新氨基糖苷类抗生素vertimicin的体内抗菌活性研究

1、            作者：李聪然 游雪甫 张伟新 娄人慧 杨信怡 王跃明 陈慧贞 蒋建东【摘要】  目的 评价新氨基糖苷类抗生素vertimicin(VTM)的体内抗菌活性。方法 采用小鼠全身感染模型，观察VTM对临床分离大肠埃希菌(E.coli)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)、铜绿假单胞菌(Ps.aeruginosa)和金葡菌(S.aureus)腹腔感染小鼠的体内疗效；采用兔皮肤烫伤感染模型、小鼠泌尿道上行性感染模型观察VTM对临床分离大肠埃希菌局部感染的体

2、内疗效，并与对照药进行比较。结果 VTM皮下或静脉给药对E.coli 9612、K.pneumoniae 935、Ps.aeruginosa 9417和S.aureus 9344腹腔感染小鼠具有相似的体内疗效，皮下给药的ED50值分别为0.67、0.29、2.41和0.99mg/kg，静脉给药的ED50值分别为0.46、0.23、0.99和1.52mg/kg，体内疗效与奈替米星相近。兔皮肤烫伤感染模型中，VTM各剂量组兔皮肤组织活菌落数明显低于对照组(P<0.05或0.01)。小鼠泌尿道上行性感染模型中，VTM各剂量组肾组织活菌落数明显低于对照组，肾剖面盖印细菌阴性率明显高于对照组(P&

3、lt;0.01)，抗菌活性优于庆大霉素。结论 VTM对全身和局部感染动物均显示较好保护作用，体内疗效与奈替米星相近。 【关键词】  Vertimicin 半数有效量 泌尿道上行性感染 皮肤烫伤感染    In vivo antibacterial activity of a new aminoglycoside antibiotic, vertimicin      ABSTRACT  Objective  To investigate the in vivo antibacteria

4、l activity of vertimicin.  Methods  The in vivo efficacies of vertimicin were evaluated in mice with experimental systemic infection caused by E.coli, K.pneumoniae, Ps.aeruginosae and S.aureus, skinburned rabbits infected with E.coli 9612 and mice transurethrally infected with E.coli 9612,

5、 and compared with those of the control.  Results  Vertimicin given by s.c. or i.v. had similar effects on mice systemically infected with E.coli 9612, K.pneumoniae 935, Ps.aeruginosae 9417 and S.aureus 9344, the ED50s of vertimicin given by s.c. were 0.67, 0.29, 2.41 and 0.99 mg/kg respec

6、tively, and those given by i.v. were 0.46, 0.23, 0.99 and 1.52 mg/kg respectively, the in vivo activity was similar to that of netilmicin. In skinburned rabbits infected with E.coli, and treated with vertimicin were significantly reduced the skin bacteria counts compared to the control (P<0.05 or

7、 P<0.01). In mice transurethrally infected with E.coli, the renal colony counts for the vertimicin treated groups were significantly lower than that of the control, and the negative ratios of kidney stamping were significantly higher than that of the control (P<0.01),the activity of vertimicin

8、 was better than that of gentamicin.  Conclusion Vertimicin had relatively good protection to animals with systemic or local infections, and the in vivo activity was similar to that of netilmicin.    KEY WORDS  Vertimicin;  ED50;  Transurethral infection;  Ski

9、nburned infection     Vertimicin(VTM，曾译威替米星)是浙江康乐集团有限公司温州制药厂在verdamicin(VDM)1的基础上，通过1N位乙基化合成的一种新的氨基糖苷类抗生素，与VDM、庆大霉素(GM)、依替米星(ETM)、奈替米星(NTM)同属氨基糖苷类的GM亚组(Fig.1)。氨基糖苷类具有广泛的抗肠杆菌属和其它需氧革兰阴性菌属活性，VTM的体外抗菌活性实验显示其对革兰阴性菌有较强的抗菌活性(与NTM相近)，并且是浓度依赖性的杀菌剂2。此外我们还发现其对革兰阳性菌也有一定的体外抗菌活性。本文进一步研究VTM的体内抗

10、菌活性。    Fig.1    Chemical structures of vertimicin and netilmicin    1  材料和方法    1.1  药物及其配制    硫酸VTM(效价538g/mg，批号20010122)、硫酸VDM(效价550g/mg，批号20000912)、硫酸ETM(效价614g/mg，批号200001)和硫酸NTM(效价569g/mg，批号20000301)均由浙江康乐药业有限

11、公司提供；GM(效价636g/mg，批号03269713)为中国药品生物制品检定所标准品。药物配制时按实际活性计算。    1.2  动物    ICR小鼠，外观健康，体重1822g，雌、雄各半(全身感染)，或体重2022g，雌性(泌尿道上行性感染)，由北京维通利华实验动物技术有限公司供应，许可证号：SCXK1100008。新西兰兔，雄性，体重2.53kg，由中国药品生物制品检定所供应，许可证号：2000第07号。    1.3  细菌及其培养稀释方法   

12、; (1)实验菌株  用于小鼠全身感染的菌株为大肠埃希菌(E.coli)9612、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)935、铜绿假单胞菌(Ps.aeruginosa)9417和金葡菌(S.aureus)9344；用于兔皮肤烫伤和小鼠泌尿道上行性感染的菌株为E.coli 9612。所有菌株均为临床分离株，经实验室鉴定后使用。    (2)感染菌液制备    小鼠全身感染  将感染菌分别接种于10ml增菌肉汤(Nutrient No.2，Oxoid，0.5%；Yeast Extract，Oxoid，0.5%，用蒸

13、馏水配制)中，35孵育6h，取0.2ml转种于10ml增菌肉汤中，35再孵育18h，作为感染原菌液。将原菌液用生理盐水作适当稀释，而后用5%高活性干酵母稀释至感染所需浓度。    兔皮肤烫伤感染  同法制备E.coli 9612的感染原菌液。将原菌液用生理盐水稀释10倍，得感染菌液，感染浓度为1×108CFU/ml。    小鼠泌尿道上行性感染  将E.coli 9612置37水浴摇床振荡(140r/min)培养过夜，培养液6500×g、4离心10min，沉淀用5%高活性干酵母重悬，终浓度为4.

14、4×1010CFU/ml，用于感染。    1.4  实验方法    小鼠全身感染  受试小鼠随机分组，每组10只，雌、雄各半，腹腔注入100%最小致死量(100% MLD)的菌液0.5ml感染，于感染后15min和6h分别皮下或静脉注射给药2次，感染对照不加处理，观察7d内动物死亡数，用Bliss法3计算半数有效剂量(ED50)及其95%可信限，进行统计学处理。    兔皮肤烫伤感染  健康新西兰兔，试验前一天背部脱毛。试验当天静脉注射戊巴比妥钠(30mg/kg)

15、麻醉后，消毒背部皮肤，用自制温控电烫仪(100，10s)在兔背部脊柱两侧各2cm处依次致烫伤，共8处，造成深II度烫伤，烫伤面积约为2.54cm2(直径18mm)。烫伤15min后皮内注射0.1ml菌液感染，用自制感染保护罩保护烫伤部位，并用502胶固定。烫伤1h后每个创面用消毒干纱布覆盖并均匀滴加0.4ml受试药液，对照给予同体积的生理盐水，外层用消毒油纱布覆盖以保持创面湿润。给药后24h取创面组织，研磨计数组织活菌落数,用SPSS10.0软件进行统计学处理4。- 28 焦灵利，倪孟祥，陈日，等. 头孢唑林钠联合舒巴坦钠对产酶和非产酶菌的体内抗菌活性J. 中国药师，2000,3(5):26629 Gavalda J, Torres C, Tenorio C, et al. Efficacy of ampicillin plus ceftriaxone in treatment of expeimental endocardi