口腔医学论文一种新型口腔修复纳米树脂生物安全性的初步评价

1、口腔医学论文：一种新型口腔修复纳米树脂生物安全性的初步评价摘要目的：通过黏膜刺激实验和溶血试验初步评价（）复合树脂的生物安全性。方法：溶血试验：将复合树脂加工成直径，重量为克的圆片个分别装入个装有生理盐水的试管中作为实验组，以生理盐水和蒸馏水分别作为阴、阳性对照组。将稀释新鲜抗凝人血加入所有试管中，在离心机上离心，分别吸取上清液，用分光光度仪在波长处测定其光吸收度，计算复合树脂的溶血率。黏膜刺激实验：按照国家关于口腔材料生物学试验方法，选择健康家兔只，将实验材料（复合树脂）和阴性对照材料（医用牙胶）缝合于一侧颊黏膜上，另一侧为空白对照。周后进行肉眼观察评价和组织学评价。结果：溶血试验：复合树脂

2、溶血率为，低于，根据（），复合树脂不会引起溶血。黏膜刺激试验：复合树脂材料及阴性对照组均未出现局部及全身的不良反应，临床及病理反应等级属于无刺激。结论：复合树脂与稀释抗凝人血不会发生溶血且对试验动物颊黏膜无不良刺激反应。关键词复合树脂生物安全性溶血试验口腔黏膜刺激实验光固化复合树脂是口腔科目前常用的充填材料和修复材料之一，牙科光固化复合树脂具有色泽美观，强度高，临床操作方便，粘结固位效果好等优点，在牙科修复领域引起了广泛关注，。近日，由哈尔滨工业大学航天学院与哈尔医科大学口腔医学院修复科共同研制开发的一种新型纳米材料，叫复合树脂，是将以比例加入到传统光固化复合树脂中合成的。复合树脂经初步验证具

3、有很好的物理性能，化学性能和机械性能，在抗压伸、弯曲、剪切力方面比以往的纳米材料也有了明显的提高。鉴于其以上良好的性能，期望复合树脂能应用于口腔临床。与人体组织相接触的材料，要求对人体应无毒性，无刺激性，无致癌性和致畸变等作用。复合树脂是一种与人体组织长期接触的材料，对黏膜无刺激性，溶血率低于，有良好的生物安全性。复合树脂作为一种新型材料，在应用于临床之前，需进行生物学评价，根据不同的临床应用，选择不同的生物安全性评价。而溶血试验和口腔黏膜刺激实验是评价口腔材料生物安全性的必须实验。材料与方法溶血试验材料实验材料复合树脂（哈尔滨工业大学提供）；新鲜稀释抗凝人血。 实验仪器分光光度仪；超声波清洗

4、器；恒温浴箱；台式离心机；移液管；移液舱；分析天平。 实验试剂整个分析过程中，使用分析纯试剂及蒸馏水；生理盐水：；新鲜抗凝人全血：每新鲜人全血中加人（）草酸钾生理盐水液，于使用前配制，贮存于（±）下。方法试件准备将复合树脂加工成直径，重量为的圆片个，经生理盐水超声清洗，烘干备用。血的制备抽取健康人血。在的新鲜抗凝全血中加入约的生理盐水。调整生理盐水的用量，使稀释后的抗凝血在蒸馏水中于处的吸光度值为±。将稀释抗凝血贮存于（±）中。实验步骤将实验试件放入试管中，试管中加入生理盐水，取两个试管做对照组，阴性对照组：生理盐水。阳性对照组：蒸馏水。将所有试管置于恒温水浴箱中

5、保持，在每个试管中加入稀释人血缓慢混合，再放入恒温水浴箱中保持。所有试管经离心（，）后，分别吸取各试管上清夜移入型分光光度仪测量杯于处测定其光吸收度，记录每组只试管的均值。根据中华人民共和国医药行业标准，按下列公式计算血百分率：溶血血百分率（·试件一·阴性对照）（·阳性对照一·阴性照）×。黏膜刺激实验材料实验材料复合树脂（哈尔滨工业大学提供）；口腔用牙胶（上海齿科材料厂生产）实验动物健康家兔只（哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心提供），随机编号（），雌雄均可但雌性应无孕，体重，双侧颊黏膜无病变。实验药品及辅助材料戊巴比妥钠，新洁尔灭，福尔

6、马林，医用无损伤缝合针线。以上均为哈尔滨医科大学口腔医学院提供。方法试件制备将复合树脂填入直径为厚度为模具内，光固化灯光照，固化后获得实验组试件个，将加热后的牙胶充填入模具固化后获得阴性对照组试件个。在各试件上用高速手机打两个距离为，直径为的小圆孔，将制备好的个试件进行打磨抛光，蒸馏水超声冲洗，烘干，消毒，备用。试件缝合用戊巴比妥钠耳缘静脉注射将家兔麻醉，固定于实验台上，新洁尔灭消毒家兔口腔内外。用的缝合线将制备好的试件固定于家兔的颊黏膜，穿过黏膜全层及皮肤。试件与黏膜密贴但无压力。一侧为实验组和阴性对照组，另一侧为空白对照组。临床观察术后每天观察家兔的饮食及活动情况。周后将动物处死，观察与试

7、件直接接触的黏膜情况，是否有充血、糜烂、溃疡等异常改变。根据表临床表现反映分级进行评定，如只以上有重度反应就认为该材料有黏膜刺激性。组织学观察周后将家兔处死（空气栓塞），取与试件接触的黏膜全层，福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片，染色。根据组织学观察结果，按照表、的病理反应评分标准对实验材料组织反应进行评定。结果溶血试验溶血程度用百分率表示，按公式：溶血百分率（试件一阴性对（阳性对照一阴性对照）×。结果见表。通过软件进行单因素方差分析，样品组与阴性对照组比较值大于，无统计学意义。样品组和阴性对照组与阳性对照组比较值小于，有显著差异，有统计学意义。样品的溶血率为，小于。离心后试管中红细胞

8、下沉，上清液无红色，吸取少量含红细胞的下层液进行显微镜下观察，未发现红细胞破象，参照一（）规定，溶血试验合格，可以认为复合树脂不引起急性溶血。黏膜刺激实验临床观察通过术后两周的观察发现，家兔饮食情况良好，活动正常，全身无不良反应。周后将家兔处死，发现阴性对照组试件脱落一片，其余均固位良好。取下所有试件，观察与试件接触部位黏膜，其中只家兔实验组侧出现轻度红斑，只家兔阴性对照侧出现轻度红斑，已排除线头反应。其余黏膜均无充血、糜烂、溃疡、红斑等异常表现。组织学观察只家兔实验侧以及只对照侧黏膜出现异常组织改变，黏膜上皮出现轻度糜烂，结缔组织中有少量炎细胞浸润，血管充血，据评分等级均属轻度炎症。其余黏膜

9、上皮均连续完整，无糜烂，无溃疡；无血管充血，结缔组织中无炎细胞浸润，基底膜完整，细胞排列整齐无水肿变性。对黏膜无刺激。实验组与对照组无明显差异。讨论光固化复合树脂是口腔科目前常用的充填材料和修复材料之一，由于外形美观且在临床上操作方便，在口腔领域里的应用越来越广泛。复合树脂是将加入到光固化复合树脂中合成的一种有机无机杂化纳米材料，复合树脂良好的物理性能、化学性能和机械性能，都基于本身的笼状结构赋予它的优势，与树脂之间结合的更加紧密。复合树脂做为一种新材料在应用于临床之前，需进行生物安全性评价。故本实验选用两种临床常用的实验方法：溶血试验和黏膜刺激实验，对其进行生物安全性初步评价。溶血试验是通过

10、材料与血液直接接触可检测材料的可溶性或释放性成分的溶血性能及材料表面的溶血性能。该试验是评价材料体外急性溶血活性、鉴定血液相容性的最基本方法之一，能敏感的反映试样对红细胞的影响。材料和血液接触时，其溶血成分的存在可导致红细胞破坏、血红蛋白释放，从而使游离血浆血红蛋白增加，产生对机体的毒副作用。溶血试验标准中提到溶血程度小于时不会发生溶血；同时，阳性对照组吸收值应在±范围内，阴性对照组光吸收值小于，否则试验不可进行。本实验稀释抗凝人血选自健康成人，离心，比标准（）加大了离心力，上清液更加橙明，所以结果就更加精确，更有说服力。本实验结果显示阴性对照组光吸收值为，阳性对照组光吸收值为，符合

11、溶血试验标准，通过软件单因素方差分析，样品组与阴性对照组比较，无统计学意义。样品组和阴性对照组与阳性对照组比较，有显著差异，有统计学意义。所以本实验可行。复合树脂光吸收值为，溶血率为，小于，且每组试验的个试样之间的溶血率的偏差远小于标准中的，说明复合树脂与稀释抗凝人血不会发生溶血，符合生物材料的溶血实验要求。口腔黏膜刺激试验是评价与口腔黏膜短期或长期接触的材料对黏膜产生的刺激作用。该实验已被国际标准化组织列为评价口腔材料生物安全性的必需实验。实验根据"牙科学用于牙科的医疗器械生物相容性临床前评价牙科材料实验方法"国际标准，结合中华人民共和国医药行业标准（口腔材料生物试验方法

12、）进行，以口腔黏膜刺激试验作为二级试验或应用前试验，为其临床应用提供依据。黏膜刺激试验标准中提到的实验动物是金仓鼠，应用金仓鼠两侧颊囊缝合试件。但由于考虑到其携带病源微生物容易引起感染，因此本实验选择家兔作为实验动物。本实验未设阳性对照而是在家兔一侧颊黏膜分别缝合实验组和阴性对照组，贯通皮肤，另一侧为空白对照，这样实验组与对照组均在同一只家兔，避免了由于个体差异造成的误差；且实验前后均未使用抗生素，避免了药物对家兔机体的干扰，所以实验结果更加准确可信。根据口腔黏膜临床表现分级标准，本实验实验组与阴性对照组临床观察对黏膜均无刺激性。根据口腔组织反应显微镜评分标准和表病理反应分级得出：实验组和阴性对照组无明显差异，且与家兔正常黏膜基本一致。复合树脂不会发生急性溶血反应且对口腔黏膜无刺激性，初步评价有良好的生物安全性。至于其临床疗效还需要进一步观察和实验研究。参考文献：谭彦妮，刘咏，向其军牙科光固化复合树脂材料的性能与展望粉末冶金材料科学与工程，（），（）：，（）刘玉红，何惠明，郑亚萍，