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文档简介
1、薄层色谱法对饮料中色素的测定实验目的掌握薄层色谱法对饮料中色素的测定的方法。实验原理薄层色谱法又称薄板层析法。薄层色谱使用涂敷有支持介质硅胶或氧化铝的平板为支撑体 ,流动相的移动是依靠毛细作用。将试样点在层析板的一端,并将该端浸入作为流动相的溶剂 (常称之为展开剂中 ,试样点随着溶剂向上移动。由于不同物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时 ,这些物质也随流动相一起运动 ,并在两相间进行反复多次的分配,这就使得那些分配系数只有微小差别的物质 ,在移动速度上产生明显的差别,从而使各组分分离。通常用比移值R 来标记和比较各斑点的位置 ,其定义是溶质移动速度与展开剂(流动相的移动
2、速度之比 :实验仪器及药品1 柠檬黄样品2 带有色素的饮料芬达 (橙味3 无水乙醇4 层析缸5 玻璃毛细管 (直径约 1 mm6 薄层色谱板实验条件实验步骤0.预备 :将层析板置于烘箱中 ,于 105活化 30 min 后,保存于干燥器中备用。洗净展开缸 ,晾干待用1.点样 :1 在离层析板的底端2 cm 处用铅笔轻画一条线 ,作为原点线 ,在顶端 2 cm 处也同样画一条线 ,作为前沿线。2 用管口平整的毛细管分别吸取少量各色素溶液及饮料,点样3 毛细管垂直地轻轻接触到层析板的原点线上点样,斑点直径约为 23 mm,间隔约 1 cm。2.层析 :1 在层析缸中加入展开剂约30 mL(在缸中液
3、层约厚1 cm,盖上层析缸盖。待展开剂蒸气在层析缸内达到饱和(约 15 min2 将点好样的层析板斜搁或近垂直地搁在层析缸中,点有薹样堂一鬻浸于展开剂,点有试样的一端浸于展开剂内。3.当展开剂上升到前沿线时,取出层析板 ,晾干 ,观察有色斑点。4.观察现象 ,计算比移值 R : f实验条件实验数据与现象黄色带与柠檬黄样品达到同一高度 ,另有浅黄色低于该高度。饮料中含有柠檬黄和另一种未知色素。备注 :由于时间关系 ,未测定比移值问题与讨论(1 点样时 ,原点太大对实验有何影响 ?答:展开时会造成各种组分交叉或拖尾。(2 层析缸中展开剂的液面高度若超过原点线,对薄层色谱分析有什么影响?答:会使原点到层析点之间距离的数据不精准,比移值偏小。(3
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