 :两个过滤器被连接在一起进行灭菌 ）的 ,每一个过滤器均需要单独进行测试。需要特别注意维持两个过滤器间通路的 无菌性。包括对通过第一个过滤器的气体进行除菌过滤后再导气到第二个过滤器进行完整性 检测。为了测试第二个过滤器 ,需要在第一个与第二个过滤器间装一个阀门。关上阀门可将 第一个过滤器与第二个过滤器隔开。将完整性测试主机接到第二个滤壳的完整性测试口上 （ 将测试第一个滤壳时打开的排气阀关闭）,按常规方法测试第二个过滤器。 如果使用这种方法所有步骤都

10、应当为无菌操作 ,用于测试的气体应被过滤除菌以避免污染两个滤芯间的连接 段。在灭菌过程中所有阀门应完全打开以允许蒸汽气穿过。I. 风险评估注意事项与再验证经过验证被用于特定除菌过滤工艺的除菌过滤器,在产品、工艺条件发生改变或者过滤器制造方面发生改变时 ,需要对过滤器的完整性进行风险评估 ,必要时应进行再验证。风险评 估考虑要点包括但不限于 :同一产品或者同一产品家族的产品 ,表面张力数值可能发生的变化（如 ,活性成分的浓度为一个范围而不就是固定数值的情况,表面活性剂浓度变化 ,有机溶剂含量改变等）。工艺过程中 ,就是否经常对照完整性检测数值与工艺下游的无菌检测结果,如果发现有无菌检测的阳性结果

11、 ,应当重新评估工艺验证的有效性。过滤压差超过被验证参数过滤面积不变的情况下提高过滤量 单位面积的流速超过验证参数 产品配方改变 ,包括浓度、 pH 或电导率 过滤器的灭菌程序改变 改变过滤器的制造商 ,或者过滤器的生产者改变了过滤膜的配方【实例分析】A 、 液体过滤器产品润湿完整性测试方案目的 :在指定的温度下 ,测定经特定产品润湿的过滤器的前进流、压力保持或起泡点限值。方法 :通过产品润湿的试验数据与参比溶液润湿的相应参数来计算产品润湿过滤器的完整性 检测参数 ,包括前进流限值、检测压力以及最小起泡点。步骤 :通过前进流图谱 ,测定参比溶液与产品润湿的过滤器的气体扩散特性。前进流图谱 由在

12、逐步增加的压力下测定完全润湿滤膜的一系列气流速度组成。 计算出各图谱中 从扩散气流向大量气流转变的压力值（称为“ KL 压力” ）。产品润湿过滤器的 KL 压力与参比溶液润湿过滤器的 KL 压力之比值 ,为“测试压力 因子”。产品润湿完整性的检测压力 ,由参比溶液润湿过滤器的检测压力与“测试压 力因子”的乘积获得。 （在产品含有表面活性剂成分的情况下 ,测试压力可能需要通 过产品与参比溶液表面张力的比值来获得。 ） 通过类似于计算前进流检测压力的方法用参比值来计算试验溶液润湿过滤器的最 小起泡点。通过前进流图谱计算得到的产品与参比溶液扩散流的比值,即“前进流因子” 。产品润湿前进流的限值就是由

13、参比溶液润湿过滤器的前进流限值与测试压力因子以及 前进流因子三者的乘积获得。结论 :参比溶液润湿的完整性测试值已经与参比溶液为载体流体的过滤器的微生物截留能力 结果进行了关联。所以通过上述实验过程得到的产品润湿完整性检测参数,与参比溶液的细菌截留测试结果进行了间接关联。 在工艺验证即实际产品与工艺条件下的微生物截留试验的 基础上 ,过滤器使用者可以使用本实验结果作为实际生产中日常单点完整性检测的参数。B、完整性检测注意事项（1）使用前完整性测试注意事项在使用后进行完整性测试外 ,可进行使用前完整性测试 ,在灭菌前或灭菌后 ,如图 14 22然而 ,也有因工艺,使用前就是完所描述。 当滤芯装在它

14、的工艺滤壳中 （在线 ）时对其进行测试就是第一选择。 要求而需要离线测试的情况。灭菌前完整性测试可证明滤芯已被正确安装了 整的。也许需要进行风险评估以确认它的效用。如果在灭菌后进行完整性测试 ,需要特别留意不要危及无菌性。测试前 ,应使用流体冲洗 过滤器以将其润湿。 穿过过滤器的润湿流体应在无菌条件下被收集。 在滤芯上游侧加压与测 量,被测试的滤芯作为无菌的屏障。对于系列过滤器按照方式而言 ,第一个过滤器应在第一步被润湿 （润湿流体在透过第一 个过滤器后被收集 ）与测试。如果这个滤芯没有通过测试,就不得不测试第二个过滤器。这将变得更加复杂 ,因为两个过滤器之间的空间需要保持无菌（测试气体必须就

15、是无菌的 ）。如果通过第一个过滤器测试第二个过滤器,第一个过滤器需要允许自由气流通过以避免影响测试（ 需要超过起泡点以将水从大孔中排出去）。完整性测试就是基于过膜压差的 ;因此 ,下游应通向大气。 如果不能 ,下游侧空间应足够大 以避免压力上升 ,或者下游侧的压力应受控制 ,如果压力显著上升就导致测试中途失败。（2）过滤后完整性测试注意事项 滤后完整性测试应在过滤后立即进行。液体产品的残留物不应在膜表面干置,如果可能 ,应将其去除 （使用适当的流体进行使用后冲洗 ）。如果做不到这一点 ,过滤器应当在诸如冷藏的 条件下储存 ,以避免微生物生长。 如果过滤器在完整性测试前冷藏过 ,应让其回复到室温

16、状态 , 然后应尽快进行测试。过滤器不应被丢弃直到完成完整性测试 ,直到测试结果被评估。储存 条件与期限应被验证以确保不会对过滤器的完整性有负面影响。C、气体过滤器的水侵入测试水侵入实验背后的原理为：在低压下，疏水性过滤膜会阻止水的通过。在低于水突破（水被 压通过）压力下，少量但就是可以测量的水的流量会发生，类似于过滤膜被润湿后的扩散流。在实际操作中，水侵入检测就是在低于水突破压力下进行的。因为水的流量低与需要在 下游进行检测，手动的操作方法就是非常不实际的。通常用自动检测装置，通过监测实验用气体流量而间接换算为通过的水的流量而进行，在完成检测后，试验用水被从滤壳中导出。如果需要，过滤装置也可

17、以被通气吹干。D、液体过滤器完整性检测失败分析 /故障查找如果一个除菌过滤器通不过完整性测试 ，有可能就是损坏了 ，但还有其她可能导致失败的 原因，这包括组装的不正确（密封不严）与润湿不完全。过滤器失败调查与再次测试步骤应被记 录下来。为了区分过滤器损坏与可能的测试问题，或就是人为因素，应采取以下核实步骤：选择了合适的完整性测试方法使用了正确的测试参数使用了正确的润湿流体与润湿程序测试系统无泄漏过滤组件的温度在测试过程中保持稳定并处于规范内（例如：绝热效应绝热效应，是指测试气体当其进入滤壳时快速扩张，可能导致冷却效应，造成滤壳内气体的压缩。这个绝热效应可能因为扩散/ 前进流在扩张期内持续下降，

18、超过测试时间，导致假性完整性测试失败。为了克服这个问题，可能需要为这样的系统延长稳定 时间和检测时间。）设备已被正确校准测试装置已被正确组装并运行正常安装了正确的滤芯为了证明纠正措施就是有作用的，应采取以下重复测试步骤。根据规范要求重新润湿滤芯 ，并重复测试（见图14 - 23第一步）如果滤芯完整性测试再次失败，可使用以下步骤：应用更强力的润湿条件，增加冲洗的体积/时间，增加压差与/或应用背压（见图14- 23 第二步）如果滤芯完整性测试再次失败，可使用以下步骤：使用低表面张力的参考流体中进行完整性测试，以确定滤芯可润湿性变化与滤芯完整性无关（见图14 -23第三步）如果使用参考流体过滤器不能

19、通过测试，则过滤器不能通过测试。如果过滤器在上述失败分析中任何一点通过完整性测试的话，那么该滤芯可被视为完整的，能够生产无菌的流出液。图 14-23提供了一个决策树的例子，可用于评估完整性测试失 败。(1)对润湿不充分导致的失败的分析过滤器完整性测试失败通常就是由于滤芯的润湿不充分引起的。 润湿不充分可能就是由 过滤器冲洗不充分 ,没有浸湿所有的孔 ,或就是过滤器吸附了疏水性的污染物,或就是其它配方组分改变了滤膜的表面润湿特性。润湿特性的改变可能会影响完整性测试表现。例如:管道材料可能会进入产品流中 ,被滤膜吸附 ,影响了膜的润湿性质 ,从而导致完整性测试失败。为了获得合适的完整性测试结果 ,过滤器的多孔结构应被完全润湿 ,因为完整性测试方法 的物理本质依靠的就是气体流穿过润湿液体层。滤膜的润湿会受以下因素影响 :膜聚合物 :有些聚合物比其它种类容易润湿 ,依赖于膜材的临界表面张力。孔的大小 :孔越小越难润湿。