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文档简介

1、ELISA的标准曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如：Curve Exert1.3下面以Curve Exert1.3为例说明怎么样制作：1 启动“Curve Expert1.3”2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图：3单击运行 按钮（上图红圈圈），出现如下对话框 4单击ok按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框 关闭下面一个对话框 5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1”开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线，。 根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：注意：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框右

2、上角有“r”值 ，当“r”值越接近1拟合度越好 7按Ctrl键+L键，（或者在上图的界面上点击鼠标右键，出现analyze选项），出现如下对话框： 8输入标准的OD值，单击Calculate按忸，即可得到待测蛋白的实际含量。（标本稀释了N倍，运算出的数值应再乘以N）。9. 如想得到ELISA拟合曲线的方程，可在步骤6的对话框空白处右击，选择”Information” 10. 得到如下对话框：点击“Copy”在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx2)当抗原或抗体浓度过高时，对应的ELISA读数不会再显著升高，这时会达到一个平台期，同样在低浓度时也有一个平台期。只有在适当的浓度时才会出现类似直线的曲线，所以一般数据都要进行多参数拟和，才能得到能更准

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