ABI7500校正步骤

1、ABI7500校正软件版本：SDS2.0.4或1.4.校准前准备A.原校准文件备份到SDSDocuments中把原校准文件拷出来进行备份，以防如果本次校准某个环节没通过，还可以使用原校准文件，以保证机器的运行。B.校正试剂板融化回复到室温C.准备96孔反应盘托1 .校准1.ROI(regionofinterest)校准试剂板采用ROI(含各种荧光染料)，先后校正五个通道。进入1.4software中点击instrument,在下拉菜单中选择calibrate；A.首先点击blockup让热盖升起B.点击Snapshot照相，如果96孔没有全呈现白色，调节ExposureTime然后再点击Sna

2、pshot进行照相，直到96孔刚好到都呈现白色和极个别孔有一点点红色之间的临界状态，然后点击GenerateCalibration查看校正的结果，当WeelsFound显示数值为96,SaveCalibration显示为可点击状态时这个通道校正成功，然后点击SaveCalibration保存校正结果，此时下面的通道符号后对应显示为OK。依次将5个通道校正完毕。C.如果因灯光强度不足造成校正通过不了，可清洁灯泡或更换卤素灯，然后再做校正2.背景校准:A.原理：7500使用背景校正文件去除以后实验中的背景荧光，主要检测通道是否有污染存在，试剂盘里为纯水B.判断标准：A-D通道不能超过72000;E

3、通道不能超过900001.4版本软件和2.04版本软件适用这同一标准C.校正步骤C.11.4软件在NewDocument中的Assay的下拉菜单中选择Background,2.04软件在InstumentMaintenanceManage用选择BackgroundC.2放入Background试剂盘，运行程序C.3结果分析：A-D通道不能超过72000;E通道不能超过90000C.4BLOCK清洁处理：对于Background数值超过标准的孔用纯水处理BLOCK,无纺布擦干，再用10%乙醇处理BLOCK,无防布擦干。C.5清洁过后再次进行Background校正，达到标准后点击Extract将

4、数据结果提取到文件中。图1为09年6月17日做的背景校正，各孔线均匀整齐，都在范围之内。图2为10年11月3日做的背景校正，孔A6A通道荧光值超过72000此仪器目前使用09年的校准数据，因孔的不正，有所偏移，各别孔的荧光值无法准确读取，直接影响到CT值。3.光学校正:A.原理：7500软件产生五通道对于7500系统物理影响的数据补偿。B.试剂盘：ROI试剂盘C.校正步骤C.11.4软件在NewDocument中的Assay的下拉菜单中选择Calibration,2.04软件在InstumentMaintenanceManage用选择OpticalCalibrationC.2放入ROI试剂盘，

5、运行程序，60度5minC.3结果：5个通道都有一定的数值范围。C.4点击Extract将数据结果提取到文件中一1j*XfaHJ,w*41rdrmDitWmWt*Mvi*-3713-ewrJrFADI皿*.-3!fl，E.era.WRWE?BOJRVj=nw室3-1-BuwfaAAWnacfiina.孑EKOTTrn?Bii!FWU7HETt=rt产*aTWEq，im,aixnhiLZY至一jZXHUhEr-0jt*rT.iaFIu3y.H.一m、R立1*vuTE.1*!a-aWF2MHI*A-:WKC-.VK-L-丁、A4-%3u.jnriM*MS力?KLV一-U.-LrfinLj.lMM1

6、-1*1w哥kJMlif*r.,nffifiacrn七7h=iWjuW*SrWr1：*,；则.朝?!利:JiAfh11T*Fr*,1*I4WWlli*MrTMfr*MJanw速a,*wiVM0*rnv-5I*44MWFWmwJttFT专科*4Hr现tfrfER9CDVFffpjr-:wr*F.*fK3F1STWW=Mn4M1WliWnfw.SFWWFRPWi，-1-iBJiPE1*/1ftwrVW1nRW，立*；*3rTmur_XH一VFMFCUM.i*i刃一曲wwAFIMM*.IHfriV*MW.XJ*-*-*HTMJr1*jntwJR,51呼:JMAj，m,wwHErMKMWJKT.1J3

7、-Mr-*1WHVnw.JKFXrd%,；tfVI-nM*EWsmUl#MTY,，7WmaWHnTWklLW需FWWJUU.TM.ncjLAEH;*rEIHKMM*CI10SflE.AflH+iUi.一立辛MSBJM.hfKVa三:EML.nm野EVwW*Ntev,fWM4PMKTrtiisril-JW-MMr-ITrJiMHFI匚品GE仁*J-dUi1*uiaTUWEifHvJW3FiDuO*W7航0i3W4r占小*wn.Uh*OA.1J*UTa/bO-IJI辛gKJJAh“ir!bUHdU4ms.*季MNRWB*1手一n*wiXrxMmi*iWW1事,w$?6sjurjp聿炉营4,纯荧光校

8、正：A.原理：使用96孔纯荧光反应板运行程序，获得纯荧光数据，以确定仪器中所使用的纯荧光特征。对以下十种荧光进行校正。B.试剂盘：dye试剂盘C.校正步骤C.11.4软件在NewDocument中的Assay的下拉菜单中选择PureSpectra2.04软件在InstumentMaintenanceManage用选择PureSpectraC.2放入dye试剂盘，依次完成10个染料的校正，每个程序运行，60度5min每个染料校正完应进行提取保存。1. CY3CY5CBN980+/口;l汝心门划创口与E依+MW，.小师”，?itrJ:一二；3or000平口l/IVdtilld/加陋广SOICOOrwitamniMM”*auujojVdlAIVl8qa人SFEaK-R。XOd9*Hd一二-Mg(IM