二苯乙烯苷对血糖波动性糖尿病小鼠血糖、血脂及肾脏功能的影响.docx

1、论著基础研究二苯乙烯昔对血糖波动性糖尿病小鼠血糖、血脂及肾脏功能的影响陈雪I张嫄怡'李品玉1杨坚段文彪2（肇庆医学高等专科学校1病理学与病理生理学教研室R2学校办公室广东省肇庆市5260201电子邮箱ichenxuegd）【摘要】目的观察二苯乙烯昔（TSG）对血糖波动性糖尿病小鼠血糖、血脂及肾脏功能的影响朗方法将40只小鼠分为正常对照组（A组）、正常血糖波动TSG治疗组（B组）、血糖波动性糖尿病组（C组）、血糖波动性糖尿病TSG治疗组（D组）针每组10只啪C组、D组小鼠给予腹腔注射链脉佐菌素建立糖尿病小鼠模型府建模成功后再给予B组、C组、D组小鼠腹腔注射葡萄糖府30min后竹给予C组、

2、D组小鼠皮下注射普通胰岛素13U府建立血糖波动性糖尿病小鼠模型府在此基础上竹日组、D组小鼠给予灌胃50mg/kgTSGfl连续干预8周用干预8周后的比较4组小鼠的体重、空腹血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇、三酰甘油、血肌酣、血尿素氮的水平的以及平均血糖（MBG）水平、血糖水平标准差（SDBG）、最大血糖波动幅度（LAGE）M结果干预8周后杞组与D组小鼠的体重均轻于A组与B组府空腹血糖、MBG、SDBG、LAGE及血清HbA1c、总胆固醇、三酰甘油、血肌酢、血尿素氮水平均高于A组与B组府且C组的空腹血糖、MBG、SDBG、LAGE及血清总胆固醇、三酰甘油、血肌酎、血尿素氮水平均高于D组

3、（均P<0.05）0而C组与D组、A组与B组之间的体重及血清HbA1c水平比较府以及A组与B组之间的空腹血糖、MBG、SDBG、LAGE及血清总胆固醇、三酰甘油、血肌酢、血尿素氮水平比较府差异均无统计学意义（均P>0.05）折结论TSG可降低血糖波动性糖尿病小鼠的血糖与血脂水平砰保护其肾脏功能用【关键词】糖尿病口血糖波动如二苯乙烯昔W肾功能0小鼠【中图分类号】R587.1【文献标识码】A【文章编号】0253一4304（2021）19一2327一04D0l：10.11675/j.issn.0253_4304.2021.19.14Effectsof2tf3Hf5HF4'tetr

4、ahydroxystilbene206DglycosideonbloodglucoseiiTbIoodlipidandrenalfunctionsindiabeticmicewithbloodglucosefluctuationCHENXue1ifZHANGYuan_yi1tfLIPin_yu1ffYANGJian1«fDUANWen'biao2（1DepartmentofPathologyandPathophysiologyif2SchoolOHicefifZhaoqingMedicalCollegeZhaoqing526020WChina）LAbstractjObject

5、iveToobservetheeffectsof2诉3504tetrahydroxystilbene208Dglycoside（TSG）onbloodglucosetfbloodlipidandrenalfunctionsindiabeticmicewithbloodglucosefluctuation.MethodsFortymiceweredividedintonormalcontrolgroup（groupA）tfnormalbloodglucosefluctuationandTSGtreatmentgroup（groupB）tfdiabeteswithbloodglucosefluct

6、uationgroup（groupC）anddiabeteswithbloodglucosefluctuationandTSGtreatmentgroup（groupD）Hwith10miceineachgroup.MiceingroupsCandDweregivenanintraperitonealinjectionofstreptozotocintodevelopmicemodelsofdiabetes府thenmiceingroupsBHCandDwereinjectedwithglucoseintraperitoneallyaftersuccessfulmodelingtf30minu

7、teslater府miceingroupsCandDwereinjectedsubcutaneouslywith1-3Uofordinaryinsulintoestablishmicemodelsofdiabeteswithbloodglucosefluctuation.Besides府miceingroupsBandDwereintervenedbyintragastricadministrationof50mgIkgTSGforeightconsecutiveweeks.Aftereightweeksofinterventionl（fmice'sbodyweight昕FBGtfhe

8、moglobinA1c（HbA1c）WTC昕TGtfserumcreatinineandbloodureanitrogen（BUN）levelsaswellasmeanbloodglucose（MBG）levelsstandarddeviationofbloodglucose（SDBG）andlargestamplitudeof基金项目二广东省肇庆市科技创新指导类项目（201804031402021040315010）作者简介二陈雪（1986女i硕士f讲师研究方向二糖尿病肾病的病理生理i通信作者二段文彪（1973）1男1本科副教授i研究方向二解剖学i电子邮箱:dwbnl163.corn!gly

9、cemicexcursions(LAGE)府werecomparedamongthefourgroups.ResultsAftereightweeksofinterventionbodyweightofmicewaslowertfFBGtfMBGlifSDBGandLAGEwereincreased的andserumHbAlcflTCTG的creatinineandBUNlevelswerehigheringroupsCandDthaningroupsAandBlmoreovergroupCexhibitedelevatedFBGHTMBGtfSDBGandLAGE府andhigherseru

10、mTCtfTGtfcreatinineandBUNlevelsthangroupD(allP<0.05)JI1nostatisticallysignificantdifferencewasfoundinbodyweightorserumHbA1clevelbetweengroupCandgroupDHforbetweengroupAandgroupBJPFBGtfMBGHfSDBG面LAGEtfserumTCtfTGtfcreatinineorBUNleveldidnotshowstatisticallysignificantdifferencebetweengroupAandgroup

11、B(allP>0.05).ConclusionTSGcanreducebloodglucoseandbloodlipidlevelsindiabeticmicewithbloodglucosefluctuationandprotecttheirrenalfunctions.LKeywords】DiabetesmellitustBloodglucosefluctuationHf2贵3诉5诉4tetrahydroxystilbene208DglycosideRenalfunctionHfMouse糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病w是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损川或两者兼有引起糖、

12、脂肪、蛋白质代谢紊乱为主要特征的慢性代谢性疾病n可导致多系统功能损害#出现眼、肾、神经、心脏、血管等组织及器官的慢性进行性病变、功能减退甚至衰竭N随着我国经济的高速发展R人们生活方式的改变以及人口老龄化的到来0糖尿病发病率逐年升高W已经严重威胁到人们的健康与生命月根据国际糖尿病联盟报告显示彳2019年全球约有4.63亿成人患有糖尿病f而中国的糖尿病患者数量为1.164亿口"当糖尿病患者没有得到充分的医疗支持时#将面临严重的并发症患病风险彳如心脑血管疾病、失明、肾功能衰竭等W这严重影响患者的生活质量R增加其医疗费用$加重家庭负担N糖尿病所引起的肾功能损害是糖尿病的严重并发症之一W也是糖

13、尿病致死的主要原因N二苯乙烯昔（3t54tetrahydroxystilbene208DglycosideTSG）是中药何首乌中主要的水溶性生物活性成分j具有降血脂、抗炎、抗氧化、抗动脉血管硬化、抗衰老和神经保护等作用H本研究观察TSG对血糖波动性糖尿病小鼠血糖、血脂及肾脏功能的影响彳探讨TSG对血糖波动性糖尿病小鼠肾脏的保护作用#现报告如下N1材料与方法1. 1实验动物选取45只健康雄性昆明小鼠B体重2530g#购自广东省医学实验动物中心R许可证号：SCXK（粤）2018一000,饲养环境湿度及温度适宜f12h昼夜交替彳标准饲料喂养彳自由进食和饮水月1.2实验分组、模型制备与干预方法将45只

14、雄性小鼠按随机数字表分为正常对照组（A组）1。只正常血糖波动TSG治疗组（B组）10例和糖尿病模型组25只给予糖尿病模型组25只小鼠禁食12h后清晨空腹左下腹腔内注射60mg/kg的链脉佐菌素（北京索莱宝科技有限公司i批号:917G031）l72h后取尾静脉血检测血糖随机血糖216.7mmol/L则视为糖尿病小鼠模型造模成功4本研究造模成功率为92%（23/25）I将造模成功的糖尿病模型组小鼠按随机数字表分为血糖波动性糖尿病组（C组）10只、血糖波动性糖尿病TSG治疗组（D组）10只剩余其他小鼠交由实验动物中心处理N以糖尿病小鼠模型造模成功当天作为实验开始彳B组、C组、D组小鼠给予腹腔注射2g

15、/kg葡萄糖彳2次/分别于每日08:00与14:00进行注射:C组、D组小鼠在腹腔注射葡萄糖30min后皮下注射普通胰岛素13LH造成血糖波动I!给予B组、D组小鼠50mg/kgTSG（上海士锋生物科技有限公司t批号:178031025）灌胃i2次/分别于每009:0。及17二00给药f连续干预8周jA组大鼠于同时间段给予等量生理盐水灌胃N1.3观察指标（1）一般情况二实验开始后每天观察各组小鼠的一般情况彳包括精神状态、活动情况、饮食、大小便、毛发等6每周称体重1次#（2）血糖监测及血糖波动性二实验开始后彳每周进行1次7个时间点（同一天）的血糖检测彳时间分别是08:00.08:30.10:00

16、,14:00（14:30,16:00.20:00共测量8周H取小鼠尾静脉血采用罗氏血糖仪及配套试纸进行血糖测定E记录血糖数据彳计算各组小鼠即日内血糖波动评估参数，包括平均血糖（meanbloodglucose*'MBG）水平、血糖水平标准差（standarddeviationofbloodglucose#SDBG）、最大血糖波动幅度（largestamplitudeofglycemicexcursions#!LAGE）jMBG反映血糖平均水平jSDBG反映血糖离散程度RSDBG离平均值越远小离散程度就越大#表示血糖波动越大PLAGE即日内血糖最高值与最低值fLAGE越大彳血糖波动幅度就

17、越大目比较各组小鼠干预8周后的MBG、SDBG.LAG曰（3）肝肾功能二干预8周后f各组小鼠禁食10hi自由饮水终点当08:0010:00之间称重后f采用10%水合氯醛腹腔注射麻醉小鼠取尾静脉血采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖；心脏取血1mU3000r/min离心5min分离血清标本备用E采用高效液相离子交换色谱法检测糖化血红蛋白（hemoglobinA1clHbA1c）的含量f采用全自动生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油、血肌酎、血尿素氮的含量N其中彳糖化血红蛋白试剂盒购自上海伯乐生命医学产品有限公司（批号：740）4总胆固醇试剂盒购自北京普利莱生物技术公司（批号:E1005）J三酰甘油试剂盒购

18、自北京普利莱生物技术公司（批号:E1003）!血肌酎试剂盒购自南京建成生物工程研究所（批号:C011-2_1）i血尿素氮试剂盒购自南京建成生物工程研究所（批号：C013_2_1）l1. 4统计学分析采用SPSS22.0软件进行统计学分析n计量资料用均数士标准差（x：n）表示多组间比较采用单因素方差分析i两两比较采用LSD"t检验以P<0.05表示差异具有统计学意义N2结果2. 14组小鼠一般情况的比较干预8周后彳A组、B组小鼠反应敏捷#精神状态佳彳毛发白亮且有光泽彳摄食量、摄水量及尿量均正常0C组、D组小鼠消瘦彳毛发粗糙且无光泽彳有脱落彳活动减少#动作迟缓2精神萎靡R出现“三多

19、一少”（多饮多食多尿彳体重减轻）的糖尿病表现n2.24组小鼠体重及血糖变化的比较干预8周后R4组小鼠的体重、空腹血糖、MBG、SDBG及LAGE比较#差异均有统计学意义（均p<0.05）（其中C组与D组小鼠的体重均低于A组与B组彳空腹血糖、MBG、SDBG及LAGE均高于A组与B组彳且C组的空腹血糖、MBG、SDBG及LAGE均高于D组（均P<0.05）1而C组与D组、A组与B组之间的体重比较E以及A组与B组之间的空腹血糖、MBG、SDBG及LAGE比较差异均无统计学意义（均P>0.05）»见表"表14组小鼠体重及血糖变化的比较（X±0组别n体重

20、（g）空腹血糖（mmol/L）MBG(mmol/L)SDBG(mmol/L)LAGE(mmol/L)A组1045.00±1.836.69±0.886.88±0.311.26±0.095.63±0.89B组1046.50±2.326.52+1.067.71±0.491.64+0.327.23±1.13C组1040.30±2.9L20.70±1.40部24.74±0.9产3.75±0.45*b17.93±4.10*bD组1041.70±2.5CTb19.22&

21、#177;1.l3Tb#21.65±0.7羿2.49±0.3羿11.26±1.僧F值14.049466.0021922.974111.89959.460P值<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001注二与A组比较彳:水P<0.05与B组比较#bP<0.05!与C组比较W#P<0.05#2.34组小鼠血脂及肾功能指标的比较干预8周后油、血肌酎、血尿素氮水平均高于D组（均P<0.05）J而彳4组小鼠的血清HbA1c、总胆固醇、三酰甘油、血C组与D组之间的血清HbA1c水平比较巾以及A组与B肌酎、血

22、尿素氮水平比较#差异均有统计学意组之间的血清HbA1c、总胆固醇、三酰甘油、血肌酉干、血义（均P<0.05）其中C组与D组小鼠的上述指标水尿素氮水平比较差异均无统计学意义（均P>0.05）1平均高于A组与B组T且C组的血清总胆固醇、三酰甘见表2月表24组小鼠血脂及肾功能指标的比较（X士$)组别n总胆固醇(mmol/L).三酰甘油（mmol/L）HbA1c(%)血肌酎（“mol/L）血尿素氮（mmol/L）A组102.610±0.5631.192±0.2474.469±0.88960.100±10.9605.350±0.932B组10

23、2.750±0.6921.365±0.2514.302±0.70673.700±10.1445.290±1.213C组1013.570±2.183*b7.661±1.378心12.700±2.124部172.500±15.537*b20.870±4.109*bD组1010.220±1.61b#5.734±1.022"13.460±1.52V151.600±12.91艺b#13.760±2.0死F值147.513135.812124.30

24、9197.84397.115P值<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001注二与A组比较*P<0.05与B组比较*bP<0.05!与C组比较彳#P<0.0513讨论糖尿病常见的并发症有多发性神经炎、失明、肢体坏疽、肾衰竭等0持续性的慢性高血糖是引起糖尿病慢性并发症的关键因素j动物实验研究发现j在高糖、高脂及腹腔注射STZ诱导的糖尿病动物模型中小交替注射葡萄糖及胰岛素引起的血糖波动可导致肾功能损伤1X1I在临床上f血糖波动性糖尿病比持续性高血糖糖尿病患者更为多见$且血糖波动性糖尿病对机体的危害更大场叮本研究结果显示，干预8周后C组

25、、D组小鼠的体重轻于A组、B组（P<0.05）J且出现多食、多饮、多尿等现象#提示血糖波动性糖尿病小鼠造模成功N本研究结果还显示n干预8周后C组与D组的空腹血糖、MBG、SDBG、LAGE0以及血清HbA1c、总胆固醇、三酰甘油、血肌酉干、血尿素氮水平均高于A组与B组（均P<0.05）J说明血糖波动越大i小鼠的肾功能损伤就越严重HTSG是何首乌中主要的水溶性生物活性有效成分彳具有降血脂、抗炎、抗氧化、抗动脉血管硬化、抗衰老和神经保护、肾脏保护等作用。本研究结果显示8C组的血清总胆固醇、三酰甘油水平均高于D组2330(均P<0.05)J这说明TSG对血糖波动性糖尿病小鼠的血脂具

26、有调节作用N可能原因是TSG可抑制内源性三酰甘油的合成#改善脂质在体内分布以及在内脏器官的沉积彳提高肝细胞内脂蛋白脂肪酶、肝脂酶的活性0加速三酰甘油的分解彳从而减少肝细胞内三酰甘油的堆积口斗中f有研究发现R在糖化血红蛋白水平相近的患者血糖波动较大者的慢性并发症发病率和危害性更高#血糖波动被视为糖尿病心血管并发症的预测因子8斗本研究结果显示iC组与D组小鼠的血清HbA1c水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)TSG不仅有降血脂的作用还可改善糖尿病小鼠的胰岛素抵抗口研究表明血糖滞动可能引起染色体重构、炎症反应、氧化应激增强10(因此彳在糖尿病的治疗中W不能完全依赖HbA1c水平来评估疗效

27、W更要关注血糖波动的情况用毛细睡邈家骤毓腆鸟瞬FO勰辩脏的血管*且糖尿病最常见的并发症之一是肾功能损伤N研究发现#血糖波动可促进糖尿病慢性肾功能损伤的发生发展R血糖波动越大彳糖尿病肾病发生率越高E叮本研究结果显示C组与D组小鼠的血清肌酎、尿素氮水平均高于A组与B组$且C组的血清肌酎、尿素氮水平均高于D组(均P<0.05)1、表明长期的血糖波动会导致糖尿病小鼠肾功能受损斤引起血清肌酎与尿素氮水平升高N原因可能是糖尿病患者血糖波动会引起氧化应激、炎症反应、血管内皮细胞损伤、胰岛B细胞功能缺陷及胰岛素抵抗、凝血机制活化WU长期的血糖波动还会增加氧化应激，氧化与抗氧化系统失衡小产生的活性氧物质可

28、引起炎症细胞的招募彳促进炎症介质的释放彳引起慢性的炎症反应#从而加重肾的损伤J给予TSG干预后£血糖波动性糖尿病小鼠的肾功能损伤减轻W说明TSG对血糖波动性糖尿病小鼠的肾功能有一定的保护作用N原因可能是TSG具有强大的抗氧化作用0可以减少超氧化自由基的损伤彳有效改善糖尿病小鼠体内氧化应激指标W逆转糖尿病小鼠体内的氧化与抗氧化失平衡0减轻氧化应激的损伤程度口4I张园等口刃研究发现8TSG对2型糖尿病大鼠具有抗炎、抗氧化作用R而且能抑制主动脉的细胞凋亡相关基因核因子KB的表达N还有研究发现R白藜芦醇联合TSG可能通过抗肾脏衰老#延缓糖尿病肾病的进展NTSG可通过减少脂质的过氧化反应彳减弱

29、超氧自由基对血管内皮细胞的损伤作用t从而在一定程度上防治糖尿病肾病口3】J综上所述#TSG可降低血糖波动性糖尿病小鼠的GuangxiMedicalJoinnaOcL202lWVol.43WNo.19血糖与血脂水平R保护其肾脏功能N目前TSG对糖尿病肾损伤的保护作用主要集中于降血脂、抗氧化应激方面的研究R下一步应探索TSG在糖尿病肾损伤中保护作用的分子机制R为糖尿病的预防及治疗提供新的理论依据片参考文献1 王淑君高超.糖尿病患者更要警惕低血糖访华中科技大学同济医学院附属协和医院孙晖教授J.保健医苑2020(2):5-8.2 王宏杨N迟继铭彳姜雪N等.何首乌提取物二苯乙烯昔药理及临床研究进展J.中

30、华中医药学刊i2019-'37(10):2464-2469.3 RiosJU'FranciniFitSchinellaGR.Naturalproductsforthetreatmentoftype2diabetesmellitusJ.PlantaMed#2015(81(12/13):975-994.4 YingCfZhouXChangZietal.BloodglucosefluctuationacceleratesrenalinjuryinvolvedtoinhibittheAKTsignalingpathwayindiabeticratsJ.Endocrine22016-53(1):81-96.5 毕双杰i叶山东.血糖波动对糖尿病肾病的影响J.中国临床保健杂志&#