生物药物一般生产工艺

1、生物药物一般生产工艺l掌握抗生素、氨基酸、蛋白质、核酸、维生素和辅酶、掌握抗生素、氨基酸、蛋白质、核酸、维生素和辅酶、酶类、甾体、细胞生长调节因子与组织制剂的生产工酶类、甾体、细胞生长调节因子与组织制剂的生产工艺、提取和精制工艺；掌握糖类药物分离纯化的手段艺、提取和精制工艺；掌握糖类药物分离纯化的手段和制备工艺相关技术；掌握脂类药物基本知识和其分和制备工艺相关技术；掌握脂类药物基本知识和其分离纯化的手段和制备工艺相关技术；掌握生物制品的离纯化的手段和制备工艺相关技术；掌握生物制品的分类、一般制造方法及典型生产工艺过程。分类、一般制造方法及典型生产工艺过程。l熟悉抗生素类药物、氨基酸类药物、蛋白

2、质类药物、熟悉抗生素类药物、氨基酸类药物、蛋白质类药物、核酸类药物、维生素及辅酶类药物酶类药物、甾体药核酸类药物、维生素及辅酶类药物酶类药物、甾体药物、细胞生长调节因子与组织制剂的通用生产工艺；物、细胞生长调节因子与组织制剂的通用生产工艺；熟悉氨基酸类药物常用提取方法；熟悉干扰素的生产熟悉氨基酸类药物常用提取方法；熟悉干扰素的生产工艺；熟悉维生素的提取工艺；熟悉生物制品的来源工艺；熟悉维生素的提取工艺；熟悉生物制品的来源及应用。及应用。l了解抗生素药物、胱氨酸、赖氨酸、维生素及辅酶类了解抗生素药物、胱氨酸、赖氨酸、维生素及辅酶类药物的结构和理化性质；了解核酸类药物的基本概念；药物的结构和理化性

3、质；了解核酸类药物的基本概念；了解酶类药物、甾体药物、细胞生长调节因子与组织了解酶类药物、甾体药物、细胞生长调节因子与组织制剂的生产步骤；了解几种糖类药物、脂类药物的制制剂的生产步骤；了解几种糖类药物、脂类药物的制备；了解常用的生物制品的种类及生物制品的发展前备；了解常用的生物制品的种类及生物制品的发展前景。景。l熟练掌握抗生素、氨基酸、蛋白质、核酸、酶类、糖熟练掌握抗生素、氨基酸、蛋白质、核酸、酶类、糖类、脂类、甾体激素、维生素和辅酶类、生物制品、类、脂类、甾体激素、维生素和辅酶类、生物制品、细胞生长调节因子类药物的生产工艺，学会控制工艺细胞生长调节因子类药物的生产工艺，学会控制工艺要点，具

4、备从事生物制药生产及相关工作的能力，能要点，具备从事生物制药生产及相关工作的能力，能够理论联系实际，分析和解决实际问题的能力。够理论联系实际，分析和解决实际问题的能力。l学会根据药物的理化性质、药物来源、菌种，设计生学会根据药物的理化性质、药物来源、菌种，设计生产工艺。产工艺。l针对目标体系，熟练选择合适的分离体系对目标产品针对目标体系，熟练选择合适的分离体系对目标产品进行分离。进行分离。l针对目标体系，熟练选择合适的分离技术和制备工艺。针对目标体系，熟练选择合适的分离技术和制备工艺。l一、抗生素工业生产及工艺一、抗生素工业生产及工艺l 抗生素生产方法：生物合成法、全化学合成抗生素生产方法：生

5、物合成法、全化学合成法半合成法法半合成法l生物合成法也称为微生物发酵法。它将生物合成法也称为微生物发酵法。它将产生菌接种到培养基上，在一定的条件产生菌接种到培养基上，在一定的条件(培养基、温度、培养基、温度、pH、通气、搅拌等、通气、搅拌等)下下培养、繁殖，产生抗生素。然后采用适培养、繁殖，产生抗生素。然后采用适宜的方法将抗生素从发酵液中分离出来。宜的方法将抗生素从发酵液中分离出来。 l青霉素是青霉素是-内酰胺类抗生素的典型代表，内酰胺类抗生素的典型代表，它是指从青霉菌培养液中提制的分子中它是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌

6、细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素。生素。 1877年，法国微生物家巴斯德发现霉菌会抑制尿液中的炭疽杆菌的生长。年，法国微生物家巴斯德发现霉菌会抑制尿液中的炭疽杆菌的生长。1920年，比利时人安德烈年，比利时人安德烈格拉提亚和莎拉格拉提亚和莎拉达斯在发表论文说感染了青霉的达斯在发表论文说感染了青霉的葡萄球菌培养基中，葡萄球菌的生长被抑制了。葡萄球菌培养基中，葡萄球菌的生长被抑制了。1928年夏弗莱明发现青霉素，年夏弗莱明发现青霉素，1929年在年在英国实验病理学杂志英国实验病理学杂志上报道。上报道。1939年弗莱明将点青霉菌菌种提供给澳大利亚病理学家弗洛里和生

7、物化学年弗莱明将点青霉菌菌种提供给澳大利亚病理学家弗洛里和生物化学家钱恩。他们用冷冻干燥法提取了青霉素晶体。家钱恩。他们用冷冻干燥法提取了青霉素晶体。1940年弗洛里和钱恩证实了青霉素对链球菌、白喉杆菌等细菌感染的疗效。年弗洛里和钱恩证实了青霉素对链球菌、白喉杆菌等细菌感染的疗效。1942年美国制药企业开始大批量生产青霉素。年美国制药企业开始大批量生产青霉素。1943年，制药公司已经发现了批量生产青霉素的方法。年，制药公司已经发现了批量生产青霉素的方法。1944年，药物供应足够治疗第二次世界大战期间所有参战的盟军士兵。年，药物供应足够治疗第二次世界大战期间所有参战的盟军士兵。1945年，弗莱明

8、、弗洛里和钱恩分享诺贝尔生理学或医学奖。年，弗莱明、弗洛里和钱恩分享诺贝尔生理学或医学奖。1953年年5月，中国第一批国产青霉素诞生。月，中国第一批国产青霉素诞生。2001年年底，我国青霉素年产量已占世界年总产量的年年底，我国青霉素年产量已占世界年总产量的60，居世界首位。，居世界首位。 青霉素作用机理：青霉素作用机理：（1）作用于核糖核蛋白体的）作用于核糖核蛋白体的50S亚基，通过竞争细菌的粘肽亚基，通过竞争细菌的粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（合成酶，即青霉素结合蛋白（penicillin binding proteins，PBPs），抑制细胞壁的粘肽合成，造成细菌细胞壁缺损，），抑制细胞壁

9、的粘肽合成，造成细菌细胞壁缺损，大量的水分涌进细菌体内，使细菌肿胀、破裂、死亡；大量的水分涌进细菌体内，使细菌肿胀、破裂、死亡；（2）促发自溶酶活性，使细菌溶解。）促发自溶酶活性，使细菌溶解。青霉素最大的不良反应为过敏反应，发生率为青霉素最大的不良反应为过敏反应，发生率为0.7%10%，最为严重的为过敏性休克，死亡率高达，最为严重的为过敏性休克，死亡率高达10%。青霉素本身并不是过敏原。青霉素分子在水溶液中很青霉素本身并不是过敏原。青霉素分子在水溶液中很快重新排列成青霉烯酸，进而分解为青霉噻唑酸。青快重新排列成青霉烯酸，进而分解为青霉噻唑酸。青霉噻唑酸可与人体组织内的霉噻唑酸可与人体组织内的-

10、球蛋白和白蛋白结合成球蛋白和白蛋白结合成青霉噻唑蛋白，青霉噻唑蛋白即为引起青霉素过敏反青霉噻唑蛋白，青霉噻唑蛋白即为引起青霉素过敏反应的主要致敏物质。应的主要致敏物质。l青霉素在水中的溶解度很小，易溶于有机溶剂如氯仿、笨、醋酸乙酯等。而其钠、钾盐则易溶于水和甲醇。青霉素在水中的pK值为，在低低pH（4）条件下，霉素分子中的羧酸不解离，此时，青霉青霉素易溶于有机溶剂素易溶于有机溶剂而难溶于水；在高高pH（5）条件下，羧基发生酸式解离，此时青霉素易溶于水青霉素易溶于水，难溶于有机溶剂。可利用此性质进行萃取与反萃取，精制青霉素。晶体晶体熔点熔点旋光性旋光性稳定性稳定性酸性酸性4.4.羧基酸性羧基酸性

11、强，可成盐强，可成盐5. 5. 水中不水中不稳定，最适稳定，最适pH6pH61.1.白色或黄色无白色或黄色无定形定形2. 2. 不明显不明显3.3.具旋光性具旋光性水中水中pKpK值为，值为，pHpH4 4易溶于易溶于有机溶剂，有机溶剂， pHpH5 5，易溶，易溶于水于水 （1）菌种）菌种 点青霉菌：生产能力很低，不能满足工业生产要求。点青霉菌：生产能力很低，不能满足工业生产要求。 产黄青霉菌：生产能力大为上升。产黄青霉菌：生产能力大为上升。 MinnR-B和和NRRL1951的生产能力分别为的生产能力分别为120U/mL和和100U/mL，后者经诱变处理的变种，生产能力可达，后者经诱变处理

12、的变种，生产能力可达10001500U/mL。但该系菌株可分泌黄色素，影响了成品质量。但该系菌株可分泌黄色素，影响了成品质量。 变种变种51-20：不产色素变种：不产色素变种51-20，其生产能力可达，其生产能力可达6600070000U/mL。 菌株菌株WisQ176：全世界用于生产青霉素的高产菌株，其发酵：全世界用于生产青霉素的高产菌株，其发酵生产水平已达生产水平已达85000UmL以上。以上。 菌种保藏：真空冷冻干燥状态下保存分生孢子；也可用甘油菌种保藏：真空冷冻干燥状态下保存分生孢子；也可用甘油或乳糖溶剂作悬浮剂，在或乳糖溶剂作悬浮剂，在-70冰箱或液氮中保存孢子悬浮液冰箱或液氮中保存

13、孢子悬浮液和营养菌丝体；还可用砂土管保藏。和营养菌丝体；还可用砂土管保藏。冷冻干燥孢子冷冻干燥孢子琼脂斜面琼脂斜面米孢子米孢子种子培养种子培养发酵培养发酵培养过滤过滤青霉素回收青霉素回收灭菌空气灭菌空气消消泡泡剂剂补补 料料碳碳 氮氮 前前源源 源源 体体米孢子米孢子综合利用综合利用图图12-4 青霉素发酵工艺的一般流程图青霉素发酵工艺的一般流程图孢子培养以孢子培养以生产丰富的生产丰富的孢子孢子( (斜面斜面孢子和米孢孢子和米孢子子) )为目的为目的 种子培养则以种子培养则以繁殖菌丝体繁殖菌丝体( (种子罐培养种子罐培养) )为主要目的为主要目的 l将砂土孢子先在用甘油、葡萄糖、蛋白将砂土孢子

14、先在用甘油、葡萄糖、蛋白胨组成的培养基进行斜面培养，经传代胨组成的培养基进行斜面培养，经传代活化。最适生长温度在活化。最适生长温度在2526 ，培养，培养68天，得单菌落，再传斜面，培养天，得单菌落，再传斜面，培养7d，得斜面孢子。再移植到优质小米或大米得斜面孢子。再移植到优质小米或大米固体培养基上，固体培养基上，25，相对湿度，相对湿度45%50%,生长生长7d，制得小米孢子。孢子成熟，制得小米孢子。孢子成熟后进行真空干燥，低温保存备用。后进行真空干燥，低温保存备用。l青霉素常采用三级发酵。青霉素常采用三级发酵。l一级种子发酵：米胞子进入发芽罐，培养基上的孢子一级种子发酵：米胞子进入发芽罐，

15、培养基上的孢子萌发，形成菌丝。接种到以葡萄糖、蔗糖、乳糖、玉萌发，形成菌丝。接种到以葡萄糖、蔗糖、乳糖、玉米浆、碳酸钙、玉米油、消泡剂等为培养基的一级种米浆、碳酸钙、玉米油、消泡剂等为培养基的一级种子罐内。发酵周期为子罐内。发酵周期为4050h，温度，温度271。通无菌。通无菌空气，空气流量空气，空气流量1:3m3/(m3min)，搅拌转速为，搅拌转速为300350r/min。 l二级发酵罐：按二级发酵罐：按10%接种量移种到培养基成分为玉米接种量移种到培养基成分为玉米浆、葡萄糖、玉米油、消泡剂等的二级种子罐内。通浆、葡萄糖、玉米油、消泡剂等的二级种子罐内。通风比为风比为(1: (15) m3

16、/(m3min) ，搅拌转速为，搅拌转速为250280r/min，温度，温度251；发酵周期为；发酵周期为1314h。l二级种子达到要求后，可进入生产罐，培养基成二级种子达到要求后，可进入生产罐，培养基成分为花生饼粉分为花生饼粉(高温高温)、麸质粉、玉米浆、葡萄糖，、麸质粉、玉米浆、葡萄糖，尿素，硫酸铵，硫酸钠、硫代硫酸钠，磷酸二氢尿素，硫酸铵，硫酸钠、硫代硫酸钠，磷酸二氢钠，苯乙酰胺及消泡剂，钠，苯乙酰胺及消泡剂，CaCO3等。接种量在等。接种量在20%，通气比控制在，通气比控制在1.2)m3/(m3min)，搅拌转速，搅拌转速为为150200r/min，罐压控制，罐压控制0.05 MPa，

17、于，于2526 下培养，发酵周期在下培养，发酵周期在200h左右。前左右。前60h pH为，而后为，而后pH稳定在左右；前稳定在左右；前60h温度为温度为26，以后为以后为24。 基质浓度的影响基质浓度的影响 培养基培养基 温度温度 pHpH值值 溶氧溶氧菌丝生长速度与形态、浓度菌丝生长速度与形态、浓度消泡消泡补料分批操作法补料分批操作法碳源：葡萄糖、乳糖；氮源：玉米浆碳源：葡萄糖、乳糖；氮源：玉米浆变温控制法，前期变温控制法，前期2526，后期，后期22 通气比为通气比为氨水调节，前期，中后期氨水调节，前期，中后期 发酵稳定期，湿菌占发酵稳定期，湿菌占1520%，丝状菌干重，丝状菌干重3%，

18、球状菌干重球状菌干重5%。中后期每天放一次，每次放掉。中后期每天放一次，每次放掉总发酵液的总发酵液的10%前期，间歇搅拌且不多加油脂；中期可加油控制，前期，间歇搅拌且不多加油脂；中期可加油控制，必要时降低空气流量，但搅拌应充足；后期尽量必要时降低空气流量，但搅拌应充足；后期尽量少加消泡剂少加消泡剂12345萃取：萃取：BABA多次萃取多次萃取发酵液的预处理：发酵液的预处理：冷却冷却 过滤：过滤：板框压滤机，絮凝剂板框压滤机，絮凝剂 脱色：脱色：活性炭活性炭结晶：结晶：醋酸钾醋酸钾- -丁醇丁醇 肖邦肖邦雪莱雪莱契诃夫契诃夫鲁迅鲁迅席勒席勒林徽因林徽因梭罗梭罗林黛玉林黛玉l链霉素又称链霉素A，属

19、氨基糖苷类抗生素，分子式为C21H39N7O12，由链霉胍、链霉糖和N-甲基-L-葡萄糖胺三个部分以苷键结合而成的糖苷。l硫酸链霉素为无臭或微臭的白色或类白色粉末，有引硫酸链霉素为无臭或微臭的白色或类白色粉末，有引湿性。湿性。l分子中有三个碱性基团，在中性溶液中以三价阳离子分子中有三个碱性基团，在中性溶液中以三价阳离子形式存在，可用离子交换法提取。形式存在，可用离子交换法提取。l在空气或日光中稳定。在空气或日光中稳定。l易溶于水，不溶于甲醇、氯仿和丙酮，硫酸盐难溶于易溶于水，不溶于甲醇、氯仿和丙酮，硫酸盐难溶于甲醇。甲醇。（1）菌种）菌种 早期的链霉素菌种是灰色链霉菌早期的链霉素菌种是灰色链霉

20、菌(Streptomyces griseus)，后来发现了比基，后来发现了比基尼链霉菌尼链霉菌(S.bikiniensis)、灰肉链霉菌、灰肉链霉菌(S.griseocarneus)等也可生产链霉素。等也可生产链霉素。1.链霉素的发酵工艺链霉素的发酵工艺发酵工艺要点发酵工艺要点斜面孢子培养斜面孢子培养摇瓶种子培养摇瓶种子培养种子罐扩大培养种子罐扩大培养发酵培养发酵培养 斜面孢子培养斜面孢子培养 将保藏在低温将保藏在低温(02)的砂土的砂土管中的菌种接种到斜面培养基上，接种后于管中的菌种接种到斜面培养基上，接种后于27下培养下培养67d，得到原始斜面，而后由原，得到原始斜面，而后由原始斜面的丰满

21、单菌落接种到子斜面上得到生产始斜面的丰满单菌落接种到子斜面上得到生产斜面，斜面，27下培养下培养67d。经两次传代后，可。经两次传代后，可纯化菌株。生产斜面菌落为白色丰满梅花或馒纯化菌株。生产斜面菌落为白色丰满梅花或馒头型，背面有淡棕色色素。合格的孢子斜面保头型，背面有淡棕色色素。合格的孢子斜面保存在冰箱存在冰箱(04)内。内。 培养基的成分：葡萄糖、蛋白胨、氯化钠和豌培养基的成分：葡萄糖、蛋白胨、氯化钠和豌豆浸液等。豆浸液等。 摇瓶种子培养摇瓶种子培养 生产斜面的菌落接种到生产斜面的菌落接种到摇瓶培养基中，得到摇瓶种子。摇瓶种摇瓶培养基中，得到摇瓶种子。摇瓶种子（母瓶）可以直接接种种子罐，也

22、可子（母瓶）可以直接接种种子罐，也可以扩大培养，用所得子瓶接种。发酵单以扩大培养，用所得子瓶接种。发酵单位、菌丝阶段、菌丝粘度或浓度、糖代位、菌丝阶段、菌丝粘度或浓度、糖代谢、种子液色泽和无菌检查为评价摇瓶谢、种子液色泽和无菌检查为评价摇瓶种子的重要指标，且冷藏时间不能超过种子的重要指标，且冷藏时间不能超过7天。天。 培养基的成分：黄豆饼粉、葡萄糖、硫培养基的成分：黄豆饼粉、葡萄糖、硫酸铵、硫酸钙。酸铵、硫酸钙。l种子罐扩大培养种子罐扩大培养 种子罐可分为种子罐可分为23级，用来扩大种子接种量。由于级，用来扩大种子接种量。由于1级种子级种子罐的接种量较小，因此培养液的体积有罐的接种量较小，因此

23、培养液的体积有所限制。而对于所限制。而对于2级种子罐，接种量为级种子罐，接种量为10%，到了最后，接种到发酵罐的接种，到了最后，接种到发酵罐的接种量在量在20%左右。左右。l发酵培养发酵培养 la. 培养基培养基 发酵培养基的成分为葡萄糖、黄豆发酵培养基的成分为葡萄糖、黄豆饼粉、硫酸胺、磷酸二氢钾、磷酸钙、玉米浆饼粉、硫酸胺、磷酸二氢钾、磷酸钙、玉米浆等。葡萄糖总量一般在等。葡萄糖总量一般在10%左右，磷酸盐浓度左右，磷酸盐浓度为为465mg/L，Fe2+浓度不能超过浓度不能超过60g/L。lb. pH值值 菌丝生长的菌丝生长的pH值为，生物合成最值为，生物合成最适适pH为。为。lc. 温度温

24、度 灰色链霉菌发酵温度在灰色链霉菌发酵温度在28.5左右最左右最适宜。适宜。ld. 溶氧溶氧 灰色链霉素是一种高度好气菌，在黄灰色链霉素是一种高度好气菌，在黄豆粉培养基内，增加通气量能提高发酵单位。豆粉培养基内，增加通气量能提高发酵单位。同时增加通气量也能升高同时增加通气量也能升高pH值。值。le. 补料补料 放罐时控制葡萄糖的浓度低于放罐时控制葡萄糖的浓度低于1%，以利于后续提取。以利于后续提取。lf. 消泡消泡 在发酵过程中泡沫较多，需补入消泡在发酵过程中泡沫较多，需补入消泡剂。剂。一次洗脱一次洗脱l 发酵液的过滤与预处理 工业上采用草酸调节发酵液的pH至，同时蒸汽加热到7075维持2mi

25、n，使蛋白质凝固，提高过滤速度。草酸酸化还可除去Ca2+。酸化液过滤后用NaOH调pH到可得到原滤液。原滤液链霉素浓度在5000U/ml左右。原滤液中Mg2+，可以加入三聚磷酸钠去除。l 吸附与洗脱 生产上主要使用羧酸树脂的钠型，提取链霉素后容易洗脱。流出液中的单位在100U/mL以下。国内生产一般应用弱酸1103或1014树脂，而在国外广泛使用一种大网络羧酸阳离子交换树脂Amber lite IRC-50。l 精制 洗脱液中含有较多的杂质，链霉素含量只有75%90%。可以采用高交联度的氢型磺酸树脂，除去洗脱液和工业硫酸带入的金属离子和阳离子化的有机分子杂质。酸性精制液用羟型阴离子交换树脂中和

26、酸，最后得到链霉素精制液。精制液以活性炭脱色，脱色后以Ca(OH)2调pH至，过滤后，进行真空薄膜蒸发浓缩。所得浓缩液仍有色素、热原等杂质，需进行第二次脱色，改善成品色泽和稳定性。成品浓缩，无菌过滤后喷雾干燥可得成品。链霉素的总收率为72左右。l四环素是四环类抗生素的典型代表，分子含氢化并四四环素是四环类抗生素的典型代表，分子含氢化并四苯母核由放线菌产生。四环素为抑菌性广谱抗生素，苯母核由放线菌产生。四环素为抑菌性广谱抗生素，除革兰氏阳性、阴性细菌外，对立克次氏体、衣原体、除革兰氏阳性、阴性细菌外，对立克次氏体、衣原体、支原体、螺旋体均有作用。抗菌机理是阻止细菌氨酰支原体、螺旋体均有作用。抗菌

27、机理是阻止细菌氨酰基基-tRNA与核糖体相结合，抑制其蛋白质合成，但剂与核糖体相结合，抑制其蛋白质合成，但剂量大时对人的蛋白质合成亦有一定影响，易进入胎儿量大时对人的蛋白质合成亦有一定影响，易进入胎儿血液，孕妇忌用。本类药物可络合亚铁、钙、镁、铝血液，孕妇忌用。本类药物可络合亚铁、钙、镁、铝等离子成为难溶性络合物，影响口服的吸收，勿与硫等离子成为难溶性络合物，影响口服的吸收，勿与硫酸亚铁、氢氧化铝凝胶及牛乳等同服。酸亚铁、氢氧化铝凝胶及牛乳等同服。（三）四环素（三）四环素l四环素为黄色晶体，两性化合物，含有酸性的三羰基四环素为黄色晶体，两性化合物，含有酸性的三羰基甲烷系统甲烷系统(pka=3.

28、3)和酚二酮系统和酚二酮系统(pka=7.5)，碱性的二，碱性的二甲氨甲氨(pka=9.5)。能和各种酸、碱形成盐，临床上广泛。能和各种酸、碱形成盐，临床上广泛应用的是它们的盐酸盐形式。等电点应用的是它们的盐酸盐形式。等电点pH值为。当时，值为。当时，四环素难溶于水；当四环素难溶于水；当pH值值4或或8时，可以得到高浓时，可以得到高浓度的四环素水溶液。四环素不溶于与水不相互溶的的度的四环素水溶液。四环素不溶于与水不相互溶的的有机溶剂。四环素含有机溶剂。四环素含6分子结晶水，水的含量达到分子结晶水，水的含量达到19.6%。四环素在干燥条件下固体比较稳定，遇日光。四环素在干燥条件下固体比较稳定，遇

29、日光易变色，在酸性及碱性条件都不够稳定，易水解。易变色，在酸性及碱性条件都不够稳定，易水解。2. 四环素的发酵工艺过程四环素的发酵工艺过程（1）菌种）菌种 最早的金霉素菌种是最早的金霉素菌种是1948年由年由Duggar发现的金色链霉素发现的金色链霉素(streptomyces aureofaciens)，发，发酵水平为酵水平为165U/ml，以后发现在培养，以后发现在培养基中加入抑氯剂后，该菌能产生基中加入抑氯剂后，该菌能产生95%的四环素。的四环素。l红霉素属大环内酯类抗生素。它是由红霉素内酯环、红霉糖和红霉糖胺三个亚单位构成的14元大环内酯。抗菌谱广，对革兰氏阳性菌作用很强，对部分革兰氏

30、阴性菌（如淋球菌、脑膜炎双球菌等）也有效。临床上主要用于治疗呼吸道感染、皮肤与软组织感染、胃肠道感染等。其副作用较少，l尤其适用于青霉素过敏者。 l红霉素为白色或类白色的结晶性粉末，微有吸湿性，红霉素为白色或类白色的结晶性粉末，微有吸湿性，味苦，易溶于醇类、丙酮、氯仿、酯类，微溶于乙醚。味苦，易溶于醇类、丙酮、氯仿、酯类，微溶于乙醚。它在水中溶解度低，且随温度升高而降低，工业上常它在水中溶解度低，且随温度升高而降低，工业上常利用此性质，加热红霉素溶液使其结晶。红霉素为碱利用此性质，加热红霉素溶液使其结晶。红霉素为碱性化合物，能和无机或有机酸形成在水中溶解度较大性化合物，能和无机或有机酸形成在水

31、中溶解度较大的盐类。红霉素在的盐类。红霉素在pH68范围内稳定；碱性条件下，范围内稳定；碱性条件下，红霉素内酯环容易破裂；酸性条件下，分子中的糖基红霉素内酯环容易破裂；酸性条件下，分子中的糖基易水解。易水解。l（1）生产菌种）生产菌种l红霉素的产生菌是红霉素的产生菌是1952年年Mc.Quire等在菲律宾群岛发等在菲律宾群岛发现的红色霉菌（现的红色霉菌（Streptomyces erythreus），红霉素是），红霉素是红色链霉菌在特定培养条件下的一种代谢产物。目前红色链霉菌在特定培养条件下的一种代谢产物。目前采用该株的变异株生产红霉素。采用该株的变异株生产红霉素。l红霉素链霉菌在合成琼脂培养

32、基上生长的菌落是由淡红霉素链霉菌在合成琼脂培养基上生长的菌落是由淡黄色变为微带褐的红色，色素不渗透到培养基中，气黄色变为微带褐的红色，色素不渗透到培养基中，气生菌丝呈白色，孢子丝呈不紧密的螺旋状，约生菌丝呈白色，孢子丝呈不紧密的螺旋状，约35圈，圈，孢子呈球形。常用沙土管或冷冻管保存，以冷冻管保孢子呈球形。常用沙土管或冷冻管保存，以冷冻管保藏的种子质量更好。藏的种子质量更好。三级逆流萃取工艺流程三级逆流萃取工艺流程三级错流萃取三级错流萃取 料液经萃取后，料液经萃取后，所得萃取液多次所得萃取液多次与新鲜萃取剂接与新鲜萃取剂接触，进行反复萃触，进行反复萃取操作。取操作。 12354微生物转微生物转

33、化法化法酶工程法酶工程法蛋白质水蛋白质水解提取法解提取法化学合成法化学合成法微生物直微生物直接发酵法接发酵法溶解度和等电点法溶解度和等电点法特殊沉淀法特殊沉淀法 离子交换法离子交换法氨基酸的结晶与干燥氨基酸的结晶与干燥l（一）水解提取法生产胱氨酸（一）水解提取法生产胱氨酸l胱氨酸英文名为胱氨酸英文名为Cystine，别名：双巯丙氨酸，别名：双巯丙氨酸;3,3-二硫二硫代二丙氨酸。代二丙氨酸。L-胱氨酸为含硫氨基酸，广泛存在于毛、胱氨酸为含硫氨基酸，广泛存在于毛、发、骨、角中，可由蛋白质（如人发）水解、精制而发、骨、角中，可由蛋白质（如人发）水解、精制而得，或由半胱氨酸在碱性水溶液中氧化而成。在

34、人发得，或由半胱氨酸在碱性水溶液中氧化而成。在人发和猪毛中含量最高。人发含胱氨酸约为和猪毛中含量最高。人发含胱氨酸约为8%10%，猪，猪毛约为毛约为6%8%。l胱氨酸能促进细胞氧化还原功能，使肝脏功能旺盛，胱氨酸能促进细胞氧化还原功能，使肝脏功能旺盛，并能中和毒素、促进白细胞增生、阻止病原菌发育等并能中和毒素、促进白细胞增生、阻止病原菌发育等作用。主要用于各种脱发症。也用于痢疾、伤寒、流作用。主要用于各种脱发症。也用于痢疾、伤寒、流感等急性传染病、气喘、神经痛、湿疹以及各种中毒感等急性传染病、气喘、神经痛、湿疹以及各种中毒疾患等。并有维持蛋白质构型作用。疾患等。并有维持蛋白质构型作用。l胱氨酸

35、是由两分子半胱氨酸脱氢氧化而成，含两个氨胱氨酸是由两分子半胱氨酸脱氢氧化而成，含两个氨基、两个羧基和一个二硫键。纯品为白色六角形板状基、两个羧基和一个二硫键。纯品为白色六角形板状晶体或结晶粉末，无味。有三种异构体。熔点：左旋晶体或结晶粉末，无味。有三种异构体。熔点：左旋体体258261（分解），右旋体（分解），右旋体247249（分解），（分解），消旋体消旋体260（分解）。（分解）。pI为为4.6，溶于水，不溶于乙醇，溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂。易溶于酸、碱溶液中，在热碱液中易分等有机溶剂。易溶于酸、碱溶液中，在热碱液中易分解。解。 赖氨酸（赖氨酸（lusine，Lys）为碱性）为碱性必需

36、氨基酸。由于谷物食品中的必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量很低，且在加工过程赖氨酸含量很低，且在加工过程中易被破坏而缺乏，故称为第一中易被破坏而缺乏，故称为第一限制性氨基酸。赖氨酸广泛存在限制性氨基酸。赖氨酸广泛存在与各种蛋白质中，肉。蛋。乳等与各种蛋白质中，肉。蛋。乳等蛋白中含量较高（蛋白中含量较高（79%），鸡），鸡卵蛋白中高达卵蛋白中高达13%。目前赖氨酸。目前赖氨酸的生产多采用微生物直接发酵法。的生产多采用微生物直接发酵法。l赖氨酸化学名称为赖氨酸化学名称为2,6-二氨基己二酸。赖氨酸含有二氨基己二酸。赖氨酸含有2个个氨基氨基(-NH2)和和1个羧基个羧基(-COOH)，是一种具有

37、明显碱性，是一种具有明显碱性的氨基羧酸（见图的氨基羧酸（见图12-16）。按光学活性分）。按光学活性分,赖氨酸有赖氨酸有L型、型、D型和型和DL型型3种构型。只有种构型。只有L型才能被生物利用，型才能被生物利用，故通常所说的赖氨酸均指故通常所说的赖氨酸均指L型。由于游离的赖氨酸易吸型。由于游离的赖氨酸易吸收空气中的收空气中的CO2，一般制成赖氨酸盐酸盐。赖氨酸盐，一般制成赖氨酸盐酸盐。赖氨酸盐酸盐含氮酸盐含氮15.34%，相对分子质量为。纯品为白色单斜相对分子质量为。纯品为白色单斜晶形粉末，无臭，味甜，比旋光度为晶形粉末，无臭，味甜，比旋光度为+21，pI值为，值为，熔点为熔点为263264。

38、易溶于水，在水中溶解度。易溶于水，在水中溶解度0时为，时为，25时为时为89g/100ml，50时为。不溶于乙醇和于醚。时为。不溶于乙醇和于醚。Click to add TextClick to add TextClick to add Text ContentsThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Gui

39、ld Design Inc.Description of the contentsDescription of the contentsDescription of the contents2006200720082. Describe contents for a Chart Description of the companys sub contents Description of the companys sub contents1. Describe contents for a Chart Description of the companys sub contents Descr

40、iption of the companys sub contentsTitleTitleTitleTitleChart Title in heretext in heretext in heretext in heretext in hereContents01Contents02Contents03Contents04Contents05Contents060% 20% 40% 60% 80% 100% 18.5%17.5%8.7%23.6%63.6%84.3%ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall deve

41、loped by Guild Design Inc.Text in hereText in hereText in hereThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents

42、mall developed by Guild Design Inc.Title in here2.Description of the companys sub contentsDescribe a vision of company or strategic contents1.Description of the companys sub contentsThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc. Description of the content

43、s Description of the contents Description of the contentsTitle Description of the contents Description of the contents Description of the contentsTitleThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.Level 1 Level 2Level 3Level 4Level 5 Description of the co

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45、emeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developedby Guild Design Inc.A GroupC GroupB GroupThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.2003.10 Add Your Text2003.10 Add Your Text2003.10 Add Your Text2004.10 Add Your Text2004.10 Add Your

46、 Text2004.10 Add Your Text2005.10 Add Your Text2005.10 Add Your Text2005.10 Add Your Text2007.10 Add Your Text2007.10 Add Your Text2007.10 Add Your TextDescribe a vision of company or strategic contents.Describe a vision of company or strategic contents.Describe a vision of company or strategic cont

47、ents.Describe a vision of company or strategic contents.Description of the productsText in hereText in hereText in hereText in hereText in hereDescription of the contentsThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.50%24%10%16%ProductsDescription of the

48、companys productsServiceDescription of the companys serviceTechnologyDescription of the companys technologyMarketDescription of the companys market50%24%16%10%2006TextTextText20072008Text in hereText in hereText in hereText in hereText in hereText in hereThemeGallery is a Design Digital Content &

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51、y Guild Design Inc.Text in hereThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developedby Guild Design Inc.Text in hereText in hereText in hereText in hereTitle in hereText in hereText in here2005200620072008 Description of the contents Description of the contents Description of the co

52、ntents Description of the contents Description of the contents Description of the contents Description of the contents Description of the contentsThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.Text in hereText in hereText in hereThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.Add your text in hereText1Text2Text3Text4Text5Add your text in hereAdd y