泽颖推出思维导图把自己的想法画出来画的越多说明你掌握的越好拿起色笔来吧写出关键词

1、专题三 植物的组织培养技术关注流程图各个步骤的注意点大家一起解读思维导图：一、 原理1. 细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能 力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。所以要离体才能表现出全能性。二、 菊花的 组织培养 1. 过 程： 脱分化 再分化外植体愈伤组织 芽、根完整植株思维导图思维扩散：1.1分化：分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。生理意义：使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能

2、的效率。12细胞脱分化：就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。创伤和外源激素可以使外植体细胞的合成代谢加强，不断分裂增殖形成愈伤组织。13愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：（了解）组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖2.影响因素2.1内因（外植体的选择）种类：进行无性繁殖的植物容易进行组织培养年龄：菊花组织培养一

3、般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。2.2外因营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。具体见下图（了解）：生长素细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细

4、胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高3实验设计制备MS固体培养基-外植体消毒-接种-培养-移栽-栽培21配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。22配制培养基：应加入的物质有琼脂、蔗糖（提供碳源，维持细胞渗透压）、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升。在菊花组织培养中，可以不添加植物激素，原因是菊花茎段组织培养比较容易。23灭菌：采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。4：外植体消毒的流程图：旺盛嫩枝(流水)冲洗刷洗，冲洗20分钟左右(无菌吸水纸)吸干表面水分(70的酒精)摇动2-3次6-

5、7秒(无菌水)清洗(无菌吸水纸)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡12分钟(无菌水)清洗3次思考7在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？ 不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。3发酵操作5：接种、培养、移栽和栽培：51前期准备：用70的酒精消毒工作台，点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。52接种操作：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种78个外植体。思考8外植体接种与细菌接种相似之处是操作步骤相同，而且都要求无菌操作。53培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照。

6、54移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。思考9外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。课题2 月季的花药培养1被子植物的花粉发育：结合教材内容填下列示意图小孢子母细胞（2n）（ ）时期（n）单核（ ）期（n）双核期（ ）细胞核（n）（ ）细胞核（n）（ ）细胞（n）（ ）细胞（n）（ ）个精子(n)（ ）分裂（ ）分裂单核（ ）期（n）（ ）分裂思考2由此可见，被子植物的花粉的

7、发育要经历 时期， 期和 期等阶段。四分体 单核 双核思考3在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生 个精子；在一枚花药中可以产生 个花粉。思考4营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。 8 很多2.产生花粉植株的两条途径：（ ）花药中的花粉（ ）（ ）（ 胚状体 ）（ 愈伤组织 ）（ ）丛芽生根移栽这两种途径的区别主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。关于“分化”“再分化”：胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为 分化 ， 而把从愈伤组织到从芽的过程称为 再分化 。3.影响花药培养的因素：3.1材料的选择：从花药来看，应当选择（A

8、初花期、B盛花期、C晚花期）的花药；A从花粉来看，应当选择（A四分体期、B单核期、C双核期、D萌发期）的花粉；B从花蕾来看，应当选择（A完全未开放、B略微开放、C完全盛开）的花蕾。A思考5除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。思考6为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。思考7花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是 外界环境中的微生物容易侵入到花药中 。4实验设计4.1材料的选择：选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，最常用的

9、染色剂是 醋酸洋红溶液 和 焙花青铬钒溶液 ，它们分别可以将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。其中焙花青铬钒:需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。4.2说出材料的消毒：花蕾（70酒精）大约30s（无菌水）清洗（无菌吸水纸）吸干水分（1氯化汞溶液）24min（无菌水）冲洗思考8月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。4.3接种和培养：1剥取花药：消毒后的花蕾，要在无菌 条件下除去花萼、花瓣。注意点：一是注意不要损伤花药，原因是容易从受伤部位产生愈伤组织；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。2接种花药：剥取的花药要立刻接种到 培养基 上。每个培养瓶接种 710 个花药。3培养：花药培养利用的培养基是 MS 培养基，pH为5.8，温度为25，幼苗形成之前不需要光照。思考10培养基中用量最高：花药， IAA ；诱导丛芽或胚状体， BA ；诱导生根， IAA 。4培养2030d后，花药开裂，长出 愈伤组织 或释放出 胚状体 。前者还要转移到 分化培养基 上进行分