乌蕨不同部位总黄酮和元素的分析

1、乌蕨不同部位总黄酮和元素的分析【摘要】 ：目的比较乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位总黄酮和元素的含量差异。方法采用可见分光光度法测定不同部位总黄酮的含量；采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES法)测定不同部位元素的含量。结果乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位总黄酮含量分别11.89%、4.47、3.46和11.75%，不同药用部位元素的含量存在一定的差异。结论乌蕨含有丰富的黄酮类化合物和多种元素，具开发价值。 【关键词】 乌蕨；不同部位；总黄酮；元素Abstract: ObjectiveComparison of the content of general flavone and ele

2、ments in the different parts of Stenoloma chusanum(L.)Ching.MethodsTotal flavone was determined by vis spectrophotometer.Elements were determined by inductively coupled plasmaatomic emission spectrometry (ICPAES).ResultsThe contents of general flavone in the different parts of Stenoloma chusanum(L.)

3、Ching are respectively 11.89%,4.47,3.46 and 11.75%.And there are some differences in the contents of elements between the different parts.ConclusionThere are abundant elements and general flavone in the different parts of Stenoloma chusanum(L.)Ching.As the result reveals that Stenoloma chusanum(L.)C

4、hing is very valuable.Key words：Stenoloma chusanum(L.) Ching；different parts；general Flavonoids；element 乌蕨Stenoloma chusanum(L.)Ching为鳞始蕨科植物乌蕨的全草，又名野鸡尾、金花草、中华金粉蕨，具有清热、解毒、利湿、止血的功效1。本文就乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位的总黄酮和微量元素含量进行比较分析，为乌蕨的进一步研究和资源开发提供依据。1 仪器与试药1.1 仪器 WND200A型高速中药粉碎机（上海微型电机厂），BS224S精密天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)

5、，TU1900双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司），IRIS/AP型电感耦合等离子体发射光谱仪(美国TJA公司)，全自动回流消化仪(重庆南岸玻璃仪器厂)。1.2 试药 芦丁标准品(药品生物制品检定所，批号为0080-9705)；硝酸、高氯酸均为优级纯，其他试剂均为分析纯，测微量元素用水为双蒸水。乌蕨药材于2008年10月采于杭州九溪，经熊耀康教授鉴定为乌蕨Stenoloma chusanum(L.)Ching的地上部分，阴干，粉碎，备用。2 实验方法与结果2.1 总黄酮含量测定42.1.1 对照品溶液的制备：精密称取105干燥恒重的芦丁对照品16.50mg，加60%乙醇溶解定容

6、于50ml容量瓶，得浓度为0.33mg/ml对照品溶液，备用。2.1.2 供试品溶液的制备：定量称取乌蕨干燥粗粉5.0g，加16倍量0.1HCl-60乙醇回流提取4h，提取1次，提取液减压浓缩，加60%乙醇定容至25ml，作为供试品溶液备用。2.1.3 标准曲线的制作：精密吸取标准品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml，分别置25ml容量瓶中，加入5%NaNO21.0ml，摇匀，放置6min后加入10%Al(NO3)31.0ml，摇匀，放置6min后加入4%NaOH 10ml，再加60%乙醇稀释至刻度，混匀，静置15min，于510nm处，以相应试剂作空白，测定吸光度，以芦丁

7、浓度为纵坐标，以吸光度值为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2.778X-0.0775（r=0.9991），结果表明芦丁在0.0160.99mg范围内呈良好的线性关系。1 2.1.4 精密度实验：取芦丁对照品溶液2.0ml，置25ml容量瓶中，按“2.1.3”项操作，平行测定5次，结果其RSD为0.21，表明精密度良好。2.1.5 重复性实验：取同1份样品溶液5份，分别按“2.1.3”项操作，结果RSD为0.72%。2.1.6 稳定性实验：取1份样品溶液，按上述实验方法在显色完全后0、10、20、30、45、60min分别测定吸光度，结果RSD为1.08%。实验表明：供试品溶液在1.0h内

8、稳定的。2.1.7 加样回收率实验：取已知总黄酮含量的乌蕨样品6份，分别精密添加已知浓度的芦丁对照品适量。按供试品溶液制备方法制备，按“2.1.3”项操作，测定总黄酮含量，测定回收率，结果平均回收率为99.34，RSD为1.82。2.1.8 乌蕨不同部位总黄酮含量的测定：精密吸取提取液适量，按“2.1.3”项操作，测定吸光度A，结果见表1。 表1 乌蕨根、茎、叶、全草等不同部位总黄酮含量测定结果（略）2.2 微量元素含量的测定52.2.1 供试品溶液的制备：各取药材约0.5g，精密称定，置50ml凯氏烧瓶，加8.0ml消化液V(HNO3)V(HClO4)=41，静置过夜，加热回流消化至无色透明

9、，冷却后，定量转移至100mL容量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，备用。取相同体积的消化液，同法消化，制备空白溶液。2.2.2 混合标准溶液的制备：分别取各重金属元素标准品溶液适量，用5%硝酸溶液制成混合溶液，梯度稀释，作为混合标准品溶液备用。2.2.3 测定方法：仪器工作参数：检测器CID的低波段（265nm）积分时间：15s；高波段（265nm）积分时间：5s；进样蠕动泵转速：100r/min；进样雾化器氩气压力：28psi；辅助气流量：1.0L/min；高频发生器功率：1500W；样品冲洗时间：5s；测定波长范围：193.7407.7nm。 依次将仪器的进样管插入各个浓度的混合标准品溶液

10、中进行测定，以每一浓度测得的3次读数的平均值为纵坐标，相应元素标准溶液浓度为横坐标，作标准曲线，并进行方法学考察。由各元素的标准曲线计算微量元素的含量，测定结果见表2。表2 乌蕨根、茎、全草、叶等不同部位微量元素含量测定结果（略）3 讨论3.1 由实验可知，乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位总黄酮含量分别11.89%、4.47、3.46和11.75%，总黄酮含量在叶中较高，而根与茎中总黄酮含量较低。乌蕨富含黄酮类化合物，而黄酮类化合物在临床上具有预防血液类疾病、冠状动脉硬化、抗癌、抗菌、抗衰老、抗糖尿病等作用，食品上作为甜味剂、天然色素等食品添加剂。因此提取乌蕨中的黄酮类化合物，不单可以用于临床药物的研究，也可用于食品与方面。3.2 元素测定结果表明，乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位均含有丰富的微量元素，其中含B、Ca、K、Na、P、S等多种常量元素；此外还含Cu、Fe、Zn、Cr、Co等多种人体必需的微量元素。其中K、Fe、Ca、Na等元素含量均较高，其次为Mn、Zn、Cu。而有害元素Pb、As、Cu在地上部分含量较低，根中Pb、As、Cu含量都高出了药用植物及制剂进口绿色行业标准（Hg0.2g/g、Pb5.0g/g、As2.0g/g、Cd0.3g/g