萌动激活灵芝孢子抗癌活性研究

1、第4卷 第1期 中 国 食 品 学 报 Vol.4 No.12004年3月 Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology Mar.2004萌动激活灵芝孢子抗癌活性研究刘 昕 袁建平 王江海(中山大学国家教育部食品工程研究中心 广州510275)摘 要 进行了休眠期灵芝孢子、破壁灵芝孢子、萌动激活灵芝孢子及萌动激活全破壁灵芝孢子对小鼠肝癌 和网状细胞肉瘤L-II细胞生长的抑制作用研究，结果表明，休眠期灵芝孢子经萌动激活可显著提升灵芝孢子 的药理活性，萌动激活全破壁灵芝孢子具有显著的抗癌活性，并呈明显的量效关系。关键词 灵芝

2、孢子 萌动 激活 抗癌活性文章编号 1009-7848(2004)01-0083-04灵芝(Ganoderma lucidum)是一种药用真 菌，是传统中药宝库中的一味珍贵药材，已被广 泛用于预防和治疗多种疾病，如高血压、糖尿 病、神经衰弱、肝病、肾炎、胃溃疡、高血脂、 哮喘、内分泌紊乱、免疫系统疾病和肿瘤等疾 病17。因此，灵芝及其孢子具有很高的研究和药 用价值。尽管灵芝子实体入药在中国已有几千年的历史，但灵芝孢子到上个世纪才开始为人们所认识 和利用。灵芝孢子内富含大量的生物活性物质， 其药理活性比灵芝子实体更高8,9。最新的研究表 明，灵芝孢子具有显著的抗肿瘤1013和抗艾滋病 毒的活性8

3、。灵芝孢子的活性高低及其药理作用 发挥与其存在的状态密切相关。研究发现，将休 眠期的灵芝孢子进行萌动激活可显著提升其药理活性，而且只有将坚韧的灵芝孢子壁完全打碎 后，萌动激活灵芝孢子中的生物活性物质才能完 全释放及有利于被人体充分吸收利用。作为保健 食品的萌动激活全破壁灵芝孢子（学者灵芝）已 被证明具有显著的药理活性13，特别是在抑制癌 细胞的转移和预防癌症的复发等方面能发挥重要作用。本文现将休眠期灵芝孢子、破壁灵芝孢 子、萌动激活灵芝孢子及萌动激活全破壁灵芝孢 子 (SBGS) 动物实验组抗癌试验的对比研究结 果公布如下。1 材料和方法1.1 原料及其预处理灵芝孢子原料产于由中山大学国家教育

4、部食品工程研究中心在福建高山林区建立的段木灵芝抚育基地。将新鲜饱满的灵芝孢子经低温干燥处 理使其进入低温休眠期，再将休眠的灵芝孢子进 行萌动激活和超微破壁处理(破壁率大于 99.8%)。实验所用的休眠期灵芝孢子、破壁灵芝 孢子、萌动激活灵芝孢子及萌动激活全破壁灵芝 孢子均由广州绿色盈康生物工程有限公司提供。1.2 实验动物NIH种小白鼠，7周龄，鼠重2022g，由广 东省卫生厅医用实验动物场提供。实验用鼠是在 无病原体的常规环境下，用标准粒状饲料和水喂 养。1.3 化学药品环磷酰胺(一种毒性大的抗肿瘤化疗药物) 由上海第十二制药厂提供。1.4 实验步骤收稿日期：2004-02-20作者简介：刘

5、昕，男，1957年出生，高级工程师在无菌条件下抽取腹腔保种7d的腹水型小 鼠肝癌和网状细胞肉瘤L-II细胞，用生理盐水 稀释得到浓度为5107 细胞/mL的肿瘤细胞悬浮 液。本实验接种0.2mL肿瘤细胞悬浮液 (1107 细胞) 于每只小鼠的右腋皮下。接种后的小鼠被 随机分成8组：(1) 阴性对照组：每天20mL/kg 84 中 国 食 品 学 报 2004年第1期生理盐水；(2) 阳性对照组：每天20mL/kg环 磷酰胺（CTX）；(3) 休眠期灵芝孢子（DS） 组：每天8g/kg（分两次）；(4) 全破壁灵芝孢 子（SBDS）组：每天8g/kg（分两次）；(5) 萌 动激活灵芝孢子（GS）

6、组：每天8g/kg（分两 次）；(6) 萌动激活全破壁灵芝孢子（SBGS）1 组：每天2g/kg；(7) SBGS 2组：每天4g/kg； (8) SBGS 3组：每天8g/kg（分两次）。每组10 只小鼠的平均重量基本相同。各组小鼠均于接种 肿瘤细胞24h后，连续7d用灌胃器给药。在最 后一次给药后的次日，用颈椎离断法处死小鼠， 并迅速剥离肿瘤后称重，以肿瘤大小和抑瘤率来 评价所用药物或灵芝孢子产品的抗癌活性。用t 检验比较各用药组与对照组之间的差异，当P 0.05时被认为各用药组平均瘤重与阴性对照组平 均瘤重之间存在显著差异。2 结果和讨论将小鼠肝癌细胞和网状细胞肉瘤L-II分别 移植于小

7、鼠后，第2天即开始分别喂食休眠期灵 芝孢子（DS）、破壁灵芝孢子（SBDS）、萌动激 活灵芝孢子（GS）、萌动激活全破壁灵芝孢子（SBGS）和环磷酰胺（CTX），连续喂食7d后，研究不同类型灵芝孢子对小鼠肝癌细胞和网状细胞肉瘤L-II的抑制作用，实验结果见图1和图 2。阴性对照组中小鼠肝癌和网状细胞肉瘤L-II 细胞重量分别为（1.78 0.13）g和（2.21 0.21）g (10只小鼠平均肿瘤重量，以100%表示)，其它 试验组小鼠平均肿瘤重量（以相对于对照组小鼠 肿瘤重量的百分比表示）与对照组有显著差异（P0.001），以100表示。不同类型的灵芝孢子对小鼠肝癌细胞及网状细胞肉瘤L-II

8、的生长均 有显著的抑制作用，但抑瘤效果有明显差别。结 果显示，休眠期灵芝孢子能分别减少两种肿瘤大 小至对照组的81.0和82.5（抑瘤率分别为 19和17.5），而萌动激活灵芝孢子能分别减少 两种肿瘤大小至对照组的64.3和64.1（抑瘤 率分别为35.7和35.9），表明萌动激活灵芝孢 子比休眠期灵芝孢子具有更高的药理活性。研究 发现，SBGS比未破壁的萌动激活灵芝孢子具有 更显著的抑制肿瘤作用，并呈现明显的量效关 系。图3显示了SBGS剂量与抑瘤率的量效关系 曲线。正如图13所示，剂量为8g/kgd的SBGS能分别减少小鼠肝癌及网状细胞肉瘤L-II细胞 重量至对照组的14.1和16.6(抑

9、瘤率分别为85.9和83.4)，具有比环磷酰胺更高的抑制肿 瘤活性（抑瘤率分别为79.1和69.4）。实验结果表明，灵芝孢子药理作用的发挥与 灵芝孢子破壁与否密切相关，未破壁灵芝孢子中 的生物活性物质难以被人体吸收。实验证明，服 用未破壁的灵芝孢子后，在试验对象粪便中可发 现大量完整的灵芝孢子。从实验结果可以看出，图1 不同类型灵芝孢子对小鼠肝癌细胞的抑制作用Fig.1 The inhibitory effect of various ganoderma spores on mouse hepatoma cells图2 不同类型灵芝孢子对小鼠网状细胞肉瘤L-II 的抑制作用Fig.2 The

10、inhibitory effect of various ganoderma spores on mouse reticulocyte sarcoma L-II第4卷 第1期 萌动激活灵芝孢子抗癌活性研究 85图3 SBGS抑制小鼠肿瘤细胞的量效关系Fig.3 The dose-dependent inhibitions of SBGSon mouse tumor cells剂量大约为1g/(kgd) 的SBGS可达到剂量为 8g/(kgd) 未经破壁的萌动激活灵芝孢子所能达 到的抑瘤率(36左右)；剂量大约为0.4g/(kgd) 的SBGS可达到剂量为8g/(kgd) 未经萌动的休 眠期灵芝

11、孢子所得到的抑瘤率 (18左右)。动 物实验表明，未破壁或未萌动的灵芝孢子与 SBGS相比，SBGS具有很高的药理活性和抗癌活 性。在实验剂量范围内，各种灵芝孢子对小鼠生 长无不良影响，无任何毒副作用。实验小鼠活动 正常，毛色有光泽，未出现松、脱毛现象，未见 致畸胎和细胞染色体损伤作用。各实验组的小鼠 平均体重增加无显著差异。因此，SBGS有望提 高肝癌及其它癌症病人的生存率。它作为一种新 的抗癌药物单独使用或同其它抗癌药物共同使 用，在临床应用方面具有很高的医疗价值 1013。实验表明，萌动过程的生物转化能显著提升 灵芝孢子的药理活性。灵芝孢子进入休眠期后， 酶活性降低，生理活性较弱。萌动是

12、将有生命力 的灵芝孢子从休眠的静态跃升为生理活动频繁的动态的过程。此时灵芝孢子的呼吸作用增强，酶 的种类和数量显著增加。酶活性的加强使灵芝孢 子的新陈代谢能在较高水平上进行，同时启动大 量酶促反应进行生物转化，灵芝孢子中储存的各 种物质被转化和提升为可供新生命利用的高活性成分，使生物活性物质含量显著增加，并可能产 生新的高活性物质。灵芝孢子的萌动过程分为3个阶段14：(1) 激活（Activation）：在适当的环 境条件下使休眠的灵芝孢子激活，如适宜的温度 和充足的养分，包括水、氧、二氧化碳、糖和氨 基酸等，以及微量但可预示环境适合程度的无机盐；(2) 各向同性生长（Isotropic gr

13、owth）：孢 子形态开始变化，同时伴随各种代谢的恢复，包 括呼吸作用及核糖核酸和蛋白质的合成；(3) 极性生长（Polarized growth）：由各向同性生长 转变为极性生长，开始酝酿并形成能产生新菌丝 体的萌发管。萌动激活能显著提升灵芝孢子的活性，但并 非所有的灵芝孢子均能通过萌动而使其活性提 高，研究发现，只有具备新鲜、饱满并具有生命 力的灵芝孢子才能通过萌动激活而有效提升其药理活性。灵芝栽培的环境和营养条件对灵芝孢子 的品质和活性有重要影响，如用木屑等袋料栽培 收获的灵芝孢子个体较小、皱缩、内含物少、活 性低，孢子萌发率很低；而用段木培植收获的灵 芝孢子个体较大、饱满、活性高、表面

14、光滑，有 利于灵芝孢子的萌发，萌发率很高15。大量的实验结果显示，通过对休眠期灵芝孢 子进行萌动激活可显著提升其药理活性，而且只 有灵芝孢子壁被完全破碎后，灵芝孢子中的生物 活性物质才能完全释放及有利于被人体充分吸 收。因此，SBGS具有显著的抗癌活性，特别是 在抑制癌细胞的转移和预防癌症的复发等方面能发挥重要作用。肿瘤是全身性疾病在局部的表现，不是单纯 以局部性治疗就可以解决。尽管西医的三大疗法 可使中晚期肿瘤病人的肿瘤缩小或消失，但残留 的癌细胞很可能复发并通过血道、淋巴道和种植 性三种方式转移和扩散至其它部位。当癌细胞广 泛转移后，手术疗法已无能为力，而放疗和化疗 对免疫功能、造血功能及

15、消化系统有严重的毒副 作用，反而促使易发性肿瘤患者的病情更加恶 化。因此，西医的三大疗法不可能完全解决肿瘤 的复发和转移问题。通过近八年时间长期的临床 跟踪观察及对一些病人的临床实验证明，SBGS 能显著减轻化学治疗或放射治疗的毒副作用。因此，对于正在进行或已完成化疗或放疗的癌症病 人而言，服用SBGS将会获得理想的治疗效果。86 中 国 食 品 学 报 2004年第1期参 考 文 献1. El-Mekkawy S., Meselhy M.R., Nakamura N. et al. Anti-HIV-1 and anti-HIV-1-protease substances from Gano

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