阿胶与海参鲍鱼及鱼翅的化学成分及功效的对比研(精)

1、1结题报告结题报告委委 托托 方方 山东东阿阿胶股份有限公司山东东阿阿胶股份有限公司受受 托托 方方 中国海洋大学中国海洋大学 课题总体目标课题总体目标主要研究内容主要研究内容总体总体执行情况执行情况取得的主要研究进展取得的主要研究进展课题汇报提纲课题汇报提纲一、课题总体目标一、课题总体目标 为更好的提升阿胶价值，实现高校与企业间的优势嫁接与互补，山东东阿阿胶股份有限公司委托中国海洋大学对东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成份及其生物活性进行了深入的比较研究，为宣传推广阿胶提供技术保障和数据支持。( (一）东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分析一）东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分

2、析1. 蛋白含量分析：采用半微量凯氏定氮法2. 胶原蛋白分析： 胶原蛋白含量测定； 阿胶产品中胶原蛋白分子量范围的测定。3. 极性脂分析： 样品中总脂肪含量测定； 极性脂的组成测定； 脂肪酸的组成测定。4. 氨基酸分析：5.硫酸多糖分析： 多糖含量测定； 分子量测定； 单糖组成采测定； 硫酸根含量测定。二二. .主要研究内容主要研究内容（二）生物活性比较研究（二）生物活性比较研究1.1.阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作用比较用比较检测指标：检测指标： 脾、胸腺/体重； 细胞免疫反应； 迟发性变态反应 （足跖增厚法）； 淋巴细胞

3、增殖反应。 体液免疫反应 （抗体生成水平）； 非特异性免疫反应 ； 细胞因子： IFN-含量 IL-4含量 IL-3含量检测指标：检测指标： A A负重游泳能力负重游泳能力 B B血红蛋白（血红蛋白（HbHb）水平）水平 C C 全血乳酸测定全血乳酸测定 D D运动后血清尿素氮运动后血清尿素氮; ; E E肝糖元含量肝糖元含量2 .阿胶、海参抗疲劳活性比较研究阿胶、海参抗疲劳活性比较研究检测指标：外周血像： 白血细胞（WBC） 红血细胞（RBC） 血小板（PLT） 血红蛋白（Hb） 红细胞压积（HCT）骨髓有核细胞数：3. 3. 阿胶、海参、鲍鱼补血活性研究阿胶、海参、鲍鱼补血活性研究三三.

4、.总体总体执行情况执行情况按照合同要求，中国海洋大学完成了按照合同要求，中国海洋大学完成了: :东阿阿胶、海参、鲍鱼和鱼翅等化学成分的研究；东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调 节作用的等生物活性研究；东阿阿胶和海参的抗疲劳活性研究；东阿阿胶、海参和鲍鱼的补血活性研究；阿胶的主要活性成分为胶原蛋白、胶原蛋白肽和糖脂。阿胶中含有人体所需的全部氨基酸，以Gly，Pro, Glu，Ala，Arg和Asp为主要氨基酸；海参的主要活性成分为海参胶原蛋白、海参多糖和糖脂。氨基酸组成中以Gly，Glu，Asp，Arg，Ala和Val含量较高；鲍鱼的主要为胶原蛋白和糖原。氨基酸组成中以Glu，A

5、rg，Asp，Gly含量较高；鱼翅主要为胶原蛋白和鱼翅多糖。氨基酸组成中以Gly，Glu，Arg，Asp，Ala含量较高。 GlyGly，GluGlu，AspAsp，ArgArg 是与补血、调节免疫能力和抗疲劳密切相是与补血、调节免疫能力和抗疲劳密切相关的活性氨基酸成分。海参多糖是机体重要的免疫促进剂。关的活性氨基酸成分。海参多糖是机体重要的免疫促进剂。化学成分的主要研究结果化学成分的主要研究结果1.1.东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的免疫调节作用：免疫调节作用： 均显著增强免疫机能低下小鼠的抗体生成水平， 显著促进Th1细胞介导的迟发型变态反应，促进T淋巴细胞转化，

6、提高小鼠血清IFN-含量，降低血清IL-4含量，提高IFN-/IL-4比值，逆转Th1/Th2 漂移， 显著提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。生物活性的主要研究结果生物活性的主要研究结果东阿阿胶、鲍鱼、鱼翅对特异性和非特异性免疫具对特异性和非特异性免疫具有全方位的调节作用有全方位的调节作用2.2.东阿阿胶、海参抗疲劳活性东阿阿胶、海参抗疲劳活性 显著提高小鼠负重游泳能力；显著提高小鼠负重游泳能力； 提高小鼠肝糖元含量；提高小鼠肝糖元含量； 提高安静状态下小鼠血红蛋白含量和保持运动小鼠血红蛋提高安静状态下小鼠血红蛋白含量和保持运动小鼠血红蛋白水平稳定；白水平稳定； 显著降低运动小鼠血乳酸的生成

7、和促进运动后血乳酸的消显著降低运动小鼠血乳酸的生成和促进运动后血乳酸的消除；除； 加速运动后血清尿素氮的清除。加速运动后血清尿素氮的清除。东阿阿胶和海参具有显著的抗疲劳和提高运动耐力的作用东阿阿胶和海参具有显著的抗疲劳和提高运动耐力的作用3.3.东阿阿胶、海参、鲍鱼补血活性东阿阿胶、海参、鲍鱼补血活性 显著提高正常小鼠外周红血细胞数量和血红蛋白含量; 提高小鼠骨髓有核细胞数量。促进正常小鼠红细胞生成和合成血红蛋白的能力，促进正常小鼠红细胞生成和合成血红蛋白的能力，提高正常小鼠的骨髓造血功能。提高正常小鼠的骨髓造血功能。四四. . 取得的主要研究进展取得的主要研究进展（一）阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅

8、的化学成分比较分析（一）阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分析1.蛋白含量分析：蛋白含量分析：阿胶 海参 鲍鱼 鱼翅 蛋白含量(%)75.172.764.374.61 1）总糖、酸性粘多糖和硫酸酯基含量）总糖、酸性粘多糖和硫酸酯基含量2. 多糖分析多糖分析物质 总糖 % 酸性粘多糖 % 硫酸基含量 % 阿胶 17.691.03 0.080.01 11.07 海参13.620.98 14.880.35 21.78 鱼翅6.750.351.800.09 24.75 鲍鱼 32.291.36 0.090.01 18.022）单糖组成分析单糖组成分析 阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的酸性粘多糖中单糖组成和含

9、量差异很大，说明各多糖的化学表征不同。 阿胶酸性粘多糖中单糖组成 甘露糖 半乳糖醛酸 氨基半乳糖 摩尔比 0.07 1.00 0.19 质量百分数 4.38% 67.42% 11.88% 甘露糖 氨基葡萄糖 葡萄糖醛酸 氨基半乳糖 葡萄糖 半乳糖 岩藻糖 摩尔比 0.07 0.12 0.24 0.110.510.171质量百分数 2.484.249.153.8918.046.4832.22海参酸性粘多糖中单糖组成 甘露糖 葡萄糖醛酸 氨基葡萄糖 半乳糖醛酸 葡萄糖岩藻糖 摩尔比 0.02 0.04 0.060.0810.07质量百分数 1.212.613.644.0260.193.06鲍鱼酸性

10、粘多糖中单糖组成 甘露糖 葡萄糖醛酸 氨基葡萄糖 半乳糖醛酸 半乳糖阿拉伯糖 岩藻糖 摩尔比 0.05 0.1810.780.470.080.03质量百分数 1.374.9529.6123.1012.911.830.75鱼翅酸性粘多糖中单糖组成 3.氨基酸分析氨基酸分析氨基酸阿胶 海参 鲍鱼 鱼翅 天冬氨酸（Asp） 4.71 6.56 5.54 5.62 谷氨酸(Glu) 6.488.9 19.05 8.04 丝氨酸(Ser) 2.58 3.21 2.86 3.51 组氨酸 (His)0.56 0.72 0.59 1.61 甘氨酸(Gly) 13.36 9.99 4.68 10.22 苏氨酸

11、(Thr) 1.31 3.222.24 1.87 精氨酸(Arg) 5.42 6.19 6.32 6.52 丙氨酸(Ala) 6.23 5.36 3.63 5.37 酪氨酸(Tyr) 2.27 2.401.32 3.16 缬氨酸(Val) 2.19 4.822.29 4.65 蛋氨酸(Met) 1.56 1.36 0.27 1.14 苯丙氨酸(Phe) 1.612.19 1.62 1.68 亮氨酸(Leu) 2.05 3.42 3.86 2.02 异亮氨酸(Ile) 0.90 2.58 2.05 2.16 赖氨酸(Lys)3.57 2.08 2.77 2.26脯氨酸(Pro) 6.52 4.0

12、4 1.35 3.94 总量 61.32 67.07 50.44 63.77 4. 脂肪分析脂肪分析 物质 总脂含量%中性脂含量% 糖脂含量%磷脂含量% 阿胶 3.0284.90 6.12 8.98 海参4.24 36.07 32.10 31.83 鱼翅2.27 41.57 3.29 55.14 鲍鱼 0.35 76.58 5.88 17.54 1）总脂肪含量和脂肪组成）总脂肪含量和脂肪组成 1.1.阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作用的比较用的比较 1）剂量确定）剂量确定（二）生物活性比较研究（二）生物活性比较研究(蛋白含量分

13、别为45、90、180mg/Kg.bw )2 2）动物分组）动物分组 正常对照组（N）模型对照组（M）阳性对照组 (P)低中高剂量组阿胶海参鲍鱼鱼翅于实验结束前1周，小鼠皮下注射氢化可的松，建立免疫低下小鼠模型。灌胃，1次/d,连续30d。3 3）结果）结果 促进促进体液免疫机能体液免疫机能 M P020406080100120140*020406080100120140*020406080100120140* *血清溶血素M PM P60-240mg/kg 阿胶70-280mg/kg 鲍鱼60-240mg/kg 阿胶60-240mg/kg 鱼翅60-240mg/kg 阿胶60-240mg/k

14、g 海参阿胶、海参、鲍鱼和鱼翅均能促进体液免疫机能阿胶、海参、鲍鱼和鱼翅均能促进体液免疫机能*脾淋巴细胞增殖MP0.0.2.4.6.81.0*0.0.2.4.6.81.00.0.2.4.6.81.0*MPMP60-240mg/kg 阿胶60-240mg/kg 海参60-240mg/kg 阿胶70-280mg/kg 鲍鱼60-240mg/kg 阿胶60-240mg/kg 鱼翅促进T-淋巴细胞转化 阿胶、鲍鱼、鱼翅促进细胞免疫的效果相当 组别脾指数（mg/g）胸腺指数（mg/g）血清溶血素足跖增厚值（mm）T-细胞增殖(A)正常对照正常对照4.440.421.350.11130.167.530.3

15、30.061.020.06模型对照模型对照3.340.31#0.330.06#101.047.12#0.280.04#0.680.03#阳性对照组阳性对照组3.270.150.380.04*106.068.840.340.04*0.880.04*阿胶阿胶60mg/kg3.300.180.360.04107.817.770.310.060.690.06阿胶阿胶120mg/kg3.510.250.390.03*111.106.22*0.340.02*0.770.07*阿胶阿胶240mg/kg3.590.16.0400.05*118.672.25*0.370.03*0.880.05*海参海参60mg

16、/kg3.570.300.380.04*113.518.87*0.330.02*0.780.05*海参海参120mg/kg3.820.44*0.420.05*124.047.13*0.380.03*0.850.04*海参海参240mg/kg3.750.27*0.410.03*121.495.41*0.410.04*0.930.06*鲍鱼鲍鱼70mg/kg3.530.220.380.04106.059.180.300.020.720.03*鲍鱼鲍鱼140mg/kg3.420.360.390.04*110.187.61*0.350.04*0.790.04*鲍鱼鲍鱼280mg/kg3.690.30*

17、0.410.02*116.706.61*0.350.03*0.820.06*鱼翅鱼翅60mg/kg3.590.370.380.04*112.967.62*0.300.020.760.08*鱼翅鱼翅120mg/kg3.640.210.390.04*118.156.11*0.370.04*0.820.04*鱼翅鱼翅240mg/kg3.910.38*0.390.06*123.535.17*0.400.04*0.890.04*阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 组别吞噬率%吞噬指数正常对照组35.695.291.910.48模型

18、对照组17.852.45#1.070.28#阳性对照组27.424.37*1.470.31*阿胶60mg/kg23.553.74*1.360.33*阿胶120mg/kg26.081.65*1.460.21*阿胶240mg/kg30.252.39*1.670.29*海参60mg/kg26.714.83*1.440.32*海参120mg/kg28.413.47*1.490.24*海参240mg/kg29.474.55*1.650.29*鲍鱼70mg/kg22.364.33*1.420.34*鲍鱼140mg/kg26.255.64*1.610.44*鲍鱼280mg/kg28.744.61*1.580

19、.40*鱼翅60mg/kg26.622.70*1.470.21*鱼翅120mg/kg28.302.65*1.510.24*鱼翅240mg/kg31.414.06*1.570.27* 促进非特异性免疫机能促进非特异性免疫机能阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的效果相近 阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对小鼠细胞因子IL-3,IL-4以及IFN- 含量的影响组别IL-3(pg/mL)IFN-(pg/mL)IL-4 (pg/mL)IFN-/IL-4正常对照组5.840.4980.007.442.290.4136.067.37模型对照组4.430.29#47.752.45#4.540.36#10.390.41#阳性对照组5

20、.290.3766.754.95*3.250.1322.834.63*阿胶60mg/kg4.270.3658.929.133.780.0915.592.28阿胶120mg/kg5.040.5661.505.26*3.130.28*20.483.62*阿胶240mg/kg5.620.61*72.083.70*2.770.20*25.282.07*海参60mg/kg4.830.4165.084.28*2.970.14*21.931.54*海参120mg/kg5.310.32*72.254.45*2.650.69*27.695.77*海参240mg/kg6.070.63*73.754.49*2.69

21、0.27*27.552.11*鲍鱼70mg/kg4.250.6158.384.513.750.21*15.672.07鲍鱼140mg/kg4.420.3162.385.58*3.000.15*20.912.68*鲍鱼280mg/kg5.180.4763.581.43*2.920.25*23.512.08*鱼翅60mg/kg4.460.5762.255.12*3.360.58*11.958.70*鱼翅120mg/kg4.560.2266.7513.45*3.060.45*21.544.54*鱼翅240mg/kg4.520.5570.623.38*2.610.34*27.382.51*对小鼠血清中

22、细胞因子水平的影响对小鼠血清中细胞因子水平的影响阿胶、鲍鱼、鱼翅的作用效果相当。96.8%147.6% 92.8% 95.3% 逆转逆转Th1/Th2 漂移漂移 阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下小鼠的特异性和非特异性免疫具有全方位的调节作用。小结小结2. 2. 阿胶、海参抗疲劳活性比较研究阿胶、海参抗疲劳活性比较研究1）剂量确定）剂量确定(蛋白含量分别为150、300和600 mg/Kg.bw )2 2）动物分组）动物分组正常对照组（N）低高剂量组阿胶海参中3）结果）结果显著提高正常小鼠负重游泳能力显著提高正常小鼠负重游泳能力02468101214161820*200-800mg/kg200-

23、800mg/kg阿胶海参N对小鼠血红蛋白含量的影响对小鼠血红蛋白含量的影响组别游泳前血红蛋白（g/L）游泳后血红蛋白（g/L）正常组141.78.94137.37.85#阿胶200mg/kg157.62.53*154.19.17*阿胶400mg/kg157.910.3*155.18.22*阿胶800mg/kg158.38.62*159.89.37*海参200mg/kg155.53.74*157.76.85*海参400mg/kg158.912.4*157.77.72*海参800mg/kg158.89.79*156.97.51*显著提高安静状态下小鼠体内血红蛋白含量 维持运动小鼠体内血红蛋白含量的

24、相对稳定 对小鼠血乳酸水平的影响对小鼠血乳酸水平的影响组别游泳前（m mol/l）游泳10min（m mol/l）游泳10min休息20min（m mol/l）正常组1.560.423.230.822.780.80阿胶200mg/kg1.550.672.160.55*1.970.47*阿胶400mg/kg1.470.602.220.58*1.950.66*阿胶800mg/kg1.440.452.380.51*1.930.35*海参200mg/kg1.260.302.150.41*1.910.49*海参400mg/kg1.220.392.210.65*1.930.62*海参800mg/kg1.2

25、20.412.350.57*1.910.59*显著降低运动小鼠血乳酸的生成显著促进运动后血乳酸的消除对运动后小鼠体内血清尿素氮的影响对运动后小鼠体内血清尿素氮的影响组别负重游泳时间（min）血清尿素氮（m mol/l）正常组7.382.4310.70.81阿胶200mg/kg14.93.71*7.190.50*阿胶400mg/kg11.81.49*6.820.80*阿胶800mg/kg10.3 0.996.950.67*海参200mg/kg16.43.15*6.230.81*海参400mg/kg13.83.24*6.360.57*海参800mg/kg12.14.38*6.750.79*加速运动后血清尿素氮的清除 34.5%39.5% 阿胶和海参具有显著的抗疲劳和提高运动耐